蔡亦红 作品数:31 被引量:65 H指数:5 供职机构: 安徽医科大学公共卫生学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 博士科研启动基金 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 理学 轻工技术与工程 更多>>
卫生微生物学开展设计性综合实验教学模式的分析 2016年 在卫生微生物学实验教学改革中,采用设计性综合实验模式,概述卫生微生物设计性综合实验的选题以及如何开展实验教学,对教学效果予以探讨,分析在实施过程中需要重视的问题。设计性综合实验对提升学生的自学能力,增强实验技能,培养科研素养,树立团队协作精神有很大的帮助,有效提高教学质量。 蔡亦红关键词:卫生微生物学 教学改革 人巨细胞病毒增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞 被引量:4 2006年 目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)AD169株在体外增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞。方法在长成单层的Balb/c新生乳鼠的大脑皮质神经细胞培养物上,接种TCID50为5×103/3ml的HCMVAD169株感染的HF细胞上清液。通过相差显微镜、PCR、RT-PCR、间接免疫荧光、TCID50、透射电镜等方法观察和鉴定HCMV在神经细胞内的感染状况。结果接种病毒的大脑皮质神经细胞在感染后第1天即可观察到特征性细胞病变效应,且随着感染时间的延长病变逐渐加重;HCMVIE和UL83DNA及mRNA检测均可见阳性条带;HCMVpp65蛋白免疫荧光检测亦为阳性,蛋白质表达量随着培养时间的延长明显提高;TCID50检测随着感染时间的延长病毒滴度逐渐上升;在神经元胞浆内通过透射电镜观察到病毒颗粒。结论HCMVAD169株可能具有增殖性感染乳鼠大脑皮质神经细胞的能力。 蔡亦红 高荣保 王明丽弓形虫通过STAT3-miR17~92-Bim信号通路调控人巨噬细胞凋亡的研究 背景:弓形虫是一种人畜共患、广泛传播、专性寄生于温血动物有核细胞内的机会性致病原虫。在细胞内寄生的演化过程中,弓形虫具备了通过多种途径来抑制凋亡的机制,使虫体获得了繁殖与发育的充分条件,一方面有利于与虫体的增值,另一方面... 蔡亦红关键词:弓形虫 巨噬细胞 信号通路 基因芯片 文献传递 Chinese1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析 2015年 目的构建弓形虫Chinese 1基因型Tg Ct Wh3(以后均简称Wh3)株棒状体蛋白(rhoptry protein,ROPs)16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至p MD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3D结构。结果各组均PCR扩增出约2.1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p EGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以p ET-28a和p EGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。 唐媛媛 莫绪维 陈鹤 李群 蔡亦红 沈继龙关键词:弓形虫 克隆 生物信息学分析 一种新的截短的HSV-ⅡgD重组抗原的制备及特异性鉴定 目的;克隆表达一种自行设计的截短的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)gD(gDt)特异性抗原片段,并验证该抗原的特异性.
方法:从感染的HSV-Ⅱ细胞上清液中提取病毒DNA,根据Genbank中的HSV-ⅡgD基因... 蔡亦红 王明丽关键词:克隆表达 酶联免疫吸附测定 免疫诊断 文献传递 人巨细胞病毒感染小鼠大脑皮质细胞的体内外实验研究 目的:研究人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)在体外可以增殖性感染新生小鼠大脑皮质细胞;在体内可以先天性潜伏感染小鼠大脑皮质细胞,并且可以被再激活。
方法:体外试验:选用HCMVA... 蔡亦红关键词:人巨细胞病毒 先天性感染 文献传递 2019—2022年铜陵市B型Victoria系流感病毒HA和NA基因进化特征分析 2024年 目的分析2019—2022监测年度铜陵市B型Victoria系流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的遗传进化特征。方法选取2019—2022年度本实验室分离的22株B型Victoria系流感病毒进行全基因组测序,利用生物信息分析软件进行序列对比和系统进化分析。结果2019—2022年铜陵市季节性流感主要以B型Victoria系流感为主,归属于V1A.3分支,其中2021—2022年分离的14株归属V1A.3a.2分支。与疫苗株相比,22株B型Victoria系流感的HA与NA蛋白均出现多个氨基酸变异位点,HA蛋白的四个主要抗原表位(120环、150环、160和190螺旋)均有变异,NA蛋白耐药位点未检测出变异,HA蛋白197 NETQ糖基化位点也发生改变。结论2019—2022年铜陵市B型Victoria系流感病毒的HA蛋白的氨基酸位点部分发生了变异现象,这可能导致抗原表位的漂移变化,因此需要进一步加强流感病毒变异监测。 张义华 叶梦 周马云 李承宝 金玲娟 陈娟 蔡亦红关键词:B型流感 抗原表位 3种食源性致病菌的多重PCR快速检测方法的建立 被引量:18 2007年 目的:建立快速检测食源性致病菌的多重PCR方法。方法:本研究根据肠毒性大肠埃希菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)的大肠杆菌不耐热毒素(Heat labileenterotoxin,LT)的B亚单位(LTB)、伤寒沙门菌(Salmonella typhi)的侵袭蛋白A(invasion protein A,invA)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)侵袭性质粒抗原H基因(invasion plasmid antigen H,ipaH),分别设计了三对引物,预计PCR扩增的目的基因片段为194、279和435 bp。对单个基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及建立L16(43)正交试验对单管多重PCR扩增条件如引物浓度、dNTP浓度和Tm值等的优化,建立了快速检测肠毒性大肠埃希菌、伤寒沙门菌和福氏志贺菌的稳定的单管多重PCR方法。结果:该方法检测的灵敏度分别为:145 pg/ml肠毒性大肠埃希菌的基因组DNA、100 ng/ml伤寒沙门菌的基因组DNA、7 ng/ml福氏志贺菌的基因组DNA,与单基因PCR检测的灵敏度相同。并且模拟检测食品中的细菌,结果很稳定。结论:该方法操作简单、检验周期短、特异性和灵敏度高,能够快速地实现对食品中的多种致病菌的诊检和监控。 蔡亦红 姚余有关键词:多重PCR 食品检验 伤寒沙门菌 福氏志贺菌 弓形虫Chinese 1基因型虫株感染对小鼠海马体细胞超微结构的影响 被引量:1 2022年 目的观察弓形虫Chinese 1优势基因型TgCtwh3和TgCtwh6虫株对小鼠海马体细胞超微结构的影响。方法6周龄的雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、TgCtwh3感染组、TgCtwh6感染组,每组6只。对照组腹腔注射无菌PBS;TgCtwh3感染组腹腔注射4000个TgCtwh3速殖子,饲养6 d;TgCtwh6感染组灌胃20个TgCtwh6包囊,饲养6周。所有动物经取材、制片,并用透射电子显微镜观察。结果与对照组相比,TgCtwh3感染组海马体细胞出现核皱缩坏死,胞质、轴突肿胀,细胞器消失,轴索断裂等病理变化。与对照组相比,TgCtwh6感染组海马体细胞出现线粒体肿胀、空泡化、嵴断裂消失、膜破裂,脂褐素沉积,高尔基体扩张等病理变化。结论TgCtwh3和TgCtwh6感染小鼠均出现海马体细胞超微结构的改变,TgCtwh3感染组多表现为不可逆的细胞坏死,而TgCtwh6感染组表现出线粒体结构破坏为主的慢性细胞损伤,这为探讨弓形虫脑病的致病机制奠定基础。 王崇 王崇关键词:弓形虫 海马 超微结构 小鼠 Chinese 1型弓形虫眼病小鼠NK细胞亚群的初步分析 被引量:1 2022年 目的建立我国Chinese 1优势基因型获得性弓形虫眼病小鼠模型,分析弓形虫感染对眼组织局部NK细胞及CD49a^(+)NK细胞亚群的影响。方法C57BL/6小鼠经口感染20个弓形虫Wh6包囊,30d后取眼组织,苏木精和伊红(H&E)染色检查病理变化;采用PCR扩增眼组织中的弓形虫ITS-1基因;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组化方法分析眼组织中的干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子的mRNA及蛋白表达水平;对眼组织转录组测序,进行基因表达差异分析、GO(gene ontology)富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析;采用流式细胞术检测眼组织中NK细胞和CD49a^(+)NK细胞亚群水平。结果H&E染色检查感染组小鼠视网膜发生严重的病理改变,PCR扩增眼组织中弓形虫特异性基因ITS-1阳性,qRT-PCR扩增眼组织中细胞因子IFN-γ、TNF-α的mRNA表达上调(P<0.01),免疫组化检查视网膜中IFN-γ、TNF-α表达上调。转录组测序显示,感染组小鼠眼组织中有601个基因表达上调,108个基因表达下调,GO富集分析中差异表达基因在免疫反应、炎症反应等生物过程显著富集,KEGG富集分析显示31个差异表达基因富集在NK细胞介导的细胞毒性通路。流式细胞术检测感染鼠眼组织中NK和CD49a^(+)NK细胞百分比显著增加(P<0.01)。结论成功构建了Chinese 1优势基因型获得性弓形虫眼病小鼠模型,感染鼠眼组织中NK细胞及CD49a^(+)NK细胞亚群百分比增加,提示NK细胞及CD49a^(+)NK细胞亚群在眼组织中积累可能参与弓形虫眼病的发生过程。 高南南 王崇 王崇 幸忆恩 谢琳玎 蔡亦红 吴建军关键词:NK细胞 细胞因子