苏友强
- 作品数：18 被引量：52H指数：4
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程
- 2015年
- 目的:利用国内医学研究常用ICR品系小鼠,在构建用于研究卵母细胞-卵丘细胞交互作用培养模型的基础上,研究卵母细胞及其产生的旁分泌因子生长分化因子9(GDF9)和骨形态发生蛋白15(BMP15)对排卵过程中的关键事件——卵丘扩展的调控作用。方法:通过显微手术制备摘除卵母细胞后的卵丘细胞复合体(OOX),并通过与卵母细胞共培养或GDF9和BMP15处理研究卵母细胞及其特异释放的旁分泌因子对表皮生长因子(EGF)诱导卵丘扩展过程的调控。结果 :成功构建了ICR小鼠OOX培养模型,发现卵母细胞及其释放的旁分泌因子GDF9和BMP15为EGF诱导卵丘扩展所必需。结论:ICR小鼠卵母细胞通过旁分泌机制促进排卵关键过程。
- 杨光平张心悦时兰英苏友强
- 关键词：卵母细胞排卵ICR小鼠女性生殖
- LH/EGF诱导ICR小鼠窦状卵泡卵母细胞体外成熟与排卵的研究被引量：4
- 2017年
- 目的 :利用医学研究常用ICR品系小鼠,在建立窦状卵泡体外培养体系的基础上,研究黄体生成素(luteinizing hormone,LH)与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导卵母细胞体外成熟及排卵的作用。方法 :体外剥离得到大的窦状卵泡用于培养并建立适宜于研究诱导卵母细胞成熟及排卵的窦状卵泡体外培养模型,通过向培养液中添加LH和EGF诱导卵母细胞体外成熟与排卵。结果:成功构建了ICR小鼠窦状卵泡体外培养模型,发现LH或EGF单独处理均可诱导卵泡卵母细胞成熟和卵丘扩展,而两者共同作用才能够诱导卵泡体外排卵。结论:LH/EGF促进ICR小鼠窦状卵泡卵母细胞体外成熟与排卵。
- 尹耀学苏友强
- 关键词：卵母细胞体外成熟排卵ICR小鼠女性生殖
- Marf1基因的克隆及其在真核细胞中的表达
- 2017年
- 目的:克隆小鼠的Marf1基因并使其在真核细胞HEK293T中异位表达,以研究MARF1蛋白在细胞中的表达和定位。方法:运用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增并获得Marf1基因编码序列,再利用新型分子克隆体系In-Fusion将该目的片段克隆至pCMV6-AC-3DDK和pCMV6-AN-m Kate两个真核表达载体中,由此所得融合质粒经限制性内切酶酶切电泳和测序筛选鉴定,将所得到的阳性质粒转染到HEK293T细胞中进行表达,然后利用DDK和m Kate标签抗体通过Western blot或免疫荧光的方法检测目的蛋白MARF1的表达和定位。结果:DNA测序鉴定证明Marf1基因克隆成功;Western blot检测到MARF1-3DDK和MARF1-m Kate融合蛋白在转染的HEK293T细胞内的表达;免疫荧光显示融合蛋白在转染后的HEK293T细胞质呈颗粒状分布,并与纺锤体共定位。结论:成功克隆了小鼠Marf1基因并实现了其在真核细胞HEK293T中的稳定表达,为进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。
- 张小云曹广义殷虹时兰英苏友强
- 猪卵丘卵母细胞复合体和壁层颗粒细胞上LHR/hCGR的检测及性腺激素的分泌被引量：1
- 1999年
- 用取自 ３～５ ｍ ｍ 卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐ Ｃ Ｅ Ｏ），培养 ４８ ｈ，用 Ｆ Ｓ Ｈ（１００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）或 ｈ Ｃ Ｇ（０、５０、１００、２００、５００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）刺激 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌甾体激素；用放射受体测定法（ Ｒ Ｒ Ａ）比较 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 的卵丘细胞及壁层颗粒细胞（ Ｍ Ｇ Ｃ）上促黄体激素受体／人绒毛膜促性腺激素受体（ Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ）的数量； Ａ Ｍ ｅ Ｘ 石蜡切片、免疫组织化学染色，检测 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 以及 Ｍ Ｇ Ｃ 的分布情况。在 Ｆ Ｓ Ｈ 作用下，ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌的孕酮明显高于 ｈ Ｃ Ｇ 作用组和对照组 （ Ｐ ＜ ００５）； 平均每个壁层颗粒细胞上的 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ是每个卵丘细胞的 １０５ 倍； Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在基膜两侧分布较多，且卵母细胞上没有 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ，临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明，在体外试验中，可能由于 Ｃ Ｅ Ｏ 上 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 的数量不足或生理活性降低， Ｌ Ｈ／ｈ Ｃ Ｇ 不能促进卵母细胞恢复减数分裂。
- 赫晨夏国良谢辉蓉苏友强傅国栋
- 关键词：复合体LHHCG受体孕酮
- 卵母细胞成熟过程中信号转导及调控研究进展被引量：3
- 1999年
- 哺乳动物卵母细胞成熟机制一直是生殖生物学研究的热点，目前仍有许多环节尚不十分清楚。本文对卵母细胞成熟过程中复杂的信号转导通路及蛋白质合成过程中的最新进展进行了综述。
- 苏友强夏国良杨传任
- 关键词：卵母细胞成熟信号转导蛋白质合成
- 次黄嘌呤对猪卵母细胞体外自发成熟抑制作用的研究被引量：8
- 2000年
- 利用猪卵母细胞体外无血清培养技术,研究了次黄嘌呤(HX)对猪卵母细胞体外自发成熟的抑制作用。猪卵丘-卵母细胞复合体(COC)和裸卵母细胞(DO)取自初情期猪卵巢,培养在M-199培养液中,并施以各种处理。培养不同时间后,观察卵母细胞核成熟(GVBD)情况。实验结果表明:(1)HX(1-4mmol/L)对猪COC的自发成熟具有抑制作用,且具有剂量依赖关系。4mmol/L的HX对COC和DO自发成熟的抑制作用无明显差异(P>005);(2)HX对COC的自发成熟的抑制作用,随培养时间的延长而减弱;(3)COC在含有4mmol/LHX的M-199培养液中培养24h后转移到不含HX的培养液中继续培养时,仍能够自发成熟。在体外,HX能够可逆地部分抑制猪卵母细胞体外自发成熟,该作用具有剂量依赖性。
- 苏友强夏国良陈勇赫晨傅国栋
- 关键词：次黄嘌呤卵母细胞
- 一种基于CRISPR/Cas9获得MARF1定点突变小鼠模型的构建方法和应用
- 一种基于CRISPR/Cas9获得MARF1定点突变小鼠模型的构建方法和应用，设计高效的识别特定基因组PAM区域的sgRNA序列；并在sgRNA序列基础上设计Donor DNA；将Donor DNA，sgRNA和Cas9...
- 苏友强曹广义李明哲王昊时兰英
- 组织切片法观察昆明白小鼠卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系被引量：4
- 2000年
- 本实验应用组织切片法探讨了体内正常生理条件下昆明白小鼠卵巢内卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系。初情期前小鼠注射孕马血清促性腺激素 (PMSG) ,4 8h后注射人绒毛膜促性腺激素 (HCG) ,于注射HCG后不同时间取出卵巢进行组织切片。注射 HCG后 1h,卵丘细胞开始扩展 ,此时卵母细胞核膜完整 ,即未发生生发泡破裂 (GVBD) ;注射 HCG后 3h,大部分 (>70 % )大有腔卵泡中卵母细胞发生 GVBD,此时卵丘处于 2级扩展状态。卵丘完全扩展发生在注射 HCG后 9h,而 PB1的排出是从 12 h开始的。结果表明 :在小鼠体内 ,卵丘开始扩展先于卵母细胞成熟 ,但卵母细胞成熟并不需要卵丘完全扩展 ;促性腺激素能促进卵泡发育及卵母细胞成熟 。
- 陈勇夏国良王海滨苏友强傅国栋
- 关键词：昆明白小鼠卵母细胞组织切片
- 促性腺激素对猪卵丘细胞-卵母细胞复合体体外减数分裂恢复作用的研究被引量：2
- 1998年
- 本实验利用猪卵母细胞体外无血清培养技术，选用猪卵泡液中自然存在的次黄嘌呤（ＨＸ）作为卵母细胞自发成熟的抑制剂，研究了促性腺激素对猪卵丘细胞－卵母细胞复合体（ＣＥＯ）减数分裂恢复的具体作用。ＣＥＯ在含有不同浓度的促性腺激素（ＦＳＨ，ｈＣＧ，ＦＳＨ＋ｈＣＧ）的培养液中培养２４ｈ，观察卵母细胞减数分裂恢复（ＧＶＢＤ）情况。实验结果如下：１．ＦＳＨ（１－５００ＩＵ／Ｌ）能够明显刺激ＣＥＯ克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂（Ｐ＜０．０５），该作用具有剂量依赖性；２．ｈＣＧ（１－５００ＩＵ／Ｌ）对ＣＥＯ减数分裂的恢复无明显作用；３．ｈＣＧ（１０－５００ＩＵ／Ｌ）与ＦＳＨ（１０，１００ＩＵ／Ｌ）无协同作用。上述结果表明，猪ＣＥＯ减数分裂的恢复可能主要依赖于ＦＳＨ的作用，该作用能使猪卵丘细胞产生一种或几种阳性因子，作用于卵母细胞，从而克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂。ｈＣＧ无明显作用。
- 苏友强夏国良陈勇赫晨傅国栋杨传任
- 关键词：促性腺激素CEO
- 鸡GnRH对体外培养的鸡卵泡膜细胞合成甾类激素的作用被引量：1
- 1996年
- 在建立鸡卵泡膜细胞体外无血清贴壁培养模型基础上，研究了鸡促性腺激素释放激素（ｃＧｎＲＨⅡ）对鸡卵胞膜细胞合成睾酮（Ｔ）和雌二醇（Ｅ２）的直接作用；以及在绵羊促黄体激素（ｏＬＨ）或促卵泡激素（ｏＦＳＨ）存在时，ｃＧｎＨⅡ对膜细胞合成Ｔ或Ｅ２的影响。实验结果如下：①在培养液中单独加入ｃＧｎＲＨⅡ，能促进Ｆ５、Ｆ３卵泡膜细胞合成Ｔ及Ｅ２，并具有剂量依赖关系；而对于Ｆ１卵泡膜细胞的作用效果不明显。②ｃＧｎＲＨⅡ与ｏＬＨ（５０ｎｇ）共同处理，当ｃＧｎＲＨⅡ低剂量（１００ｇ）时，膜细胞Ｔ合成量明显增加，而加大剂量时，Ｔ合成量则显著降低。③ｃＧｎＲＨⅡ（５００ｎｇ）与ｏＦＳＨ（５０ｎｇ）共同处理对膜细胞Ｅ２的合成有抑制作用，降低ｃＧｎＲＨⅡ的含量，可逐渐恢复ｏＦＳＨ对膜细胞Ｅ２合成的刺激作用。
- 苏友强汪琳仙
- 关键词：卵泡膜细胞甾类激素促性腺激素释放激素
