李鹏云
- 作品数：37 被引量：66H指数：4
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- 细胞内钙动员对猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流的调节
- 2007年
- 为研究急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)的基本特性及其调节,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录STOCs的变化.结果发现,STOCs具有明显的电压依赖性,随机地叠加在全细胞大电导钙激活钾通道(large Ca2+-activated-K+channels,BKCa)电流上,BKCa通道的特异性阻断剂卡律蝎毒素(charybdotoxin,ChTX)200nmol/L可完全抑制STOCs的活性.逐步降低细胞外Ca2+浓度可明显抑制STOCs活性直至完全消失,而钙离子载体A23187(10μmol/L)可明显增强STOCs的活性.L型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channels,L-VDCCs)阻断剂维拉帕米(20μmol/L)和氯化镉(200μmol/L)对STOCs的活性却没有明显影响.兰诺定受体(ryanodine receptors,RyRs)的特异性激动剂咖啡因(5mmol/L)能够明显激活STOCs,而其阻断剂兰诺定(ryanodine,50μmol/L)却可以使其不可逆性完全抑制;随后再应用咖啡因(5mmol/L)不能再次激活STOCs.三磷酸肌醇受体(inositol1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)阻断剂2APB(40μmol/L)也可明显抑制STOCs的活性,继而使用咖啡因(5mmol/L)仍可激活STOCs.结果表明:猪冠状动脉平滑肌细胞的STOCs是由BKCa通道介导的,细胞外Ca2+对于STOCs的产生是必需的,而L-VDCCs介导的Ca2+内流不影响STOCs的活性,RyRs是STOCs产生的最终通路,IP3Rs也可能参与了STOCs的调控.
- 李鹏云曾晓荣杨艳蔡芳刘智飞李妙龄裴杰周文
- 关键词：IP3冠状动脉平滑肌细胞
- PKC在UTP调节猪冠状动脉平滑肌细胞BK_(Ca)通道中的作用
- 2013年
- 目的:研究UTP对急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞上BKCa通道的作用,探讨PKC在其过程中的作用机制。方法:应用cell-attached技术记录急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞上BKCa电流。用pCLAMP10.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在cell-attached膜片上,80μMUTP可明显激活BKCa通道(P<0.05,n=21)。PLC抑制剂U73122可抑制UTP对BKCa的激活作用(P<0.05,n=5)。PKC激动剂PMA(10nM),可使BKCa通道开放概率明显降低(P<0.05,n=9)。UTP(80μM)预处理细胞之后,PKC特异性抑制剂Bis-Ⅰ(1μM),可使BKCa通道开放概率进一步增加(P<0.05,n=9)。结论:在cell-attached膜片上,UTP经由PLC信使转导通路激活猪冠脉平滑肌细胞BKCa通道;PKC对此过程具有干预作用。
- 张维维曾晓荣杨艳刘智飞李鹏云唐云安
- 关键词：大电导钙激活钾通道蛋白激酶C猪冠状动脉平滑肌细胞
- 大电导钙激活钾通道在血管舒缩调控中的功能作用及其临床意义研究
- 曾晓荣杨艳周小波李鹏云刘智飞谭晓秋程俊李妙龄黄文俊李涛毛亮兰欢文静陈桂兰周文陈蓎葶周锐曾博魏燕李畅王娜黄鹂裴杰
- 该成果由3个国家自然科学基金、1个卫生部、2个科技厅、4个教育厅、1个卫生厅和1个科技局共12项目产生的成果组成：国家自然科学基金（1994-1996，NO：39370270）：冠状动脉血管平滑肌钙激活钾通道活动的电生理...
- 关键词：
- 关键词：病理生理学疾病防治
- 钩藤碱对猪冠状动脉平滑肌舒缩作用的影响及其机制被引量：3
- 2012年
- 目的观察钩藤碱对离体猪冠状动脉血管的作用,并探讨其作用机制。方法采用血管环张力测定技术及全细胞穿孔膜片钳技术分别观察钩藤碱对离体猪冠状动脉血管环张力的影响以及对大电导钙激活钾通道(BKCa)的作用。结果血管环张力实验显示钩藤碱能够明显舒张[(89.94±1.18)%,n=7]高钾(40mmol/L)去极化所致的冠状动脉血管收缩,而K+通道阻断剂四乙基胺(TEA)不能抑制钩藤碱的舒血管作用,提示K+通道几乎不参与钩藤碱对猪冠状动脉血管的舒张。在全细胞穿孔膜片钳模式下,钩藤碱(100μmol/L)可显著抑制猪冠状动脉平滑肌细胞的BKCa通道[(48.22±4.24)%,n=6],BKCa通道介导的自发性瞬时外向电流(STOCs)的幅度和频率也分别下降了(45.74±6.26)%和(87.98±6.39)%(n=5)。结论钩藤碱可明显舒张猪冠状动脉血管,而对全细胞BKCa通道具有明显的抑制作用,K+通道的激活在钩藤碱的舒血管机制中所起的作用不大。
- 李鹏云杨艳程俊刘智飞裴杰周文曾晓荣
- 关键词：钾通道钙激活血管冠状动脉
- UTP调控猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流的作用机制
- 大电导钙激活钾通道(BK通道)是血管平滑肌舒缩调控机制中的重要靶点。平滑肌细胞肌浆网上三磷酸肌醇受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptors,IPRs)和兰诺定受体(ryanodin...
- 李鹏云
- 文献传递
- 一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法:以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象,采用穿孔全细胞膜片钳技术,记录人肠系膜动脉平滑肌细胞上大电导钙激活钾通道(big-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)宏观电流以及自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到人肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa和STOCs。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究提供实验基础。
- 程俊曾晓荣刘智飞李鹏云李妙龄裴杰杨艳
- 关键词：平滑肌细胞大电导钙激活钾通道
- 雌激素对高血压人体肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用研究被引量：2
- 2011年
- 目的 研究雌激素（E）对非高血压（NH）及原发性高血压（EH）人体肠系膜动脉平滑肌细胞（HMASMC）大电导钙激活钾通道（BKCa channels）及自发性瞬时外向电流（STOCs）的作用,探讨雌激素在NH及EH下对该通道作用的差异性.方法 急性酶分离法分离获取单个HMASMC,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的BKCa和STOCs.结果 雌激素可明显激活NH组HMASMC上的BKCa和STOCs,在测试电压范围内,雌激素使膜电位从0到＋60 mV时BKCa的电流密度均显著性增加,在0和＋60 mV时其电流密度分别从（1.95±0.39）pA/pF、（15.40±4.27）pA/pF增加到（2.81±0.84）pA/pF（P＜0.05,25例）、（26.55±6.24）pA/pF（P＜0.01,25例）,其中0 mV时增加了0.44倍,＋60 mV时增加了0.72倍;电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从（7.920±2.031）pA、（3.15±0.79）Hz增加到（12.92±3.41）pA（P＜0.05,25例）、（4.41±0.96）Hz（P＜0.01,25例）,其中幅度增加了0.63倍,频率增加了0.40倍.而EH组在测试的-60到＋50 mV电压范围,雌激素没有这种显著性激活作用,在0和＋60 mV时其电流密度分别从（1.34±0.43）pA/pF、（4.91±1.40）pA/pF增加到（1.53±0.55）pA/pF（P＞0.05,14例）、（8.04±2.0）pA/pF（P＜0.05,14例）,其中0 mV时增加了0.14倍,＋60 mV时增加了0.63倍;在电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从（5.39±1.93）pA、（0.75±0.37）Hz增加到（6.70±1.06）pA（P＞0.05,14例）、（2.34±0.98）Hz（P＜0.05,14例）,其中幅度增加了0.24倍,频率增加了2.12倍.结论 雌激素对NH组HMASMC上的BKCa和STOCs有明显的激活作用,而在EH组这种激活作用显著降低,由此推测EH组HMASMC对雌激素的反应性较NH组低,这种差异性将为雌激素合理应用于临床提供有力的实验依据.关键词：高血压;雌激素;人体肠系膜动脉;平滑肌细胞;自发性瞬时外向电流;
- 程俊曾晓荣李鹏云李妙龄谭晓秋周文杨艳
- 关键词：高血压雌激素平滑肌细胞大电导钙激活钾通道
- 血管紧张素II对人肠系膜动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的激活效应
- 2013年
- 本文旨在研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)的影响,探讨AngⅡ在分子水平扩张血管的作用机制。采用单通道膜片钳及全细胞穿孔膜片钳技术观察人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa对AngⅡ的反应性;采用RT-PCR技术确定人肠系膜动脉上AngⅡ受体基因的表达情况。在细胞贴附式膜片下(Vm=+40mV),直接加入AngⅡ(100nmol/L),人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的活性无明显变化;经AngⅡ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)特异性阻断剂缬沙坦(10μmol/L)预处理后,再分别加入25、100和250nmol/L的AngⅡ,BKCa的开放概率明显增加,呈现出浓度依赖性。缬沙坦预处理后,当加入100nmol/LAngⅡ时,BKCa的开放概率由0.010±0.003增至0.039±0.015,平均关闭时间由(2729.5±808.6)ms减至(487.7±182.5)ms(n=11,P<0.05),但平均开放时间和电流幅值在给药前后无明显变化。BKCa被AngⅡ(100nmol/L)激活后,再加入AngⅡ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)特异性阻断剂PD123,319,BKCa的活性受到抑制,开放概率由0.016±0.003减至0.004±0.001(n=5,P<0.05),而通道平均开放时间、平均关闭时间和电流幅值在给药前后均无明显变化。另外,将人肠系膜动脉平滑肌细胞经缬沙坦和PD123,319共同处理后再加入AngⅡ(100nmol/L),BKCa的活性无明显变化。在全细胞穿孔膜片钳下,平滑肌细胞经缬沙坦(10μmol/L)预处理后,在测试的电压范围内,AngⅡ(100nmol/L)对膜电位从60mV到+30mV时BKCa电流密度均无明显影响,而在+40、+50和+60mV时,BKCa电流密度分别从(9.03±2.23)pA/pF、(12.88±2.55)pA/pF和(17.26±2.84)pA/pF增加到(12.47±2.22)pA/pF、(18.71±2.51)pA/pF和(27.21±3.12)pA/pF(n=6,P<0.05)。经RT-PCR证实人肠系膜动脉上有AT1R和AT2R这两种AngⅡ受体基因的表达。上述结果提示,AngⅡ对经缬沙坦预处理的人肠系膜动脉平滑肌细胞BK
- 文静程俊李鹏云毛亮岳晓兰李畅杨艳
- 关键词：2型受体大电导钙激活钾通道
- 川芎嗪对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用被引量：2
- 2011年
- 目的:研究川芎嗪((tetramethylpyrazine,TMP))对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道宏观电流(large-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)的作用,探讨TMP对BKCa的作用机制。方法:用急性酶分离法分离人体肠系膜动脉平滑肌细胞,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的大电导钙激活钾通道宏观电流,并测试TMP对该电流的作用。结果:TMP在0.73、3.67mmol/L时可明显地可逆性地激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,在0.73mmol/L浓度时,测试电压从-50～+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在-50mV时,电流密度从0.25±0.03pA/pF增加到0.34±0.039pA/pF(P<0.01,n=12),测试电压在+60mV时,电流密度从8.37±1.75pA/pF增加到14.12±2.66pA/pF(P<0.01,n=12);TMP在3.67mmol/L时可明显地可逆性地激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,测试电压从0～+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在0mV时,电流密度从1.25±0.23pA/pF增加到1.90±0.31pA/pF(P<0.05,n=7),测试电压在+60mV时,电流密度从10.57±3.61pA/pF增加到20.32±4.68pA/pF(P<0.05,n=7)。但TMP在8.07mmol/L时可明显地可逆性地抑制正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,测试电压从-60～+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在-60mV时,电流密度从0.28±0.02pA/pF降低到0.15±0.04pA/pF(P<0.01,n=6),测试电压在+60mV时,电流密度从10.49±0.44pA/pF降低到1.83±0.68pA/pF(P<0.01,n=6)。结论:TMP在0.73、3.67mmol/L下,可激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道,而在8.07mmol/L时可明显地可逆性地抑制正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa。在低浓度和较高浓度下TMP对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa有不同效应的实验结果,为TMP应用于临床提供了实验依据。
- 程俊曾晓荣李鹏云李妙龄谭晓秋周文杨艳
- 关键词：川芎嗪平滑肌细胞大电导钙激活钾通道
- AngⅡ对人肠系膜动脉平滑肌细胞BKca影响及与AT2R相关性的研究
- 目的:血管紧张素Ⅱ是公认的内源性缩血管物质,但近年来却发现,AngⅡ通过其2型受体(ATR),引起大电导钙激活钾通道(BK)的开放,进而舒张肠系膜动脉。因此,探究BK和ATR的变化及相关性,这对高血压的发生和发展具有重要...
- 文静李鹏云程俊毛亮刘智飞曾晓荣杨艳
- 关键词：大电导钙激活钾通道
- 文献传递
