龚唯
- 作品数:49 被引量:170H指数:8
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 一种气体净化器
- <b>本发明公开了</b><b>一种气体净化器,其中通过设置中空状的筒体,并在筒体的内腔中设置具有呈袋状的阳离子网和外滤网的袋式过滤网,阳离子网收容在外滤网中且两者的开口边缘相固定,筒...
- 葛清鹏龚宪军苏进秀蒋亮龚唯诸葛洪祥朱远见
- 文献传递
- 弓形虫SAG1可溶性融合蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化被引量:1
- 2005年
- 目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫SAG1抗原,为研制新型弓形虫病基因工程诊断试剂盒奠定基础。方法将重组pGEX-SAG1表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳分析表达产物的表达形式。通过降低培养温度和升高LB培养基的pH,诱导融合蛋白在上清中表达,表达产物以硫酸铵沉淀、GST亲和层析和Sephadex G-150凝胶过滤层析进行纯化。Western blot检测纯化融合蛋白的免疫反应性。结果37℃条件下,SAG1以融合蛋白(SAG1-GST)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在。在27℃和升高LB培养基pH条件下,融合蛋白在上清中得到表达,经纯化后其SAG1可溶性蛋白纯度可达90%以上。Western blot分析纯化蛋白能被弓形虫感染者血清所识别。结论SAG1可溶性蛋白在大肠埃希菌中得到了表达,经纯化后能被弓形虫感染者血清所识别,可用于制备弓形虫感染诊断试剂盒。
- 朱翔龚唯张惠琴陆惠民黃伟达
- 关键词:弓形虫SAG1融合蛋白蛋白纯化
- 光诱导金丝桃素体外抗日本血吸虫雄虫作用的观察被引量:2
- 2014年
- 目的 观察光诱导后的金丝桃素对日本血吸虫雄虫的体外杀伤作用。 方法 80只昆明小鼠经腹部皮肤感染由单只阳性钉螺逸出的日本血吸虫尾蚴60~80条,6周后剖检,收集雄虫置入含有3 ml DMEM培养液的平皿内(10条/皿)。每批次实验均分为:金丝桃素提取物或金丝桃素纯品(以下简称金丝桃素)不同浓度(0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 μmol/L)光照组以及不同浓度非光照组,二甲基亚砜(DMSO)对照组和空白对照组。各实验均重复2~5次。将金丝桃素提取物或金丝桃素纯品及DMSO液分别加入含有血吸虫的培养皿中,恒温避光共孵育6 h,再分别照射30、60、90和120 min后,37 ℃避光培养过夜(16 h)。次晨,洗涤、更换无药物新鲜培养液,继续避光培养48 h,观察光诱导后的金丝桃素对血吸虫的杀伤作用。选取1.0、2.5和5.0 μmol/L 金丝桃素光照60 min组虫体在解剖镜下观察并摄像;2.0 μmol/L金丝桃素光照60 min组虫体进行扫描电镜观察。 结果 各浓度金丝桃素纯品光照组的虫体均有不同程度的死亡,0.1 μmol/L金丝桃素纯品光照30 min组,虫体死亡率为20%;2 μmol/L金丝桃素纯品光照90 min组和2.5 μmol/L金丝桃素纯品光照60 min组,虫体均100%死亡。相应的金丝桃素纯品各浓度无光照组、DMSO对照组和空白对照组,虫体均100%存活。解剖镜下观察,1.0、2.5和5.0 μmol/L金丝桃素纯品光照60 min组虫体均出现显著的痉挛性麻痹现象,表现为不同程度的缩短卷曲、体态僵硬和活动终止等改变;扫描电镜观察,2.0 μmol/L 金丝桃素纯品光照60 min组虫体皮层出现肿胀、空泡形成、破裂、糜烂、剥落和感觉乳突丢失等损害,甚至皮层正常结构完全消失。金丝桃素纯品各浓度光照组的虫体死亡率和形态结构的损伤改变与金丝桃素浓度和光照时间有关。 结论 金丝桃素经光诱导后,具
- 蔡茹佘新平王瑜龚唯张惠琴夏超明
- 关键词:金丝桃素日本血吸虫
- 细胞信号转导抑制剂对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控被引量:6
- 2002年
- 目的 观察酪氨酸蛋白激酶 (TPK)、蛋白激酶 C(PKC)和磷酯酰肌醇 - 3-激酶 (PI- 3K)特异性抑制剂(Tyrphostin- 2 5、D- sphingosine和 Wortmannin)分别特异性抑制 TPK、PKC和 PI- 3K后 ,对小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞经虫卵可溶性抗原 (SEA)诱生 IFN- γ和 IL- 4的表达水平及对 Th1/Th2免疫偏移的影响。 方法 分别于小鼠感染日本血吸虫后 0、4、8和 12周 ,用单克隆抗体分离脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养 ,并进行细胞信号转导抑制试验 ,用 EL ISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养上清 IFN-γ、IL - 4和一氧化氮 (NO)表达水平。 结果 Tyrphostin- 2 5对 IFN-γ和 IL - 4水平的抑制作用均非常显著 (P<0 .0 1) ,D- sphingosine主要影响 IL - 4的表达 (P<0 .0 1) ,而 Wortmannin则主要影响 IFN-γ的表达 (P<0 .0 1) ,对反映 Th1/Th2免疫平衡的 Th2分化指数分析表明 ,D-sphingosine可使 Th2免疫应答优势减弱 ,而 Wortmannin则可使 Th2免疫应答优势增强。对脾 CD4 + T淋巴细胞培养上清 NO水平检测结果显示 ,NO水平动态与 IFN-γ相一致 ,NO水平主要受 TPK抑制剂 Tyrphostin- 2 5和 PI- 3K抑制剂Wortmaninn的影响 ,结合该两种信号分子抑制剂对 Th1/Th2细胞因子表达水平的作用结果分析 ,
- 夏超明骆伟龚唯周卫芳李允鹤查锡良熊思东
- 关键词:日本血吸虫TH1/TH2细胞因子免疫偏移信号转导动物实验
- 聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA的实验研究被引量:26
- 2007年
- 目的探索核酸检测在日本血吸虫病诊断中的应用。方法根据日本血吸虫基因设计特异性引物,采用PCR方法对日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便、外周血清标本中的DNA进行扩增,并将虫卵和粪便的模板DNA倍比稀释后进行扩增,以测定PCR扩增法的敏感性。结果从日本血吸虫的成虫、虫卵、日本血吸虫感染家兔的肝组织、粪便和外周血清中均扩增到分子量为230bp的阳性条带,扩增产物经测序并在基因库中匹配,证实为日本血吸虫基因中的一个片段,其同源性为98%。其PCR扩增敏感性检测结果表明,0.021个虫卵DNA模板即可扩增出该特异性阳性条带。结论聚合酶链反应检测日本血吸虫DNA有较高的敏感性,尤其是能从日本血吸虫感染宿主血清中检测出特异性DNA,具有潜在的诊断应用价值。
- 陆正贤许静龚唯骆伟张惠琴荣荣时长军夏超明
- 关键词:日本血吸虫聚合酶链反应DNA
- 紫外线致弱日本血吸虫尾蚴诱导BALB/c小鼠免疫保护作用研究被引量:4
- 2009年
- 目的观察紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠免疫保护作用。方法辐照致弱日本血吸虫尾蚴,经腹部皮肤用UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫诱导BALB/c小鼠,3周后进行攻击感染,同时设正常感染对照组。攻击感染6周后解剖小鼠,计算减虫率、减卵率,并观察虫体发育情况和肝组织细胞免疫应答情况。结果免疫组的减虫率和减卵率分别为37.90%和51.16%;免疫组小鼠体内虫体发育明显滞后于正常感染对照组内虫体;免疫组小鼠肝脏虫卵肉芽肿较正常组明显减少。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠能诱导较好的免疫保护力。
- 周霞诸葛洪祥龚唯骆伟魏莉杜海林陈明中
- 关键词:日本血吸虫BALB/C小鼠免疫病理反应
- 青蒿琥酯对日本血吸虫生殖作用的影响被引量:3
- 2009年
- 目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫成虫生殖的影响。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第20d灌服青蒿琥酯300mg/kg,给药后3周解剖小鼠,用灌注法收集成虫,计算减虫率;取肝右叶做石蜡切片,观察虫卵肉芽肿;剩余肝脏溶解后计数虫卵;收集无损虫体进行体外培养,观察虫卵形态,并计数产卵量;取完好的虫体做石蜡切片,HE染色后镜下观察生殖器官的发育。结果给药组小鼠体内雌虫产卵量与对照组存在显著的差异,体外培养结果与体内产卵结果相一致。给药组小鼠体内的雌虫的卵巢发育缓慢,比对照组的小,且卵巢内多为未成熟的卵细胞。结论青蒿琥酯能抑制雌虫卵巢的发育,降低或抑制雌虫的产卵量,具有抗日本血吸虫雌虫生殖的作用,能有效的减轻血吸虫病的病情和控制传播。
- 杜海林诸葛洪祥魏莉龚唯王廷安
- 关键词:青蒿琥酯日本血吸虫虫卵生殖系统
- 免疫调节剂SCA诱导的抗血吸虫性肝病变及其机制的研究
- 2003年
- 目的 探讨感染日本血吸虫的BALB/c小鼠诱导的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变效应及其分子机制。方法 取鼠肝连续切片 ,HE染色 ,光镜下测量肉芽肿大小 (平均面积和体积 ) ;用流式细胞仪测定鼠脾T淋巴细胞亚群CD4 + 和CD8+ 百分数及二者的比值 ;用ELISA检测小鼠血清特异性抗体IgG及其亚类IgG1和IgG3 水平。结果 服用SCA(SCA - 1,SCA - 2 )实验小鼠肝内肉芽肿病变均非常显著地小于感染对照组 (均P <0 .0 1) ;实验鼠肝内虫卵肉芽肿的平均面积和体积 ,与对照组比较 ,减小率达 4 0 .71%~ 5 3.0 8% ;实验组CD4 + /CD8+ 值 (2 .72~ 3.6 7) ,显著地高于对照组 (1.89) (均P <0 .0 5 ) ;用药组的特异性抗体IgG及其亚类IgG1和IgG3 水平 ,均显者地高于对照组 (均P <0 .0 1或 0 .0 5 )。结论 中药合剂SCA是一种新型、高效无毒的免疫调节剂 。
- 骆伟龚唯庞智李允鹤周洪福胡永德
- 关键词:日本血吸虫虫卵肉芽肿免疫调节剂细胞免疫体液免疫
- 协同刺激分子B7-1/2对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响
- <正> 本实验观察了经抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后对日本本血吸虫感染小鼠不同时期脾淋巴细胞诱生的Th1/Th2细胞因子表达水平的影响,探讨干预B7:CD28协同刺激信号对Th1/Th2免疫偏移的调控作用。
- 夏超明田芳骆伟龚唯周卫芳
- 文献传递
- 多用采血箱
- <b>本发明公开了</b><b>一种多用采血箱,包括箱体、安装在所述箱体顶部可打开或关闭的箱盖,箱体的底部设有用于放置化验单的第一抽屉,箱体上位于第一抽屉上方设有用于收集采血试管的试管...
- 曹蕴宋成朱莹毛月芹龚唯诸葛洪祥朱远见
- 文献传递