刘海鸥 作品数:40 被引量:109 H指数:7 供职机构: 南通大学 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
肝星状细胞SSeCKS的表达及其在肝纤维化中的作用 被引量:9 2008年 目的了解src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)在肝星状细胞(HSC)活化中的变化和作用。方法(1)分离正常大鼠的HSC,以实时定量PCR检测其在体外培养过程中SSeCKS mRNA的表达变化,以蛋白质印迹法和细胞免疫荧光法检测HSC中SSeCKS蛋白的表达变化。(2)制作肝纤维化的大鼠模型,以免疫荧光法检测肝组织内SSeCKS和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化及定位。结果初分离的HSC表达低水平的SSeCKS mRNA,经培养活化后SSeCKS的表达增强。在纤维化肝组织中,SSeCKS阳性细胞增多,阳性细胞多分布于肝窦周围,与α-SMA阳性细胞的分布一致。结论在体外活化过程中HSC中SSeCKS表达增强。SSeCKS可能参与HSC在肝脏炎症和纤维化中的作用。 蒋文 宋磊 邵建国 王陆军 陆建荣 刘海鸥关键词:肝纤维化 肝星状细胞 p27^(kipl)和Ki-67蛋白在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义 被引量:9 2004年 目的 探讨 p2 7kipl和 Ki- 6 7蛋白在非霍奇金淋巴瘤 (non- Hodgkin's lymphoma,NHL)中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化方法检测 10 0例 NHL 及 2 0例反应性增生淋巴结中 p2 7kipl和 Ki- 6 7蛋白的表达情况 ,结合临床及病理资料进行统计分析。结果 p2 7kipl蛋白在反应性增生淋巴结 (不包括生发中心 )中的阳性率明显高于 NHL,随着肿瘤侵袭性的增加 ,p2 7kipl表达水平下降。 Ki- 6 7蛋白在反应性增生的淋巴结 (不包括生发中心 )中的阳性率明显低于 NHL,其表达水平随着肿瘤的侵袭性增加而上升。NHL 中 p2 7kipl蛋白的阳性率与 Ki- 6 7表达水平呈负相关。结论 p2 7kipl与 NHL 的发生发展有关 ,联合检测 p2 7kipl及 Ki- 6 7蛋白水平可为 NHL 程纯 张冬梅 沈爱国 何松 邵晓轶 刘海鸥关键词:非霍奇金 P27^KIPL KI-67 细胞周期蛋白类 β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制 被引量:2 2007年 目的:探讨β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制。方法:将不同浓度的β-1,4-GalT-I表达质粒转染雪旺氏细胞,采用Westernblot方法检测增殖相关信号分子cyclinD1、p16INK4以及p27Kip1的表达水平,North-ernblot方法检测p19ARF的表达变化。结果:随着β-1,4-GalT-I在雪旺氏细胞中的表达增加,cyclinD1表达降低,而p16INK4a和p19ARF呈现相反的变化;p27Kip1变化不明显。结论:β-1,4-GalT-I影响雪旺氏细胞增殖可能与cyclinD1、p16INK4a和p19ARF介导的信号传导途径有关。 肖锋 季玉红 沈爱国 严美娟 刘海鸥 孙琳琳关键词:雪旺氏细胞 增殖 地塞米松对cAMP诱导胶质瘤细胞分化的影响 2009年 目的:探讨地塞米松对环腺苷酸(cAMP)诱导C6胶质瘤细胞分化的影响。方法:应用地塞米松和RU486单独或共同与cAMP作用于C6胶质瘤细胞,通过Western blotting检测胶质细胞分化标志蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达变化,光镜观察细胞形态学变化;通过Western blotting和细胞免疫荧光观察CREB磷酸化水平。结果:地塞米松与cAMP共作用于C6胶质瘤细胞48h,抑制GFAP表达和细胞形态改变;糖皮质受体抑制剂RU486逆转地塞米松的作用;地塞米松抑制cAMP诱导的CREB磷酸化。结论:地塞米松通过抑制CREB磷酸化逆转cAMP诱导的胶质细胞分化。 黄晓冬 刘海鸥关键词:胶质瘤 地塞米松 环腺苷酸 细胞分化 92例非霍奇金淋巴瘤组织中Skp2和p27^kip1蛋白的表达及相互关系 被引量:7 2007年 目的探讨92例非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织中Skp2和p27^kip1蛋白的表达及相互关系。方法采用免疫组织化学方法检测92例NHL和14例反应性增生淋巴结组织中Skp2、p27^kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;采用Western blot技术检测4种淋巴瘤细胞株内Skp2和p27^kip1蛋白的表达情况。结果Skp2蛋白在NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),且与增殖活性(Ki-67 LI)呈正相关,并随着肿瘤侵袭性增加而表达增高;p27^kip1蛋白在NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),且与增殖活性呈负相关,并随着肿瘤侵袭性增加而表达减低;Skp2和p27^kip1蛋白在NHL组织中的表达无明显相关性。结论在NHL组织中,Skp2的高表达和p27^kip1的低表达均可能与NHL的发生发展有关。 陆建新 张冬梅 沈爱国 王燏婵 何松 邵晓轶 刘海鸥 程纯关键词:SKP2蛋白 P27^KIP1蛋白 细菌脂多糖对培养星形胶质细胞中Src抑制的蛋白激酶C底物表达的影响 2007年 目的研究细菌脂多糖(LPS)对培养的大鼠星形胶质细胞中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)表达的影响。方法培养的星形胶质细胞随机分为空白对照组、LPS单一刺激组、LPS联合PKC抑制剂(RO-31-8220)刺激组。运用荧光定量PCR(Real time RT-PCR)、免疫印迹和免疫细胞化学法分析SSeCKS的表达变化和亚细胞定位。结果Real time RT-PCR显示,LPS可以上调SSeCKS mRNA水平,在作用浓度为100μg/L和1 mg/L时与对照组有显著差异(P<0.01)。Western blotting表明,当LPS作用浓度为100μg/L时,SSeCKS蛋白表达量明显上调;在此浓度作用下,SSeCKS表达于6 h达高峰并广泛磷酸化,至24 h其蛋白表达仍维持于较高水平。免疫细胞化学分析显示,正常情况下,SSeCKS散在分布于胞质,于胞膜略有浓集。在LPS单一刺激组,SSeCKS富集于核周;当LPS联合RO-31-8220共同作用时,SSeCKS的亚细胞定位与正常组无明显差异。结论在体外培养的星形胶质细胞中,LPS可诱导SSeCKS表达,上调其磷酸化水平,影响其细胞内定位。这些改变与PKC的功能相关。提示SSeCKS可能参与星形胶质细胞中炎症信号的转导。 沈爱国 孙琳琳 程纯 刘海鸥 肖锋 沈聪聪关键词:星形胶质细胞 蛋白激酶C 免疫印迹 免疫组织化学 大鼠脑损伤后SSeCKS的表达变化 被引量:1 2007年 目的:探讨大鼠脑损伤后,SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C的底物)在脑组织中的表达变化及其意义。方法:制备成年SD(Sprague-Dawley)大鼠脑损伤模型。通过Western blot和RT-PCR方法检测脑损伤后SSeCKS表达的时相变化,免疫组织化学方法检测SSeCKS在脑组织中的细胞定位。结果:Western blot显示,大鼠脑损伤后,SSeCKS的表达逐步降低,伤后3d降至最低点,之后逐渐上升,7d达到高峰,14d后趋于平稳;RT-PCR的结果与Western blot一致。免疫荧光双标记结果显示SSeCKS与星形胶质细胞的标记物GFAP、神经元的标记物NeuN共定位。结论:大鼠脑损伤可以改变SSeCKS的表达,这种改变可能参与脑损伤后星型胶质细胞的活化和增殖过程,并与神经元的凋亡、轴突再生有关。 沈爱国 肖锋 季玉红 刘海鸥 孙琳琳 秦婧 杨君伶关键词:脑损伤 SSECKS Cyclin E与Rb在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达 被引量:1 2005年 研究表明,Rb蛋白的异常表达与某些肿瘤的发生有关[1].Cyclin E通过改变Rb蛋白的磷酸化状态来调节Rb的生物学活性,其异常表达与多种肿瘤的侵袭性及预后相关[2,3].本研究分析了62例B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中cyclin E与Rb蛋白的表达,探讨了cyclin E和Rb与B-NHL发病的关系. 程纯 张冬梅 沈爱国 何松 严美娟 邵晓轶 刘海鸥关键词:B细胞性非霍奇金淋巴瘤 CYCLIN CYCLIN RB蛋白 预后相关 多种肿瘤 内毒素致伤小鼠肺组织SSeCKS表达变化的研究 被引量:7 2006年 目的观察内毒素脂多糖(LPS)致伤小鼠肺组织中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表达变化和细胞定位。方法腹腔注射LPS制备小鼠内毒素肺损伤模型,依据注射时相和剂量不同随机分组。用RealtimePCR法和Westernblot法检测各组肺组织SSeCKS的mRNA和蛋白质水平表达情况,间接免疫荧光双标法检测SSeCKS在肺组织中的细胞定位。结果SSeCKS表达水平与LPS用量呈现剂量和时间依赖关系:1、5、10和15mgkg组SSeCKSmRNA水平皆显著高于对照组(P<0.05),且随注射剂量增高SSeCKSmRNA表达量亦逐渐增高;不同时相LPS(5mgkg)注射后肺组织中SSeCKSmRNA水平表达呈动态变化过程,1h开始增高,3h达到表达高峰,12h降至正常水平;SSeCKS蛋白水平表达变化与mRNA水平变化相一致。SSeCKS在肺组织中定位于肺泡间隔毛细血管内皮细胞。结论SSeCKS是炎症反应蛋白,其表达量与炎症的严重程度相关。内毒素可诱导肺泡间隔毛细血管内皮细胞SSeCKS表达上调。 沈爱国 刘海鸥 陈梦玲 高永静 程纯关键词:LPS SSECKS 血管内皮细胞 系统性红斑狼疮患者骨髓间质干细胞超微结构及细胞骨架的特征 被引量:12 2008年 目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间质干细胞(MSCs)的超微结构及细胞骨架的形态学特征。方法 体外培养SLE患者的MSCs后,透射电子显微镜(TEM)、激光共聚焦显微镜(LCM)观察超微结构及肌动蛋白、纽蛋白的表达。结果 SLEMSCs透射电子显微镜下多数细胞内呈衰老征象,可见大量自噬体;细胞边缘应力纤维增多,排列紊乱,组成粗大的强荧光团,核周围应力纤维减少;纽蛋白在细胞边缘排列紊乱,细胞核周围增多。结论 SLEMSCs超微结构及细胞骨架的改变是细胞扩增不良的原因之一。 顾志峰 赵盛楠 张华勇 徐婷 金鸥阳 周康兴 刘海鸥 张天一 孙凌云关键词:红斑狼疮 骨髓间质干细胞 超微结构 肌动蛋白 纽蛋白