郭姣洁 作品数:10 被引量:17 H指数:3 供职机构: 石家庄科技信息职业学院 更多>> 发文基金: 博士科研启动基金 教育部留学回国人员科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 理学 更多>>
D-氨基酸氧化酶的表达纯化及酶学特性研究 D-氨基酸氧化酶(D-AAOs,EC1.4.3.3)是一种黄素酶类,可氧化D-氨基酸的氨基生成相应的酮酸和氨,在体内D-氨基酸代谢中起着重要作用,并广泛存在于生物界中。从众多的研究结果看来,到目前为止对来源于原核生物的D... 郭姣洁关键词:D-氨基酸氧化酶 PCR 定点突变 底物 文献传递 原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶及突变体的酶学特性 被引量:3 2014年 【目的】研究原玻璃蝇节杆菌(DSM 20168)中D-氨基酸氧化酶的酶学特性。【方法】通过PCR从原玻璃蝇节杆菌(DSM 15035,20168)中克隆获得D-氨基酸氧化酶基因apdaao-1和apdaao-2,构建原核表达载体,以表达质粒pET-ApDAAO-2为模板,采用QuickChange Site-Directed Mutagenesis技术构建定点突变体,经过原核表达及纯化获得重组型和突变体酶蛋白,分析其酶学特性。【结果】通过原核表达及纯化成功获得了2个重组蛋白和4个突变体酶蛋白,SDS-PAGE检测显示其分子量均约为36 kDa;酶学特性分析表明,ApDAAO-2和突变体蛋白的最适反应温度为30℃;ApDAAO-2和T286A的最适反应pH范围为7.0-11.0,其它突变体为8.0-11.0;ApDAAO-2和突变体都具有较广泛的底物特异性,除T256K的最适底物为D-Phe外,其余均为D-Met;动力学参数测定结果显示,以二级表观常数kcat/Km表示,对于底物D-Met或D-Phe,ApDAAO-2和4个突变体的kcat/Km值均比ApDAAO-1和pKDAAO高数倍以上。【结论】ApDAAO-2及突变体具有比ApDAAO-1和pKDAAO更广泛的底物特异性和较高的催化效率,有一定的商业应用价值。 冯利伟 郭姣洁 李辉欣 徐书景 鞠建松 赵宝华关键词:D-氨基酸氧化酶 定点突变 D-氨基酸氧化酶研究进展 被引量:5 2010年 D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase:oxidoreductase,DAAO,EC1.4.3.3)是一种以黄素腺嘌呤(FAD)为辅基的典型黄素蛋白酶类,可氧化D-氨基酸的氨基生成相应的酮酸和氨。在体内D-氨基酸的代谢中起着重要作用。主要介绍了D-氨基酸氧化酶的生理功能和应用、表达条件优化及通过定点突变对酶学性质的研究。 郭姣洁 薛永常 徐书景 张彩凤 何广正 鞠建松关键词:D-氨基酸氧化酶 生理功能 定点突变 枯草芽孢杆菌对饲用西瓜营养品质与产量的影响 2024年 本文借助随机区组试验设计,设置0 g/L(CK)、0.2 g/L(BS1)、0.5 g/L(BS2)、0.9 g/L(BS3)、1.4 g/L(BS4)5个枯草芽孢杆菌浓度梯度,研究枯草芽孢杆菌对饲用西瓜品质指标、矿质营养指标及产量构成因子的影响,以期为西瓜的优质高产提供技术支撑,为畜禽养殖提供质优价廉的新型饲料原料。结果表明,适宜浓度的枯草芽孢杆菌能显著提高饲用西瓜可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸和瓜氨酸含量,且以BS3处理最高,较对照分别增加21.03%、36.21%、58.14%、42.24%,BS2次之;降低硝酸盐含量,且以BS3处理下含量最低,较对照降低20.90%,与对照差异极显著(P<0.01)。枯草芽孢杆菌对N、P、K、Ca^(2+)、Mg^(2+)含量的影响存在一定的阈值,当其浓度不高于0.9 g/L时对上述指标有正向促进作用,且在0.5~0.9 g/L浓度范围内的效果相对较好。枯草芽孢杆菌对瓜数的影响不显著(P>0.01),但在0.5~0.9 g/L浓度范围内能显著提高西瓜的大小一致性,提高平均单瓜质量和产量。 陈昆 马月霞 郭姣洁 姜涛关键词:枯草芽孢杆菌 营养品质 谷氨酰胺对肉仔鸡生长性能和盲肠沙门氏菌定植的影响 被引量:4 2019年 文章旨在研究谷氨酰胺对肉鸡生长性能和盲肠沙门氏菌水平的影响。试验1选择1日龄AA肉仔鸡234只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复26只鸡,对照组饲喂玉米-豆粕型日粮,处理1组饲喂基础日粮(在3日龄感染3.6×10^6cfu沙门氏菌),处理2组饲喂基础日粮+10g/kg谷氨酰胺(在3日龄感染3.6×10^6cfu沙门氏菌)。试验2选择1日龄AA肉仔鸡312只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复26只鸡,对照组和处理1组同试验1,处理3组同试验1的处理2组,但肉鸡感染7.5×10^6cfu沙门氏菌试验2处理2组饲喂基础日粮+10g/kg谷氨酰胺(不感染沙门氏菌)。两个试验均开展14d。试验1:日粮添加谷氨酰胺对肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05)。试验2:处理2组较其他组显著提高了1~7d肉鸡的体重和日增重(P<0.05)。肉鸡感染沙门氏菌4或10d后,日粮添加谷氨酰胺对盲肠沙门氏菌含量无显著影响(P>0.05)。结论:日粮添加1%谷氨酰胺可以提高肉鸡生长性能,但并没有降低盲肠沙门氏菌水平,这说明日粮中添加1%谷氨酰胺不足以达到降低盲肠沙门氏菌的最佳水平。 刘玲 种克 郭姣洁关键词:肉鸡 谷氨酰胺 沙门氏菌 盲肠 饲粮含硫氨基酸水平对断奶仔猪生长性能、肠道形态及酶活性的影响 被引量:1 2019年 文章旨在研究饲粮含硫氨基酸水平对断奶仔猪生长性能、肠道形态及酶活性的影响。试验选择体重接近的28日龄断奶仔猪80头,称重后随机分为试验1、2、3、4组,各组饲粮中含硫氨基酸含量分别0.49%、0.64%、0.79%、0.94%,共进行21d。试验结果,仔猪平均日采食量(ADFI)随着饲粮中含硫氨基酸水平增加出现先增加后下降的趋势,料肉比(F/C)与之趋势相反,当含硫氨基酸含量为0.79%时(试验3组)生长性能最好。其中,试验2、3组仔猪平均日增重(ADG)较试验1组分别增加12.5%、15.9%(P<0.05),F/C较试验1组分别降低10.8%、12.4%(P<0.05)。饲粮中含硫氨基酸水平显著影响仔猪空肠形态,而对十二指肠、回肠形态无显著影响(P>0.05)。相比于试验1组,试验2、3、4组空肠绒毛高度(VH)分别增加8.6%、11.7%、9.1%(P<0.05),空肠隐窝深度(CD)分别下降22.6%、16.4%、12.7%(P<0.05),试验2、3组绒毛高度和隐窝深度比(V/C)较试验1组分别增加24.3%、17.4%(P<0.05)。除此之外,饲粮中含硫氨基酸显著影响仔猪空肠中碱性磷酸酶(ALP)活性(二次P<0.05)及麦芽糖酶活性(P<0.05)。综上所述,饲粮中含硫氨基酸水平显著影响断奶仔猪小肠发育及空肠内酶活性,改善生长。 郭姣洁 苏玲 刘玲关键词:断奶仔猪 含硫氨基酸 肠道形态 酶活性 Effects of the Ice Bath Time after Heat Shock and the Incubation Time on the Efficiency of Chemical Transformation Method 被引量:2 2010年 [Objective] The aim of the research was to study the effect of the ice bath time after heat shock and the incubation time on the transformation efficacy,and to establish a simple and quick transformation method.[Method]Competent cells were prepared with two buffer solutions;with the ice bath time after heat shock and the recovery time as the variables,the relationship between these two factors and transformation efficacy was studied.[Result]The transformation efficacy was the best when the ice bath time was 2 min and the recovery time was 30 or 40 min;when the ice bath time and the recovery time was 0 min,a certain amount of transformants still could be obtained.[Conclusion]The ice bath time after heat shock and the recovery time had certain impact on transformation efficacy,but they were not the decisive factors.Therefore,in the general transformation experiment,these two steps could be omitted. 郭姣洁 薛永常 薛张伟 徐书景 鞠建松热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响 被引量:2 2011年 [目的]研究化学转化过程中热激后冰浴时间和复苏时间对转化效率的影响,确定简便快速的转化方法。[方法]采用2种缓冲溶液制备感受态,以热激后冰浴时间或复苏时间为变量,研究这2个因素与转化效率的关系。[结果]冰浴2 min,复苏30或40 min达到最佳转化效率;冰浴和复苏时间为0 min时仍能获得相当数量的转化子。[结论]热激后冰浴和复苏时间对转化效率有一定影响,但不是决定性因素。因此,在一般性转化试验中可以省略这2个步骤以节省时间。 郭姣洁 薛永常 徐书景 马书娜 鞠建松关键词:感受态细胞