于永利
- 作品数：138 被引量：286H指数：8
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 肺纤维化病人支气管肺泡洗出液细胞的基因表达及酸性纤维母细胞生长因子的发现
- 于永利
- 抗BCG Hsp65单克隆抗体的鉴定及应用研究
- 2008年
- 目的:对制备的5株抗BCG Hsp65单克隆抗体(Hsp65 mAb)做进一步鉴定和应用。方法:采用ELISA方法对mAb的效价、亚类和结合抗原表位特性进行鉴定,应用mAb对Hsp65融合蛋白进行了Western blot和免疫荧光检测。结果:5株mAb的类型均为IgG,其中ⅠC1和ⅡC3株mAb为IgG1亚类,ⅠA5、ⅠC3和ⅠD6株mAb为IgG2a亚类。抗原表位竞争结合分析显示,在配对的不同亚类mAb中,存在着结合Hsp65表面不同抗原表位的mAb。通过Western blot检测证实,Hsp65 mAb对Hsp65-MUC1检测结果,与MUC1 mAb的一致。细胞免疫荧光检测显示,制备的mAb能够识别通过蛋白装载进入树突状细胞内的Hsp65-PSA。结论:获得的Hsp65 mAb可做为检测工具,用于研究BCG Hsp65及其融合蛋白的功能和表达。
- 尹晓光吴秀丽万敏张培因王艳媚王丽颖于永利
- 关键词：BCG热休克蛋白单克隆抗体
- 利用小鼠脾细胞上清抗病毒活性建立新型抑制性ODN的体外筛选方法
- 2009年
- 目的：通过检测小鼠脾细胞上清抗病毒活性,建立一种体外筛选小鼠敏感的新型抑制性寡聚脱氧核苷酸（ODN）的方法,为后续小鼠体内实验提供抑制性ODN的体外筛选方法。方法：将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组,收集不同浓度（0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00、16.00及32.00 mg.L-1）的CpG 2216刺激上清及CpG 2216作用小鼠脾细胞不同时间（3、6、12、24、48、72及96 h）的刺激上清,通过VSV病毒保护实验检测的A578评价各组上清的抗病毒活性,确定CpG 2216的最佳作用浓度、作用时间及刺激上清稀释度;再将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（A151）组,同上确定A151的最佳作用浓度;将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（MAT0106）组,应用上述优化的实验条件如各ODN剂量、作用时间等处理细胞后,收集刺激上清,采用VSV病毒保护实验,观察各抑制性ODN的抑制作用,以初步判定此方法的可行性。结果：筛选方法确定为：浓度为5×10^6·mL^-1的小鼠脾细胞铺于96孔圆底细胞培养板,加入CpG 2216至终浓度2 mg·L^-1和/或抑制性ODN至终浓度16 mg·L^-1,孵箱中培养24 h后收集上清,1∶4稀释上清后加入已贴壁的L929细胞板内,共孵育18 h后弃上清,加入VSV病毒液继续培养48 h。弃净上清后结晶紫染色、脱色并检测A578。此种筛选方法可以区别本室自行设计的抑制性ODN之间的抑制活性。结论：成功建立了抑制性ODN抑制小鼠脾细胞抗病毒活性的筛选方法,抑制性ODN的小鼠体外筛选方法的建立,为后续抑制性ODN在小鼠体内的生物学活性观察提供了体外筛选平台。
- 杨光孙然孙陆果万敏王莉吴秀丽胡大利王丽颖于永利
- 关键词：CPGODN小鼠近交BALBC脾细胞抗病毒活性
- 梅花鹿免疫细胞活性因子生长因子样活性研究
- 梅花鹿是我国宝贵的珍稀动物资源。鹿脾免疫细胞的药用价值和免疫学功效一直被忽视。为进一步开发鹿药用资源,本室研究了梅花鹿脾细胞免疫细胞活性因子(SIAF)的生长因子等生物学活性,为深入研究梅花鹿组织细胞的药用价值奠定基础。
- 常雅萍孙蕾张晓姝于永利
- 文献传递
- HSP65-MUC1/HSP65抗体免疫复合物对人树突状细胞的活化作用被引量：6
- 2005年
- 目的 :探讨免疫复合物能否诱导树突状细胞的活化与成熟。方法 :用免疫复合物刺激来自人外周血经细胞因子 IL - 4和 GM- CSF诱导的未成熟的树突状细胞 ,观察免疫复合物对未成熟树突状细胞的活化与成熟的影响。结果 :HSP6 5 - MUC1/ HSP6 5免疫复合物与 HSP6 5 - MU C1抗原或 HSP6 5抗体相比较 ,能够显著地活化树突状细胞 ,使其表面的协同刺激分子 CD86的表达显著上调 ,为激活细胞毒性 T淋巴细胞提供第二信号 ,这一结果说明免疫复合物具有交叉递呈的作用 ;同时 ,加入免疫复合物的树突状细胞培养上清中 IL - 6和 TNFα分泌量明显增加。结论 :免疫复合物能够诱导树突状细胞的活化与成熟 ,免疫复合物具有交叉递呈的作用。
- 任淑萍包木胜高新于永利王丽颖
- 关键词：抗原呈递抗原抗体复合物交叉递呈免疫活化
- 卡介苗热休克蛋白70对肿瘤细胞裂解物免疫原性的影响
- 2011年
- 目的:观察卡介苗热休克蛋白70(BCGHSP70)对肿瘤细胞裂解物(TCL)免疫原性的影响,为TCL相关肿瘤疫苗的制备提供依据。方法:应用冻融法制备B16黑色素瘤细胞裂解物B16TCL,将BCGHSP70与B16TCL在体外混合制备BCGHSP70-B16TCL。将C57BL/6小鼠随机分为BCGHSP70-B16TCL组、PBS组、BCGHSP70组和B16TCL组,分别于第1和14天皮下免疫BCGHSP70-B16TCL、PBS、BCGHSP70和B16TCL。于末次免疫后第7天处死小鼠,MTT法观察不同免疫组小鼠脾淋巴细胞在B16TCL体外刺激后的增殖情况,计算刺激指数(SI)。结果:应用冻融法能够使B16细胞完全裂解,所制备的B16TCL中含有丰富的蛋白成分。与PBS组、BCGHSP70组和B16TCL组比较,BCGHSP70-B16TCL组免疫小鼠脾脏明显增大;BCGHSP70-B16TCL免疫组SI高于PBS免疫组(P=0.00)、B16TCL免疫组(P=0.01)和BCGHSP70免疫组(P=0.00)。结论:BCGHSP70能够增强B16TCL的免疫原性,提示BCGHSP70可能作为有效的免疫佐剂用于TCL相关肿瘤疫苗的研究。
- 李贺王华吴秀丽卫红飞孙陆果张永胜于永利王丽颖万敏
- 关键词：卡介苗热休克蛋白质类免疫原性免疫佐剂
- BCG HSP_(65)-GP_2融合蛋白的原核表达及其鉴定
- 2002年
- 目的 :表达可能对多种表皮来源的肿瘤具有预防及治疗作用的卡介苗热休克蛋白 6 5 (BCGHSP65)与人Her 2 /neuCTL表位 (GP2 )构成的融合蛋白 (BCGHSP65 GP2 )。方法 :将已构建的经筛选确定为正向重组的原核表达质粒PET15b BCGHSP65 GP2 转化感受态宿主菌BL2 1(DE3 )PlysS ,加IPTG诱导后 ,提取全菌总蛋白进行SDS PAGE分析 ,并用Western blot验证有无特异性目的蛋白表达。结果 :SDS PAGE分析显示 ,带正向重组质粒的菌株经IPTG诱导后 ,表达了一相对分子量约为 6 2 .3kD的新蛋白 ,Western blot结果显示诱导组具有特异性阳性条带。结论 :BCGHSP65 GP2 融合蛋白得到正确表达 ,使简便获得大量BCGHSP65 GP2 融合蛋白成为可能 ,为肿瘤疫苗的研究奠定了基础。
- 王丽娟吴士彬于永利王丽颖
- 关键词：热休克蛋白质类原核表达WESTERN-BLOT
- 严重急性呼吸综合征冠状病毒2的群体免疫
- 2020年
- 严重急性呼吸综合症冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome-coronavirus 2,SARS-CoV-2)以及由它引起的2019冠状病毒病(COVID-19),正在世界范围内造成众多的人员病亡和巨大的经济损失。在一个国家或地区建立有效的群体免疫来遏制SARS-CoV-2的播散已成为当务之急。在此,对群体免疫的基本概念加以解释并讨论通过自然感染和疫苗接种建立SARS-CoV-2群体免疫的相关问题。
- 于永利
- 关键词：群体免疫自然感染疫苗
- HSP65-PSA融合蛋白的体内外抗肿瘤活性研究被引量：1
- 2008年
- 目的:研究热休克蛋白65(HSP65)-前列腺特异性抗原融合蛋白在体外对人树突状细胞的活化作用以及在小鼠体内抑制PSA阳性肿瘤细胞生长的作用。方法:利用Westernblot方法对融合蛋白HSP65-PSA的特异性进行鉴定;利用共聚焦显微镜、流式细胞术(FCM)检测和斑点杂交的方法对PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞进行鉴定;用HSP65-PSA融合蛋白刺激来自于人外周血的未成熟树突状细胞,观察融合蛋白对树突状细胞的体外活化作用;用PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞种植C57BL/6小鼠,继而用HSP65-PSA融合蛋白来免疫小鼠以观察融合蛋白对PSA阳性B16肿瘤细胞生长的体内抑制作用。结果:Westernblot检测显示融合蛋白HSP65-PSA具有PSA蛋白特异性。共聚焦显微镜、FCM检测和斑点杂交结果均显示PcDNA3-GFP-PSA转染的B16细胞转染情况良好。体外细胞实验显示,将HSP65-PSA融合蛋白作用于人外周血树突状细胞后可以明显促进树突状细胞表面分子CD86的表达,其上调率为52.93%。动物体内实验显示,HSP65-PSA融合蛋白可以明显抑制PSA阳性B16肿瘤细胞在小鼠体内的生长。10μg蛋白免疫组的肿瘤体积(4.91±5.21)与对照组(10.56±6.10)相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HSP65-PSA融合蛋白可以在体外活化树突状细胞,在小鼠体内抑制PSA阳性B16肿瘤细胞的生长。HSP65-PSA融合蛋白可能具有应用于PSA阳性肿瘤的免疫治疗作用。
- 董博翰吴秀丽尹晓光王莉卫红飞孙陆果于永利王丽颖
- 关键词：免疫治疗肿瘤生长抑制
- 貂感染高致病性禽流感病毒事件及其警示
- 2023年
- 2022年10月,在西班牙西北部的一家养殖场内貂的死亡率突然升高。经调查发现,貂的死因是感染了甲型H5N1流行性感冒病毒(简称H5N1)高致病性禽流感病毒。貂感染的H5N1可能来自鸟类且已发生了有助于感染哺乳动物的基因突变。病毒学家提醒,在全世界鸟类中肆虐并已能在貂群传播的H5N1有可能严重危及人类健康。
- 于永利
- 关键词：高致病性禽流感病毒
