钱文溢
- 作品数：15 被引量：24H指数：4
- 供职机构：南京医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学社会学更多>>
- 双酚A对大鼠背根神经节神经元钙离子通道电流影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨双酚A对大鼠背根神经节(DRG)神经元钙离子通道影响。方法 SD大鼠,周龄4～6周,采用酶消化法急性分离大鼠背根神经节神经元,分别采用全细胞膜片钳技术和激光共聚焦技术记录钙电流和KCl激发钙瞬变的变化。结果双酚A(0.1、1、10、100μmol/L)呈浓度依赖性抑制大鼠背根神经节神经元钙电流,对钙通道的半数最大抑制浓度(IC50)为11.41μmol/L;10μmol/L双酚A显著改变Ca2+通道的激活特性,电流激活曲线去极化方向移动(P<0.05),该浓度双酚A同样可以抑制50 mmol/L KCL激发瞬时胞内钙浓度增加。结论双酚A对大鼠背根神经节神经元钙离子通道具有抑制作用。
- 王文娟王军钱文溢朱勤肖杭
- 关键词：钙通道激光共聚焦钙瞬变
- 甲基苯丙胺急性暴露对小鼠神经元的损伤作用研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨甲基苯丙胺（METH）急性暴露后引起神经元的损伤作用。方法甲基苯丙胺给与小鼠后，对小鼠的刻板行为进行评分，通过Y水迷宫的方法评估小鼠空间记忆能力。分子水平，试剂盒法检测皮层区诱导型NO释放水平，利用Western-blot法观察神经元凋亡标志性蛋白Bax、Bcl2及Caspase3表达水平。在细胞水平，利用彗星实验，观察甲基苯丙胺对原代培养神经元DNA的损伤情况。利用JC-1探针观察甲基苯丙胺对神经元线粒体膜电位的改变。此外，通过Western-blot法，阐述MAPKs通路在METH引起神经元损伤中的潜在作用。结果METH显著增加小鼠的刻板行为，且明显降低小鼠空间识别能力。在分子层面，发现诱导型NO含量显著增高，相应凋亡蛋白Bax和cleavedcaspase-3的表达增高，神经元细胞膜电位的下降。进一步研究发现，MAPKs在METH处理后，通路激活，磷酸化水平显著增高。预孵p38MAPK抑制剂SB203580后，METH引起凋亡蛋白表达增高的趋势降低。结论METH可多途径引起神经元损伤，激活MAPKs通路，而p38-MAPK可能参与了METH引起的神经元的损伤。
- 蒋雷钱文溢张劲松王军陈旭锋孙昊肖杭
- 关键词：甲基苯丙胺神经元损伤
- 应用ERKO小鼠观察双酚A对雄性小鼠睾丸与附睾的影响及雌激素受体的作用特点被引量：5
- 2013年
- 目的探讨双酚A(BPA)对雄性小鼠生殖系统的影响及雌激素受体(ERs)的作用特点。方法野生型(WT)、雌激素受体基因敲除(αERKO和βERKO)小鼠随机分为对照组和BPA组100μg/(kg·d),连续经口灌胃染毒30 d后,观察小鼠睾丸和附睾脏器系数、精子畸形率以及睾丸组织形态学变化。荧光定量PCR法检测睾丸和附睾中ERs mRNA表达的变化。结果 BPA使WT雄性小鼠附睾脏器系数降低,精子畸形率升高,睾丸组织形态学观察,发现有病理变化。当BPA作用于αERKO和βERKO小鼠后,附睾脏器系数也降低,精子畸形率也升高,睾丸组织形态学也出现病变。荧光定量PCR实验发现BPA可使睾丸和附睾中ERαmRNA表达降低、睾丸中ERβmRNA表达降低。结论 BPA能够对雄性生殖系统产生毒性作用,ERα和ERβ在此过程中可能起了重要作用,这为BPA等环境雌激素毒性机制提供了依据。
- 王强钱文溢刘景丽陆荣柱程洁王军肖杭
- 关键词：双酚A
- 甲基苯丙胺通过L型钙通道诱导Ca2+内流引起神经元损伤
- 目的通过观察甲基苯丙胺对皮层神经元胞内钙离子和钙相关蛋白的变化,探讨L型钙通道在甲基苯丙胺诱导神经元损伤中的作用。方法 CCK-8细胞计数试剂盒检测神经元活力的变化;彗星实验和Hoechst染色观察神经元DNA和细胞核的...
- 钱文溢朱晶颖王军肖杭
- 关键词：甲基苯丙胺神经元凋亡
- 文献传递
- 应用ERKO小鼠研究雌激素受体在MPTP致帕金森病模型中的作用
- 2012年
- 目的:探讨雌激素受体(estrogen receptors,ERs)在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中的作用特点。方法:应用经典化学毒素MPTP腹腔注射制备小鼠PD模型,WT、αERKO和βERKO雄性小鼠随机分为Saline组和MPTP组,爬竿试验观察行为学改变,荧光定量PCR法检测纹状体和中脑ERα、ERβ、TH、DAT和VMAT2 mRNA表达的变化。结果:与WT相比,αERKO小鼠中多巴胺缺失程度更大,爬竿试验显示αERKO小鼠更早出现行为学异常。αERKO和βERKO小鼠中脑TH、DAT和VMAT2 mRNA表达均降低。WT小鼠MPTP染毒致PD模型后,纹状体和中脑ERαmRNA表达增加,ERβmRNA表达降低。MPTP致PD模型后,αERKO和βERKO小鼠TH和DAT mRNA表达变化情况与WT小鼠不同,βERKO小鼠VMAT2 mRNA表达变化情况与WT小鼠相同,但αERKO小鼠VMAT2 mRNA表达变化情况与WT小鼠不同。结论:ERs在黑质纹状体DA系统中有神经保护作用,ERα亚型在此过程中发挥着更重要的作用。
- 王强王宇钱文溢王军肖杭董海蓉丁海霞
- 关键词：雌激素受体基因敲除小鼠帕金森病
- 硫化氢中毒对大鼠肺钠水主动转运功能的影响
- 2014年
- 目的:观察硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)中毒对大鼠肺钠水主动转运功能的影响,并探讨其机制。方法:SD大鼠充分暴露于亚致命浓度(300 ppm)的H2S气体3 h,分别于暴露后6、12、24 h检测大鼠肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC)和肺干湿比,光镜下观察肺组织HE染色,透射电镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞的改变,real-time PCR检测肺组织α-上皮钠通道(epithelial sodium channel,ENaC)mRNA的表达,Western blot检测肺组织α-ENaC以及ERK1/2的蛋白表达。结果:SD大鼠暴露于H2S后,与对照组比较,AFC明显下降,在暴露后6 h最低;肺含水量在暴露后6 h最高,并在12 h恢复至正常水平;光镜下,暴露后24 h大鼠肺组织出现明显损伤性改变;大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞在暴露后出现线粒体脊断裂、板层小体崩解;大鼠肺组织中α-ENaC mRNA在暴露后6 h表达增多,在12 h恢复至正常水平;α-ENaC的蛋白表达与对照组相比,则在暴露后6 h明显降低;大鼠肺组织ERK1/2磷酸化水平在暴露后6 h显著增高。结论:硫化氢中毒降低了大鼠AFC,其机制可能是下调了α-ENaC的表达,并且ERK1/2信号通路的激活可能参与了整个损伤过程。
- 苏成磊张华忠陈俊杰钱文溢张劲松
- 关键词：硫化氢肺泡液体清除率ERK1
- TEA敏感型钾电流在gp120引起的海马神经元损伤中的作用
- 2015年
- 目的:探讨gp120对TEA敏感型钾电流的作用以及该电流在gp120引起神经元损伤中的作用。方法 :分离怀孕18d SD大鼠胎鼠的海马神经元作为实验对象,分为对照组和gp120处理组,利用全细胞膜片钳的方法记录外向延迟钾电流的变化,通过MTT和TUNEL的方法分别观察gp120处理后神经元的活力和凋亡情况。Western blot观察Kv2.1钾通道的蛋白表达变化以及在TEA敏感型钾电流中的贡献度。结果:gp120能引起外向钾电流明显增大,具有浓度依赖性,其中TEA敏感型成分参与了外向钾电流的增大。此外,MTT和TUNEL实验发现,gp120能引起神经元活力的下降和凋亡,而钾通道抑制剂TEA能缓解由gp120引起的细胞损伤。进一步实验表明,gp120可上调TEA敏感型成分中Kv2.1钾通道的表达,且其特异性抑制剂Gx TX-1E能显著抑制神经元中TEA敏感型钾电流成分。结论:TEA敏感型钾电流参与了gp120引起的神经元损伤过程,其重要组成成分Kv2.1通道蛋白上调,提示该通道蛋白可能参与了gp120引起的细胞损伤。
- 余鹏飞蒋雷钱文溢周景王易欣肖杭王军
- 关键词：GP120海马神经元
- ERα基因敲除小鼠的繁育及子代小鼠基因型的鉴定被引量：7
- 2011年
- 目的探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础。方法用4种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性ERα基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增ERα基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察结果。HE染色观察雌、雄性ERα-/-小鼠生殖系统表型变化。结果 WT、ERα+/-、ERα-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性ERα-/-小鼠无繁殖能力。与WT比较,雄性ERα-/-小鼠睾丸脏器系数降低,睾丸病理变化表现为生精小管管腔膨胀,生精细胞层变薄,且排列不规则;雌性ERα-/-小鼠子宫脏器系数降低,子宫和卵巢病变明显,表现为:子宫浆膜、肌层、内膜层细胞排列不规则,卵巢有囊性病变、充血,无黄体。结论雌、雄性ERα+/-小鼠交配是繁育ERα-/-小鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定ERα-/-小鼠,ERα-/-小鼠的获得为ERα蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型。
- 王强钱文溢刘景丽朱勤程洁王宇丁海霞肖杭
- 关键词：雌激素受体Α基因敲除小鼠基因型
- 甲基苯丙胺暴露对神经病理性蛋白APP及p-tau表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的 :观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)暴露后神经病理性蛋白β-淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)及p-tau表达的改变。方法 :将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、生理盐水组,Meth组,Meth组腹腔注射给予10 mg/kg的剂量,1 d 2次,连续7 d。利用高尔基银染法观察Meth作用后大脑神经元数量及棘突的改变;采用Western blot法检测Meth暴露后神经病理性蛋白APP,p-tau表达的改变。结果:高尔基银染结果显示,Meth组与生理盐水组及对照组比较,神经元数量及棘突显著减少。通过Western blot发现Meth能剂量依赖及时间依赖性上调病理性蛋白β-APP及p-tau的表达,具有显著性差异(P<0.05)。此外,通过预孵L型钙通道的抑制剂硝苯地平,发现Meth引起的APP及p-tau上调显著被抑制。结论:Meth暴露可引起阿尔兹海默样病变,因而该研究可为Meth引起认知能力下降提供部分解释。
- 程洁蒋雷钱文溢肖杭王军陈旭锋
- 关键词：甲基苯丙胺APP神经损伤
- 甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞损伤作用
- 2013年
- 目的观察甲基苯丙胺(Meth)通过电压门控钾离子通道亚型1.3、1.5(Kv1.3、Kv1.5)对大鼠胎鼠小胶质细胞的损伤作用。方法 SD胎鼠原代培养小胶质细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法观察Kv1.3、Kv1.5表达变化。结果 Meth呈浓度依赖性降低小胶质细胞活力,增加小胶质细胞凋亡;Kv1.3的抑制剂MgTx对Meth所致小胶质细胞损伤有部分保护作用;与对照组(1.047±0.165)比较,300μmol/L Meth组小胶质细胞Kv1.3 mRNA表达(7.453±0.675)增高(P<0.05),MgTx组Kv1.3 mRNA表达(1.684±0.875)低于Meth 300μmol/L组(P<0.05);Meth对Kv1.5 mRNA表达无影响。结论 Meth可引起小胶质细胞损伤,其机制可能与Kv1.3表达变化有关。
- 赵晶晶钱文溢刘景丽周景高蓉王军肖杭
- 关键词：小胶质细胞原代培养钾通道
