冉波
- 作品数:3 被引量:23H指数:2
- 供职机构:吉林大学白求恩医学院更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法被引量:5
- 2007年
- 目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白(VP1epi)作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。
- 胡大利冯宇张培因冉波卫红飞邵明玉王爱丽王丽颖于永利
- 关键词:口蹄疫病毒间接ELISA
- O型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白疫苗的构建、表达和纯化被引量:18
- 2006年
- 目的为了克服灭活口蹄疫病毒疫苗可能存在的传播病毒的潜在危险,构建一种能预防O型口蹄疫病毒感染的VP1表位重组蛋白疫苗。方法采用O型口蹄疫病毒(FMDV)表面VP1蛋白上的B细胞表位肽和T细胞表位肽,以PCR扩增和克隆连接等方法构建VP1表位六聚体重组蛋白(VP1epi)基因,并在大肠杆菌中进行诱导表达,镍亲和层析纯化。用ELISA法检测VP1epi免疫豚鼠血清中抗FMDV抗体的水平。结果构建了一种由FMDV表面VP1中B细胞表位肽重复六次的蛋白质多肽,采用pET28原核表达系统,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达产量约占菌体蛋白的30%左右,经镍亲和层析后获得纯度高于90%的VP1表位重组蛋白。VP1epi免疫的豚鼠血清中含有一定量的抗FMDV抗体。结论VP1epi重组蛋白能诱导机体产生抗O型FMDV的抗体,说明这种重组蛋白可能成为预防O型FMDV感染的基因工程蛋白质疫苗。
- 冉波邵明玉张培因冯宇卫红飞王莉王燕媚胡大利王丽颖于永利
- 关键词:基因工程疫苗FMDV
- O型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白疫苗的功能研究
- 口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是一种高度传染性的动物疾病,主要发生于牛、羊、猪等偶蹄类畜牧动物。 口蹄疫的病原体是口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus...
- 冉波
- 关键词:口蹄疫病毒基因工程疫苗重组蛋白
- 文献传递