静国忠
- 作品数：28 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家攀登计划山东省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 大肠杆菌碱性磷酸酶(PhoA)基因启动子及信号肽核苷酸顺序测定与解析被引量：4
- 1991年
- 在pFOG405重组质粒中的大肠杆菌碱性磷酸酶基因(PhoA)的启动子及信号肽区的核苷酸顺序被测定并同Kikuchi等人在pYK190重组质粒中所报道的顺序进行了比较。结果指出,包含有PhoA基因启动子及信号肽的PvuⅡ-HpaⅠ片段对于调控外源基因的表达是足够的;启动子5’-端的二元对称结构(26bp)的缺失并不影响外源基因的表达水平。由于pYK190及pFOG405中PhoA基因启动子的上游区核苷酸顺序的不同源性,说明此上游区顺序与PhoA启动子调控下的外源基因表达无关。这一分析为我们利用PvuⅡ-HpaⅡ片段组建高效分泌表达载体及研究基因表达调控提供了有用信息。
- 静国忠刘莉军蒋美岩
- 关键词：大肠杆菌碱性磷酸酶
- ST-Ⅱ信号肽基因的化学合成及克隆
- 1991年
- 外源基因在原核细胞中的分泌表达仍然是很活跃的研究领域。Fujimoto等系统地分析比较了大肠杆菌内毒素ST-Ⅰ、ST-Ⅱ、LT-A、LT-B信号肽在人表皮生长因子(hEGF)分泌表达中的作用指出,由ST-Ⅱ信号肽组成的表达载体在大肠杆菌中能精确加工并使hEGF这样小的多肽成功地分泌到细胞周质及培养基中。
- 静国忠张广法蒋美岩刘利军
- 关键词：化学合成克隆
- SNase R与SNase酶学性质的比较研究被引量：2
- 1993年
- 金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)的一种类似物SNase R在E.coli DH5x细胞中高效表达, 经磷酸纤维素离子交换柱层析纯化后.在SDS-PAGE上为一条分子量17.5KDa的蛋白带.本文对SNase R和SNase的某些酶学性质.酶动力学性质进行了比较研究.为蛋白质结构与功能及肽链折叠研究提供了又一种材料.
- 张广发静国忠
- 关键词：酶学金黄葡萄球菌核酸酶
- 蛋白质生物合成的第四步:翻译终止后复合物的解体被引量：1
- 2005年
- 蛋白质合成过程一般被归纳为由合成的起始、肽链的延伸和合成的终止组成的三步曲.然而,随着对核糖体再循环因子(ribosomerecyclingfactor,RRF)在蛋白质合成过程中作用的深入研究,人们提出了蛋白质生物合成应是四步曲,这第四步就是翻译终止后核糖体复合物的解体,也就是通常说的核糖体循环再利用.简要地介绍了翻译终止后复合物解体的可能机制:核糖体再循环因子和蛋白质合成延伸因子G在核糖体上协同作用催化这一过程的完成.
- 郭鹏张立强静国忠
- 单克隆抗体探测蛋白质折叠机制的微量热研究
- 梁毅秦志杰陈杰周筠梅静国忠
- 关键词：蛋白质折叠微量热肽链单克隆抗体
- 文献传递
- 葡萄球菌核酸酶去C-末端的肽段52和79的分离纯化
- 1997年
- ①目的建立金黄色葡萄球菌核酸酶（ＳＮａｓｅ）去Ｃ－末端的肽段５２（ＳＮ５２）和７９（ＳＮ７９）的提纯方法，并鉴定其纯度。②方法应用低温乙醇沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００柱层析分离纯化；十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和高效液相层析（ＨＰＬＣ）鉴定其纯度。③结果纯化的ＳＮ５２和ＳＮ７９经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定均为单一区带；ＨＰＬＣ鉴定均为一个峰。④结论纯化的ＳＮ５２和ＳＮ７９已达电泳纯和层析纯，可用于其构象的比较研究。
- 耿芳宋静国忠许小幸段建华段建华
- 关键词：葡萄球菌核酸酶肽片段
- Trigger Factor体内分子伴侣作用与其PPlase活力无关而作用效果与其同底物的比例相关
- 大肠杆菌Trigger Factor是一种多功能蛋白,既是PPlase又是分子伴侣蛋白,并与新生肽链相互作用,帮助折叠.TF的这种特性可以用于防止大肠杆菌中表达的重组蛋白聚集形成包含体,提高活性重组蛋白的回收率.为了研究...
- 李震宇刘川鹏朱榴琴静国忠周筠梅
- 文献传递
- 用碱水解的方法测定蛋白质的消光系数被引量：5
- 1999年
- 在蛋白质结构与功能的研究中， 有时蛋白质溶液的浓度是一个重要的参数． 紫外吸收法是测定蛋白质溶液浓度最为常用的方法， 而已知蛋白质的消光系数是用紫外吸收法准确测定蛋白质溶液浓度的前提条件． 在０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｎａ Ｏ Ｈ 溶液中， 蛋白质发生碱性水解， 因而蛋白质溶液可以看作是色氨酸和酪氨酸的二元体系． 以此为依据， 给出了用碱水解的方法测定蛋白质消光系数的方法． 这一方法操作步骤简便易行， 蛋白质消光系数的计算公式简单明了． 用这一碱水解的方法分别测定了几种氨基酸组成不同的蛋白质的消光系数， 与文献数据对照， 得到了令人满意的结果， 测定误差均小于±５ ％ ．
- 周波静国忠
- 关键词：蛋白质消光系数碱水解紫外吸收法
- SNase R的C-末端缺失片段SNR135构象特性的质谱研究
- 质辅助激光解吸电离飞行时间质谱与Glu蛋白酶限制酶解相结合的方法，对金黄色葡萄球菌核酸酶SNase R的C-末端缺失片段SNR135的构象特性进行研究，可获得有关该片段α-螺旋折叠状态的某些结构信息。
- 彭嘉柔杨峰静国忠周筠梅
- 关键词：质谱
- 单克隆抗体——研究蛋白质折叠的新探针被引量：5
- 1998年
- 利用竞争ELISA的方法 ,发现溶液状态下全酶SNaseR及其 7个N 末端肽段与McAb2C9之间的结合存在差别 ,其中SNR1 2 1 ,SNR1 0 2 ,SNR79,SNR5 2及全酶SNaseR能够与抗体较好地结合 ,而SNR1 41 ,SNR1 35 ,SNR1 1 0与抗体结合很弱 .由于全酶和SNR5 2均能与McAb2C9紧密结合 ,其抗原决定簇应该包含在 - 6～5 2序列中 .因此 ,不同长度的肽段与抗体结合能力直接与抗原决定簇的可接近程度相关 .比较不同长度的肽段与单抗McAb2C9的结合能力 ,清楚地表明肽链在从N 末端向C 末端延伸的过程中 ,其构象在不断调整直至形成完整的功能蛋白 ,这一结果有力地支持邹氏新生肽链折叠假说 .单克隆抗体作为一种新型探针 ,可为蛋白质折叠机制的研究提供重要的信息 .
- 程鹏王锡德静国忠赵康源周筠梅郭振泉
- 关键词：探针单克隆抗体抗原决定簇蛋白质折叠
