张惠琴
- 作品数：31 被引量：132H指数：7
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放基金更多>>
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- 日本血吸虫感染小鼠CD_4^+ T淋巴细胞协同刺激分子表达谱及其在介导Th1/Th2极化中的作用被引量：6
- 2010年
- 目的观察日本血吸虫感染小鼠不同病期体内及体外培养后脾CD4+T淋巴细胞表面的协同刺激分子表达谱,探讨协同刺激分子介导Th1/Th2极化的作用。方法收集血吸虫感染后4w、7w、12w、16w和20w小鼠及正常小鼠脾CD4+T淋巴细胞,以及上述不同病期经SEA诱导72h后脾淋巴细胞培养上清,用流式细胞术检测细胞表面协同刺激分子CD80、CD86、ICOS、CD40、OX40、4-1BB及PD1表达水平,用ELISA法检测培养上清中的Th1细胞因子IFN-γ,Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、IL-13。结果血吸虫感染后小鼠脾CD4+T淋巴细胞表面CD86、ICOS、CD40和OX40的表达均随感染时间延长而上调,其中ICOS和CD86表达上调最为显著;经SEA诱导培养72h后CD86、ICOS亦显著上调表达;培养上清检测发现IFN-γ在4w时呈高表达,7w开始随感染时间延长呈下调表达;IL-4、IL-5、IL-10和IL-13的表达水平则从7w开始明显升高,IL-5的峰值出现在12w,其余均16w达高峰,致20w仍维持在较高水平。结论日本血吸虫感染小鼠CD4+T淋巴细胞协同刺激分子表达水平与Th1/Th2免疫偏移密切相关,其中ICOS、CD86在介导Th2极化中可能具有重要作用。
- 李颖张惠琴龚唯骆伟杨巧林刘爱平夏超明
- 关键词：日本血吸虫TH1/TH2极化协同刺激分子
- 弓形虫P30乳酸球菌口服免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2及NO含量的测定被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫P30乳酸球菌(L.lactis/P30)口服免疫鼠血清中细胞因子IFN-γI、L-2及NO的变化情况。方法L.lactis/P30口服免疫BALB/c小鼠,以gp42乳酸球菌组和生理盐水组为对照,在第3周、第9周及第12周分别收集各实验组小鼠血清,ELISA法测定血清IFN-γI、L-2含量;酶法测定NO浓度。结果L.lactis/P30口服免疫鼠血清中IFN-γI、L-2含量均显著高于两对照组,血清中NO含量随着免疫时间延长与两对照组差异逐渐明显。结论L.lactis/P30口服免疫能有效刺激小鼠细胞因子IFN-γ和IL-2的产生及NO分子的释放。
- 李文姝陆惠民张惠琴黄伟达
- 关键词：弓形虫口服免疫NO
- 日本血吸虫感染小鼠血清中虫体核酸来源的实验研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨日本血吸虫感染小鼠血清中核酸的来源,为血吸虫病核酸诊断方法的早期诊断及疗效考核提供理论依据。方法用PCR法检测单、双性感染小鼠1w^12w血清中的特异的日本血吸虫DNA片断。结果在单性感染小鼠1w^4w的血清可通过PCR扩增到特异性DNA片段,感染小鼠5w后的血清中则未能测出阳性结果;在双性感染小鼠组中,应用PCR从1w^12w的血清中均可扩增到特异的阳性条带。结论在日本血吸虫感染早期,小鼠血清中的核酸可能主要来自在体内移行的日本血吸虫童虫及虫体在发育过程中的代谢产物;在感染的急性期和慢性期,血清中的核酸则可能主要来自小鼠体内崩解死亡的虫卵组织。
- 许静张惠琴骆伟龚唯时长军荣荣夏超明
- 关键词：日本血吸虫核酸PCR
- 弓形虫SAG1可溶性融合蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化被引量：1
- 2005年
- 目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫SAG1抗原,为研制新型弓形虫病基因工程诊断试剂盒奠定基础。方法将重组pGEX-SAG1表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳分析表达产物的表达形式。通过降低培养温度和升高LB培养基的pH,诱导融合蛋白在上清中表达,表达产物以硫酸铵沉淀、GST亲和层析和Sephadex G-150凝胶过滤层析进行纯化。Western blot检测纯化融合蛋白的免疫反应性。结果37℃条件下,SAG1以融合蛋白(SAG1-GST)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在。在27℃和升高LB培养基pH条件下,融合蛋白在上清中得到表达,经纯化后其SAG1可溶性蛋白纯度可达90%以上。Western blot分析纯化蛋白能被弓形虫感染者血清所识别。结论SAG1可溶性蛋白在大肠埃希菌中得到了表达,经纯化后能被弓形虫感染者血清所识别,可用于制备弓形虫感染诊断试剂盒。
- 朱翔龚唯张惠琴陆惠民黃伟达
- 关键词：弓形虫SAG1融合蛋白蛋白纯化
- 美罗昔康镇痛、消炎、退热作用的实验研究
- ＜正＞ 美罗昔康（meloxicam）是新合成的非固醇类抗炎药（NSAID）。它能选择性地抑制诱导型环氧化酶-2（COX-2）,阻断前列腺素的合成。本实验观察美罗昔康的镇痛、消炎和退热作用。实验动物用Wistar大鼠。用...
- 龚珊张惠琴俞光第顾振纶
- 文献传递
- 日本血吸虫感染共刺激分子ICOS转基因小鼠免疫病理及分子机制
- 可诱导共刺激分子ICOS是新发现的表达于活化T细胞的共刺激分子,对Th2细胞免疫应答极为重要。本实验应用国内外首次成功建立的ICOS转基因小鼠作为血吸虫病变动物模型,深入阐明ICOS 共刺激通路在血吸虫病免疫病理中的作用...
- 夏超明骆伟龚唯张惠琴
- 关键词：日本血吸虫虫卵肉芽肿ICOS转基因小鼠
- 文献传递
- 泥鳅粉对小鼠耐缺氧作用的研究被引量：7
- 2006年
- 目的研究泥鳅粉对小鼠耐缺氧作用的影响。方法连续灌胃小鼠不同剂量的泥鳅粉15d,末次给药后1h, 进行密闭缺氧实验、急性脑缺血性缺氧实验和亚硝酸钠中毒缺氧实验,以存活时间、血红蛋白含量和红细胞数作为指标, 观察泥鳅粉对小鼠耐缺氧作用的影响。结果泥鳅粉可延长小鼠在不同缺氧条件下的存活时间,也可提高小鼠血红蛋白的含量和红细胞数量。结论泥鳅粉具有提高小鼠耐缺氧能力的作用。
- 李金华张玉英张惠琴龚珊
- 关键词：耐缺氧小鼠
- IFN-γ对豚鼠嗜肺军团菌肺炎病理改变的影响
- 2007年
- 目的观察IFN-γ对豚鼠1型嗜肺军团菌肺炎病理改变的影响。方法将80只豚鼠制成1型嗜肺军团菌感染模型,随机分成感染后对照组和感染后治疗组,治疗组肌注IFN-γ。观察两组豚鼠感染后的症状和肺部病理改变。结果在感染症状上,治疗组明显较对照组轻。在病理上,对照组有广泛的肺实变,伴大量炎症细胞浸润,病变周围肺泡腔内可见浆液性渗出及出血,脓肿形成;而治疗组仅见散在的肺实变病灶,伴少量炎症细胞浸润。结论外源性IFN-γ能显著增强豚鼠抗1型嗜肺军团菌感染的能力。
- 张兴虎诸葛洪祥邓敏周霞张惠琴许菊陈明中
- 关键词：嗜肺军团菌肺炎IFN-Γ病理改变
- 聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA的实验研究被引量：26
- 2007年
- 目的探索核酸检测在日本血吸虫病诊断中的应用。方法根据日本血吸虫基因设计特异性引物,采用PCR方法对日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便、外周血清标本中的DNA进行扩增,并将虫卵和粪便的模板DNA倍比稀释后进行扩增,以测定PCR扩增法的敏感性。结果从日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便和外周血清中均扩增到分子量为230bp的阳性条带,扩增产物经测序并在基因库中匹配,证实为日本血吸虫基因中的一个片段,其同源性为98%。其PCR扩增敏感性检测结果表明,0.021个虫卵DNA模板即可扩增出该特异性阳性条带。结论聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA有较高的敏感性,尤其是能从日本血吸虫感染宿主血清中检测出特异性DNA,具有潜在的诊断应用价值。
- 陆正贤许静龚唯骆伟张惠琴荣荣时长军夏超明
- 关键词：日本血吸虫聚合酶链反应DNA
- ICOSL敲基因小鼠日本血吸虫病模型的免疫应答及其免疫病理(英文)被引量：6
- 2012年
- 目的观察ICOSL敲基因(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠感染日本血吸虫后的免疫应答及其免疫病理反应。方法建立ICOSL-KO小鼠及野生型C57BL/6J小鼠日本血吸虫病模型,收集感染前(0周)和感染后(4～20周)的小鼠脾淋巴细胞用SEA进行诱导培养72小时后,采用ELISA双抗夹心法检测培养上清中Th1(IFN-γ、IL-12)及Th2(IL-4、IL-10、IL-13)细胞因子表达水平。应用ELISA法检测同期血清中SEA特异性抗体IgG、及其亚类IgG1、IgG2a的表达水平。应用HE染色法观察小鼠肝脏虫卵肉芽肿病变。结果ICOSL-KO小鼠Th1细胞因子IFN-γ、IL-12表达明显高于野生型小鼠,而其Th2型细胞因子(IL-4、IL-10、IL-13)表达水平却显著低于野生型小鼠。ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性抗体IgG及其亚类IgG1、IgG2a的水平显著低于野生型C57BL/6J小鼠的水平,其Th2分化指数与IgG1/IgG2a的比值亦低于野生型小鼠的水平,特别是在感染7、12、16周后具有显著性差异。且ICOSL-KO小鼠的肝脏虫卵肉芽肿病变显著小于野生型小鼠。结论感染日本血吸虫的ICOSL-KO小鼠Th2免疫应答显著下调并导致肝虫卵肉芽肿病变减弱,表明ICOS–ICOSL信号通路在血吸虫病免疫病理中具有重要作用。
- 王瑜王波梁松龚唯张惠琴夏超明
- 关键词：日本血吸虫TH1/TH2
