王永杰
- 作品数：41 被引量：67H指数：4
- 供职机构：上海海洋大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金上海市教育委员会创新基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 牡蛎中GⅡ型诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的优化与评价被引量：1
- 2021年
- 为了解决目前巢式RT-PCR法检测牡蛎样品中GⅡ型诺如病毒时存在的非特异性扩增及假阴性等问题,对NCBI数据库中在线获得的所有GⅡ型诺如病毒序列进行系统分析,重新设计出针对GⅡ型诺如病毒检测的通用型巢式RT-PCR引物(NG2OF/NG2OR),并从基因型覆盖度、特异性、灵敏度和实际样品检测的稳定性几个方面对新设计的引物进行评估。结果显示:新引物的特异性好,只对GⅡ型诺如病毒进行有效扩增,且不受牡蛎样品本底的影响;新引物灵敏度高,最低可检测至26.4个拷贝;在对92个牡蛎样品进行检测时,新引物的阳性检出率为28.3%,比经典引物高出7.5%。因此,新建立的GⅡ型诺如病毒巢式RT-PCR检测方法在检测牡蛎样品时特异性更强,灵敏度更高,为牡蛎中诺如病毒的检测提供了一种新的、可靠的技术手段。
- 贾添慧董蕾王永杰喻勇新
- 关键词：牡蛎巢式RT-PCR特异性阳性率
- 城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法
- 2022年
- 【目的】土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。【方法】通过筛选2种病原菌特异性引物,优化反应条件。【结果】初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测,其灵敏度分别达24×10^(6)和22×10^(6)拷贝·L,2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。【结论】建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性,可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。
- 雒淑红骆玉珍赵莺莺张维维刘文何山文安磊王永杰韩继刚
- 关键词：城市绿地土壤立枯丝核菌
- GI与GII型诺如病毒RT-RPA分型快检用引物探针及其应用和快检方法
- 本发明属于分子生物学领域，具体涉及GI与GII型诺如病毒RT‑RPA分型快检用引物探针及其应用和快检方法。GI型诺如病毒分型用引物探针如SEQ ID NO:1‑3所示，GII型诺如病毒分型用引物探针如SEQ ID NO:...
- 喻勇新赵璐贾添慧徐佳乐汪艺涵王永杰
- 西藏开菲尔粒中酵母菌的分离与初步鉴定被引量：10
- 2015年
- 西藏开菲尔粒（俗称藏灵菇）是由多种乳酸菌（间或少量醋酸菌）和酵母菌共生而成一种外形酷似菜花的白色或乳黄色团状聚合体,是目前已知的唯一可用于酸奶制作的天然野生菌种资源。采用扫描电镜、分离培养、26S rRNA基因测序与序列分析、荧光原位杂交（FISH）相结合的技术方法,对西藏开菲尔粒中的酵母菌进行了分离培养、鉴定和形态观察。结果显示：西藏开菲尔粒中酵母菌多为球形（2.0~5.0μm）或椭圆形（1.0~3.0×2.0~4.0μm）;从西藏开菲尔粒中分离出的16株酵母菌分属于酿酒酵母属（Saccharomyces）、克鲁维酵母属（Kluyveromyces）、亚罗酵母属（Yarrowia）这3个属中的4个种,其中3株是酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）,8株为马克斯克鲁维酵母菌（Kluyveromyces marxianus）,3株为解脂亚罗酵母菌（Yarrowia lipolytica）。
- 卢曼陈小兵王兴兴潘迎捷王永杰
- 关键词：RRNAFISH扫描电镜
- VP53B和VP110抗体及其在制备防治对虾白斑综合征的药物中的应用
- 本发明涉及VP53B和VP110抗体及其在制备防治对虾白斑综合征的药物中的应用。本发明筛选得到VP53B和VP110部分蛋白片段，生产了多克隆抗体，采用对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白抗体中和实验证实了VP53B和...
- 王永杰夏文旭覃冰姚迁会江录志刘昱辰喻勇新
- 诺如病毒GII.6 P粒子原核表达与纯化被引量：1
- 2018年
- 原核表达的诺如病毒(Noroviruses,NoV)衣壳蛋白亚基P粒子与No V有相同的抗原类型,可以代替NoV在体外进行结合,这对于研究该病毒与宿主和环境载体结合的相关机理有重大意义。本研究成功构建GII.6 P粒子基因表达载体,并对原核表达体系中诱导剂浓度、诱导温度及诱导时间进行优化。结果表明表达载体在22℃、2×10^(-4)mol/L IPTG诱导22 h后表达量最高。随后,在亲和层析的基础上结合阴离子交换以及凝胶过滤层析对表达产物进行纯化,最终获得高纯度GII.6 P粒子。
- 余明霞蔡慧陈豪喻勇新潘迎捷潘迎捷
- 关键词：原核表达
- 对虾白斑综合征病毒新株型WSSV-CN-Pc的毒力研究被引量：1
- 2018年
- 对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是一种能够感染虾类并且造成其大面积死亡的环状双链DNA病毒。WSSV有多种分离株,其毒力有所差异。从克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中分离得到1株WSSV新分离株WSSV-CN-Pc,其毒力尚不清楚。本研究采用肌肉注射和经口注射的方法,以WSSVTW型作为阳性对照,分别对克氏原螯虾(P.clarkii)和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)进行活体实验。实验结果显示:肌肉注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第6天出现100%的死亡;罗氏沼虾在肌肉注射WSSV-TW后未出现死亡,但在注射WSSV-CN-Pc后的第9天死亡率达100%。经口注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第16天出现100%的死亡;罗氏沼虾经口注射WSSV-CN-Pc后的第19天死亡率为100%,但注射WSSV-TW的实验组并未出现死亡。结果表明,对于克氏原螯虾,WSSV-CN-Pc具有和WSSV-TW相似的毒力,而对罗氏沼虾存在明显的毒力差异。提示克氏原螯虾是WSSV传播途径中的重要因素。
- 李凯江录志夏文旭潘迎捷王永杰
- 关键词：对虾白斑综合征病毒分离株毒力
- 储物瓶（废物处理）
- 1．本外观设计产品的名称：储物瓶（废物处理）。;2．本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于盛装处理呕吐物的材料。;3．本外观设计产品的设计要点：产品的形状。;4．最能表明本外观设计设计要点的图片或照片：组件1主视图。;...
- 王永杰喻勇新曹维徐钟幸
- 雷公藤三萜酸在制备防治白斑综合征病毒药物的应用
- 本发明属于水产养殖的疾病防治领域，特别涉及雷公藤三萜酸在制备防治白斑综合征病毒药物的应用。尤其是在制备防治虾类白斑综合征病毒药物的应用中。雷公藤三萜酸经口投喂或经口注射的方式应用。本发明通过实验证明了雷公藤三萜酸对克氏原...
- 王永杰李凯夏文旭江录志刘昱辰覃冰
- 西藏开菲尔粒中Lactobacillus kefiri的分离与鉴定被引量：3
- 2018年
- Lb.kefiranofaciens是西藏开菲尔粒中的优势菌株,约占乳酸菌总数的95%。通过分离纯化,构建克隆文库并结合16S rRNA基因测序、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、菌落PCR和显微镜观察等手段分析了开菲尔粒中的非优势乳酸菌Lb.kefiri。扫描电镜显示,其细胞形态呈短杆状(0.8~1.5×0.6~0.7μm),比Lb.kefiranofaciens短,且细菌聚集生长的趋势更为明显。在所构建的克隆文库中,25个菌落经测序分析,发现有1条序列属于Lb.kefiri。以开菲尔粒为样品,通过分离纯化,应用菌落PCR方法验证的22个单菌落中,有5个单菌落是Lb.kefiri。此外,对开菲尔粒进行PCR-DGGE检测,发现4个开菲尔粒样品中都有Lb.kefiri的存在。这些结果都证明了Lb.kefiri在开菲尔粒中稳定存在且所占比例相对较小,是一种非优势乳酸菌。
- 贾宇声王兴兴潘迎捷王永杰
- 关键词：克隆文库DGGE细胞形态观察
