任桂杰
- 作品数:33 被引量:207H指数:9
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- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 副粘病毒F蛋白特异性膜融合功能的研究
- 副粘病毒科分为两个亚科:副粘病毒亚科和肺病毒亚科。副粘病毒亚科包括副粘病毒属、麻疹病毒属和腮腺炎病毒属;肺病毒亚科只包括肺病毒属。副粘病毒属主要有副流感病毒(PIV)、新城疫病毒(NDV)和仙台病毒(SV);麻疹病毒属主...
- 任桂杰
- 关键词:副粘病毒融合蛋白细胞融合
- 新城疫病毒F蛋白细胞融合活性位点中保守氨基酸基因突变分析被引量:10
- 2006年
- 为了确定新城疫病毒融合蛋白(F)分子上活性位点中保守氨基酸在F蛋白的细胞融合作用,弄清F细胞融合的分子机理,采用基因定点突变法,创造一个酶切位点,用酶切反应初步筛选突变株,然后用DNA序列分析进一步确定,并于真核细胞内进行表达,Giemsa染色定性和指示基因法定量检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测表达效率情况。结果表明,NDV F第117位苯丙氨酸(F)突变成亮氨酸(L)时对细胞融合作用没有显著影响。R112和K115同为保守序列,分别突变为G时,细胞融合活性只有原来的44%,下降了56%。细胞表面表达效率没有明显的改变。N147突变为K时,细胞融合活性明显下降,只有原来的15%,而细胞表面表达效率没有明显的改变。L154为保守序列,突变为K时,细胞融合活性消失,说明L154是一个非常关键的氨基酸,对维持F蛋白的细胞融合活性非常重要。细胞表面表达效率也有所下降(为原来的94%)。D462属于高度保守氨基酸,当突变为N时,细胞融合活性消失,但经细胞表面表达效率分析证明,此突变蛋白未表达于细胞表面,证明在细胞浆转运至细胞表面的过程中发生了问题。当突变为R和E时,细胞融合活性未发生改变,但细胞表面表达效率有所下降,分别为野毒株的63%和44%。说明NDV F分子上与HN相互作用的特异性区域中的某些保守氨基酸在细胞融合中发挥着重要作用,对F蛋白的折叠、加工、转运等,发挥着不同作用,从而影响F蛋白的细胞融合作用和/或在细胞表面的表达量。
- 王志玉任桂杰温红玲宋艳艳王桂亭姚苹许洪芝张文强
- 关键词:副粘病毒融合蛋白细胞融合基因新城疫病毒
- 风疹病毒包膜糖蛋白E1酵母表达载体的构建被引量:1
- 2004年
- 目的:构建风疹病毒包膜糖蛋白E1的全基因片段的克隆载体和酵母表达载体。方法:应用PCR方法扩增糖蛋白E1的全长基因,并在基因两端创建相应的酶切位点。E1基因与pBluscriptⅡSK+载体均经双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109,经氨苄筛选和蓝白斑筛选并测序,建立了克隆载体pBluscriptⅡSK+鄄E1;克隆载体与表达载体pGAPZαA双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109熏经Zeocin筛选并测序。结果:PCR扩增后出现一条1.5kb的条带,体外重组技术重组于重组质粒pBluscriptⅡSK+和pGAPZαA后,经PCR、EcoRⅠ及XbaⅠ双酶切均出现相应长度的片段,测序证实为包膜糖蛋白E1的基因。结论:成功构建了含有风疹病毒包膜糖蛋白E1全基因的克隆载体及酵母表达载体。
- 温红玲王志玉王战勇任桂杰
- 关键词:风疹病毒糖蛋白类克隆载体酵母菌
- SARS病毒E蛋白基因与EGFP基因在BHK-21细胞中的融合表达
- 2004年
- 目的:构建SARS病毒E蛋白基因的真核表达载体,观察E蛋白基因在BHK鄄21细胞中的正常表达及定位。方法:用PCR方法扩增E蛋白基因,上、下游引物两端分别设计EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点,产物双酶切后定向克隆于pEGFP鄄N1载体,构建真核表达载体pEGFP鄄E,脂质体法转染BHK鄄21细胞,荧光显微镜观察E蛋白基因的表达。结果:经酶切和DNA序列测定鉴定,E蛋白基因正确插入到增强绿荧光蛋白EGFP基因上游,荧光显微镜显示E蛋白表达于细胞浆内,包膜上也有分布。结论:在BHK鄄21细胞中成功表达了SARSCovE鄄EGFP融合蛋白,蛋白定位于细胞浆内。
- 陶泽新王志玉温红玲任桂杰宋艳艳王桂亭姚苹许洪芝
- 关键词:严重急性呼吸道综合征E蛋白转染
- 9-顺-维甲酸对肺癌细胞周期及周期因子表达的影响被引量:19
- 2004年
- 目的 探讨 9 顺 维甲酸对肺癌细胞周期及周期因子cyclinD1和cdk4表达的影响。方法 用 9 顺 维甲酸处理细胞 2 4h后 ,在观察细胞生长、流式细胞仪分析细胞周期的基础上 ,用RT PCR方法分析细胞周期因子cyclinD1和cdk4表达的变化。结果 9 顺 维甲酸作用于肺癌细胞 2 4h以后 ,细胞增殖减慢 ,G0 G1期细胞明显增多 ,S期细胞减少 ;PG ,SPC A1和L78细胞的cyclinD1表达下降显著 ;PG ,A549和L78细胞的cdk4表达下降显著。结论 9 顺
- 任桂杰刘志方胡国强胡晓燕田克立于雪艳
- 关键词:肺癌细胞周期CDK4药物治疗
- Schlemm管外壁切除治疗开角型青光眼的临床观察被引量:2
- 2002年
- 目的 :观察Schlemm管外壁切除联合应用丝裂霉素C治疗开角型青光眼的临床疗效。方法 :对中晚期开角型青光眼 17例、18眼行Schlemm管外壁切除术 ,术中应用丝裂霉素C 0 .2mg/ml。结果 :16眼术后眼压控制在 1.36~ 2 .5 1kPa ,2眼术后眼压为 2 .98~ 3.2 4kPa ,点 0 .5 %噻吗心胺眼水后 ,眼压控制在正常范围。结论 :Schlemm管外壁切除加应用丝裂霉素C ,可有效地降低眼压 ,减少抗青光眼药物的应用 ,术后并发症少 。
- 任桂芳任桂杰张秀萍邵铁军
- 关键词:开角型青光眼
- 台湾金线莲的离体快速繁殖被引量:11
- 1998年
- 陈穗云陈永喆王玉梅任桂杰
- 关键词:台湾金线莲离体繁殖育苗
- 棉花花芽的形态建成及内源激素变化规律的研究
- 为了探讨棉花花芽分化何时开始,以及花芽分化前后,植物体内源激素的变化动态,研究人员于1997~1999年以陆地棉(Gossypium hirsutum)早熟品种中棉所16号(简称中16号)和中熟品种中棉所12号(简称中1...
- 任桂杰
- 关键词:棉花顶端分生组织营养生长生殖生长内源激素
- 文献传递
- 角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉的临床观察
- 2002年
- 任桂芳任桂杰张秀萍栾宏
- 关键词:翼状胬肉干细胞移植术
- 副粘病毒包膜糖蛋白分子生物学研究进展被引量:22
- 2005年
- 任桂杰王志玉
- 关键词:副粘病毒包膜糖蛋白分子生物学F蛋白HN蛋白