肖娟
- 作品数：20 被引量：15H指数：2
- 供职机构：北京市虹天济神经科学研究院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚鼻黏膜神经干细胞的分离提纯及培养
- 目的:探讨人胚胎鼻黏膜神经干细胞的分离、纯化方法,以及培养过程中血清的应用。方法:选取优质胚胎,无菌分离上鼻甲、中鼻甲及其相对应的鼻中隔的被覆黏膜,DMEM/F12充分清洗,剪切,悬浮于中性蛋白酶和胶原酶的混合酶中37℃...
- 姜晓荣任玉水王洪美刘婧媛肖娟赵艳秀陈琳黄红云
- 关键词：神经干细胞传代
- 文献传递
- 人嗅粘膜嗅鞘细胞分离、传代、冻存、分化技术
- 本发明提供了人嗅粘膜嗅鞘细胞培养、传代、冻存、分化技术。特色步骤包括：1、用含DMEM/DF12等神经营养因子配制嗅粘膜嗅鞘细胞培养基；2、鼻粘膜的获取；3、双酶组合消化。4、原代培养：加入嗅粘膜嗅鞘细胞培养基制成的细胞...
- 黄红云高文勇肖娟
- 文献传递
- 两种冻存液中海马神经元细胞复苏后生物学特性比较
- 2010年
- 目的：建立海马神经元适宜的冻存方法。方法：将新生24h以内的大鼠海马消化成单个细胞后分别直接冻存于血清浓度不同的冻存液中，复苏后进行台盼蓝染色观察细胞活性；培养后观察其生长状态并在第7天固定细胞，分别进行Hoechst，微管蛋白（Tubulin）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）显色后，荧光显微镜下计数海马神经元、胶质细胞的百分率，从而建立最佳冻存方法。结果：冻存于高浓度血清冻存液中的神经元百分率为87．5％，冻存于低浓度血清冻存液中的神经元百分率为73．8％，高浓度血清冻存液中的细胞复苏后的状态及神经元存活率明显优于保存于低浓度血清冻存液中的；而冻存于高低浓度血清冻存液中的胶质细胞百分率分别为9．5％和16．5％，胶质细胞在高浓度血清的相对含量明显低于低血清组。结论：高浓度血清冻存液更利于海马神经细胞冻存后的复苏和生长。
- 王洪美胡琴肖娟姜晓荣赵艳廷曹敬丽任玉水田国忠黄红云
- 关键词：海马神经元冻存微管蛋白神经胶质纤维酸性蛋白
- 脐带间充质细胞生物学特性及应用研究被引量：1
- 2013年
- 间充质细胞是来源于中胚层的一种能自我更新和具有多向分化潜能的成体干细胞,存在于全身结缔组织和器官中。间充质细胞呈典型的成纤维状,高表达间质细胞标志蛋白CD44,CD90和CD105,不表达造血系标志蛋白CD34和CD45。间充质细胞经诱导培养不仅能分化成骨细胞,软骨细胞,干细胞,心肌细胞等,也可以分化成多巴胺能神经元等。人脐带间充质细胞与其他来源的间充质细胞相比,具有来源广,免疫原性低,避免伦理学问题等诸多优点。因此,脐带间充质细胞作为临床细胞治疗和组织再生的一个理想来源而越来越受关注。
- 肖娟姜晓蓉刘靖媛魏国梅高文勇陈琳黄红云
- 关键词：间充质细胞细胞生物学特性人脐带多向分化潜能成体干细胞标志蛋白
- 嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白转基因小鼠脑内降低β淀粉样蛋白沉积
- 2010年
- 目的观察嗅鞘细胞移植入淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠脑内后的存活和迁移状况及其对模型β淀粉样蛋白沉积的作用,以进一步探索嗅鞘细胞移植对阿尔茨海默病的治疗效果。方法取自发绿色荧光蛋白的新生3d龄增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠,体外分离培养嗅球嗅鞘细胞,在小鼠脑立体定位仪的固定下,参照AP小鼠脑立体定位图谱,将收集的嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内。移植1个月后,取脑组织冷冻切片,在双光子共焦显微镜下观察细胞存活和迁移状况并采集图像。移植1个月后,行荧光免疫组织化学和免疫印迹法检测淀粉样蛋白沉积,每组4只。结果嗅鞘细胞移植入APP转基因小鼠脑内存活良好,并以移植点为中心向外迁移,部分绿色荧光细胞呈现成血管现象,移植之后APP转基因小鼠脑内的β淀粉样蛋白沉积减少,APP表达明显减少(P<0.05)。结论嗅鞘细胞对减少APP转基因小鼠脑内淀粉样蛋白沉积有一定帮助。
- 曹敬丽刘婧媛肖娟姜晓荣任玉水王洪美周长满黄红云
- 关键词：Β淀粉样蛋白细胞移植免疫印迹法APP转基因小鼠
- 临床应用型人脐血间充质干细胞分离培养与鉴定
- 2010年
- 目的探讨能够达到临床细胞治疗标准的人脐血间充质干细胞的体外培养与纯化方法。方法以15%FBS/DMEM作为培养基,采用淋巴细胞分离液间接分离法,分离MSCs,以贴壁培养法进行原代培养和纯化。倒置显微镜下观察生长状态和形态学变化,共聚焦显微镜下观察细胞表面抗原CD34,CD44免疫组化染色的鉴定。结果细胞计数显示人脐血间充质干细胞产品的细胞成活率大于95%,其纯度大于85%,符合卫生部第三类医疗技术的有关标准。结论脐带血内含MSCs,可在体外分离培养纯化增殖,获得大量相对纯化的MSCs,达到临床应用水平。
- 肖娟陈琳王洪美李莹任玉水黄红云
- 关键词：脐血间充质干细胞细胞培养免疫组化
- 来源于人胚纹状体区神经干/祖细胞的培养、冻存及鉴定
- 2015年
- 目的分离人胚胎纹状体组织的神经干/祖细胞,运用细胞培养上清液作为冻存液和贴壁法培养扩增、合理的冻存密度及有效的复苏时间,在体外建立稳定培养、保存体系,给中枢神经系统疾病的治疗提供技术支持。方法将来源于胚胎的纹状体神经干/祖细胞,利用无血清培养基进行体外培养扩增。采用细胞培养上清液作为冻存液,冻存密度为5×10~6/ml^2~5×10~7/ml,分别复苏冻存1、3、6个月的细胞各3支,并用台盼蓝染色计数,计算细胞存活率。将此细胞传代培养p3、p9、p15、p21,用Nestin免疫组化进行化学染色鉴定。结果应用贴壁培养法细胞能够稳定传代p21以上,冻存1、3、6个月后,细胞存活率可达87%左右,仍然保持生长分化能力,Nestin表达阳性率为85%以上。结论本方法培养人胚胎纹状体神经干/祖细胞能传代扩增、低温保存,为中枢神经系统疾病细胞治疗研究提供技术依据。
- 高文勇姜晓荣肖娟郗海涛陈琳黄红云
- 关键词：细胞培养
- 临床应用型人胚神经干细胞的培养与增值
- 目的:建立有效的人胚神经干细胞的培养与增值方法以达到临床需求。方法:用含有1%N2、2%B27、10ng/mlLIF、20ng/mlEGF、20ng/mlFGF的DMEM/DF12培养液进行培养后增值,在光学显微镜下观察...
- 任玉水肖娟姜晓荣黄红云
- 关键词：神经干细胞
- 文献传递
- 三种人胚胎许旺细胞培养方法的比较被引量：2
- 2011年
- 目的比较三种不同培养方法对许旺细胞纯度影响。方法应用三种不同的培养方法对10份人胚胎样本的坐骨神经分别采用植块培养法、差速贴壁法、分次消化法进行培养观察。并采用S100免疫荧光化学方法鉴定许旺细胞,Hoechst染色标记细胞核,统计许旺细胞纯度。结果三种培养方法其获得的细胞纯度分别为:分次消化培养法为90%,差速贴壁法为75%,植块培养法为67%,分次消化培养法获得的细胞纯度明显高于其他两组(P<0.05)。结论分次消化培养法较差速贴壁法、植块培养法更易获得高纯度许旺细胞。
- 王洪美胡琴姜晓荣肖娟任玉水陈琳黄红云
- 关键词：许旺细胞坐骨神经S100蛋白质类纯化
- 嗅鞘细胞移植对颈髓损伤后心率变异性影响的初步探讨被引量：2
- 2010年
- 笔者在嗅鞘细胞移植治疗陈旧性脊髓损伤后，观察到移植后损伤节段以下的泌汗功能恢复、皮肤营养改善，但缺少客观指标的描述。心率变异性（HRV）在临床上被用作无创伤地反映植物性神经系统活动的指标。本文对脊髓损伤患者嗅鞘细胞移植后HRV的改变做初步的探讨。
- 黄红云陈琳郗海涛解自行张峰刘彦铖肖娟张夏琳周长满
- 关键词：嗅鞘细胞移植心率变异性颈髓损伤脊髓损伤患者神经系统活动皮肤营养
