熊婧
- 作品数：14 被引量：17H指数：3
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 糖氧剥夺再灌注对SH-SY5Y细胞焦亡的影响
- 2021年
- 目的探讨细胞焦亡在糖氧剥夺诱导的人神经母细胞瘤细胞(Human neuroblastoma cells, SH-SY5Y)损伤中的作用。方法用不同糖氧剥夺时间(0、3、6、12 h)处理SH-SY5Y细胞,然后进行再灌注24 h;Hoechst33342/碘化丙啶(Propidine iodide, PI)染色试剂盒观察细胞膜破裂情况;原位末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)/天冬氨酰特异性半胱氨酰蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase-1)共染检测细胞焦亡;蛋白免疫印迹法检测焦亡相关指标[核苷酸结合寡聚化结构导致域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、Pro-caspase-1、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β),Pro-IL-1β]的表达水平;使用Caspase-1抑制剂(Belnacasan, VX-765)处理糖氧剥夺/再灌注细胞模型,观察其对细胞焦亡的影响。结果糖氧剥夺再灌注处理呈时间依赖诱导SH-SY5Y细胞损伤,并诱导细胞焦亡,焦亡相关指标(NLRP 3,Caspase-1,IL-1β)表达水平升高。VX-765可减轻糖氧剥夺再灌注诱导的SH-SY5Y细胞焦亡,降低焦亡相关指标(Caspase-1,Pro-IL-1β,IL-1β)的表达水平。结论细胞焦亡在糖氧剥夺再灌注诱导的SH-SY5Y细胞损伤中起到重要作用。
- 黄丽琴余樱熊婧赵雪清孟兰霞张振涛张兆辉
- 关键词：SH-SY5Y细胞缺血再灌注损伤
- 丙酮酸乙酯对鱼藤酮诱导的多巴胺能神经细胞损伤的保护作用
- 2017年
- 目的建立鱼藤酮(Rotenone,Rot)诱导的SH-SY5Y细胞模型,探讨丙酮酸乙酯(Ethyl pyruvate,EP)对多巴胺能神经细胞的保护作用及机制。方法 Rot作用于SH-SY5Y细胞,构建Rot诱导的PD细胞模型,使用不同浓度的EP作用于PD细胞模型,MTT法检测细胞活力,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,免疫印迹法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白的表达,免疫荧光染色观察HMGB1的表达及定位。结果 EP减轻了Rot引起的多巴胺能神经细胞凋亡,并提高了细胞活力;EP减少了Rot诱导的LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比例增高,增加P62蛋白的表达,且与EP的水平呈正相关。激光共聚焦显微镜观察到EP抑制了HMGB1的胞浆转位。结论 EP可能通过抑制HMGB1的转位来减少Rot诱导的自噬性损伤,从而对多巴胺能神经细胞起到保护作用。
- 熊婧胡丹张振涛张兆辉
- 关键词：丙酮酸乙酯自噬高迁移率族蛋白1
- 99Tcm-DRODAT-1显像评价鱼藤酮立体定位注射制作大鼠单侧帕金森病模型效果的研究
- 曹卫张永学张斌青张昭文熊婧吴涛何勇高再荣王涛安锐
- 农药与帕金森病的相关性研究进展被引量：1
- 2016年
- 帕金森病是人类常见的神经变性疾病,至今病因未明。目前认为帕金森病是遗传因素、年龄老化以及环境因素等多因素共同作用的结果。农药作为一种常见的环境毒素,其与帕金森病发病的相关性业已得到证实。本文将从流行病学调查、临床观察以及实验动物模型三个方面对农药与帕金森病发病的相关性进行综述。
- 熊婧张兆辉
- 关键词：帕金森病农药流行病学临床病例
- CDK5在鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元凋亡中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨CDK5在鱼藤酮介导的SH-SY5Y细胞凋亡中的作用以及通过干预CDK5表达对细胞凋亡的影响。方法使用鱼藤酮处理多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Annexin-V/PI染色,流式细胞仪检测不同实验组细胞凋亡率,采用Western blot法检测不同实验组CDK5的表达以及p25/p35蛋白的表达比。结果经鱼藤酮处理后细胞活力呈浓度依赖性下降,细胞凋亡率增高,且CDK5表达增高,p25/p35比值增高。CDK5抑制剂MDL28170或Olomoucine预处理细胞能够降低CDK5的表达水平,降低p25/p35蛋白的表达比,同时可以减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤。结论 CDK5在鱼藤酮介导的SH-SY5Y细胞凋亡中可能发挥着重要作用,抑制CDK5的活性可能具有神经保护作用。
- 黄杰张振涛陈春暖王洪财熊婧王涛
- DNA聚合酶β抑制剂齐墩果酸对帕金森病小鼠模型的保护作用被引量：3
- 2014年
- 目的观察DNA聚合酶β抑制剂齐墩果酸对帕金森病小鼠模型的保护作用。方法利用MPTP腹腔注射法制作小鼠帕金森病模型,在MPTP注射前后分别给予DNA聚合酶β抑制剂齐墩果酸干预,用免疫组织化学染色法检测小鼠中脑酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元,免疫印迹法检测中脑腹侧TH蛋白和活化的Caspase-3表达水平,HPLC法检测纹状体中多巴胺及其代谢产物的水平。结果小鼠腹腔注射MPTP后出现行为学异常,中脑黑质多巴胺能神经元损伤,中脑腹侧TH表达降低,活化的caspase-3水平增高,同时纹状体多巴胺及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)水平降低。齐墩果酸干预能够显著改善小鼠的行为学评分,增加黑质多巴胺能神经元数量,抑制caspase-3活化,并增加纹状体多巴胺和DOPAC水平。结论齐墩果酸可能对帕金森病小鼠多巴胺能神经元具有保护作用。
- 张振涛王洪财张国新胡丹熊婧张兆辉
- 关键词：DNA聚合酶Β齐墩果酸帕金森病多巴胺能神经元
- 钙蛋白酶通过降解突触蛋白Ⅰ介导脑出血后继发性神经元损伤被引量：3
- 2014年
- 目的观察钙蛋白酶在实验性脑出血后继发性神经元损伤中的作用及其机制。方法脑内注射自体血液法制作小鼠脑出血模型,将10周龄雄性C57BL/6J小鼠实验动物随机分为4组:0 h组(对照组)、2 h组、12 h组和24 h组,每组10只小鼠。收集血肿周围脑组织后检测血肿周围组织钙蛋白酶活性水平,免疫印迹法检测突触蛋白Ⅰ表达水平。重组的突触蛋白Ⅰ与钙蛋白酶共孵育后检测其降解过程,并观察钙蛋白酶抑制剂ALLN和MDL28170的作用。在体外培养的神经元样大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)中加入钙蛋白酶,观察其细胞损伤作用和对突触蛋白Ⅰ的降解。结果脑出血后2 h血肿周围脑组织钙蛋白酶活性升高,至24 h达到高峰。脑出血0 h、2 h、12 h和24 h后钙蛋白酶活性读数分别为234.32、343.87、425.29和597.36,12 h组和24 h组与对照组相比差异具有显著性(P<0.05)。同时突触蛋白Ⅰ水平逐渐降低,提示其降解。至血肿形成后24 h下降到对照组的67.00%(P<0.01)。纯化的重组突触蛋白Ⅰ与钙蛋白酶共孵育后出现降解,孵育30 min后突触蛋白Ⅰ含量下降至对照组(0 h组)的57.75%(P=0.001),在钙蛋白酶抑制剂ALLN(50μmol/L)和MDL28170(10μmol/L)存在的情况下,突触蛋白Ⅰ水平分别为对照组的87.00%和84.75%(与单纯钙蛋白酶处理组30 min组相比,P<0.05)。外源性钙蛋白酶与PC12细胞共孵育12 h后细胞活力下降到对照组的58.25%(P<0.01),而ALLN和MDL28170处理组细胞活力升高到对照组的83.00%和80.25%(与单纯钙蛋白酶处理组相比,P<0.01)。结论钙蛋白酶通过降解突触蛋白Ⅰ参与脑出血后的继发性神经损伤,有可能成为脑出血的治疗靶点。
- 张振涛张国新王洪财熊婧胡丹张兆辉
- 关键词：钙蛋白酶脑出血
- 甲氰菊酯联合多巴胺对小鼠多巴胺能神经通路的影响
- 2017年
- 目的观察甲氰菊酯(Fenpropathrin,Fen)单独腹腔注射及与多巴胺(Dopamine,DA)立体定向注射联合使用对C57BL小鼠黑质纹状体多巴胺能神经通路的影响。方法分别采用Fen腹腔注射、DA立体定向注射至纹状体及DA预处理联合Fen注射建立C57BL小鼠模型,观察小鼠行为学变化,HPLC检测脑组织内Fen的含量;激光共聚焦显微镜观察小鼠的黑质多巴胺能神经元及纹状体的TH染色。结果 Fen及DA分别单独使用及DA预处理联合Fen注射均造成小鼠自主活动能力减少,HPLC检测显示小鼠脑组织中Fen的浓度与腹腔Fen给药浓度成正比,TH染色发现Fen连续使用7 d和DA立体定向注射后第7 d的小鼠黑质均出现神经元中TH表达不均一,并且纹状体出现斑片状的TH染色丢失,其中DA预处理后使用Fen注射7d组改变最明显。结论 Fen能够透过小鼠血脑屏障,可以直接作用于小鼠黑质纹状体多巴胺能系统,并且可以明显增强DA对黑质纹状体的损伤作用。
- 熊婧胡丹张振涛张兆辉
- 关键词：甲氰菊酯帕金森病多巴胺酪氨酸羟化酶
- 高迁移率族蛋白1在鱼藤酮诱导的多巴胺能神经细胞损伤中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的:观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)在鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)细胞模型中的作用,探讨HMGB1在PD发病机制中的作用。方法:使用鱼藤酮作用于SH-SY5Y细胞建立PD细胞模型;免疫荧光染色观察细胞内HMGB1、α-synuclein及微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达及定位;免疫印迹法检测不同浓度鱼藤酮作用下及siRNA-HMGB1干扰HMGB1后HMGB1、LC3Ⅱ/Ⅰ、自噬底物P62及Toll样受体4(TLR4)的表达水平;通过雷帕霉素(Rap)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别激活或抑制自噬,实时荧光定量PCR检测HMGB1的mRNA转录水平。结果:在PD细胞模型中,HMGB1出现胞浆转位,并与胞浆中α-synuclein及LC3颗粒样聚集物共定位;随着鱼藤酮浓度增加,HMGB1蛋白表达上调,伴有LC3II/I比例增高、P62及TLR4蛋白水平降低;Rap和3-MA分别激活或抑制自噬可引起HMGB1 mRNA的转录水平相应增加或降低;干扰HMGB1表达可抑制自噬的激活。结论:胞浆转位的HMGB1通过作用于自噬溶酶体途径参与PD的发病,可能是PD治疗的新靶点。
- 熊婧陈真真张兆辉
- 关键词：高迁移率族蛋白1
- 通过互联网情景教学提高医学生在神经内科临床实习质量的探讨被引量：2
- 2017年
- 神经病学艰深繁多,难于理解掌握,如何培养一名合格的神经病学实习生是教学医院必须面对的难题。当前临床教学医院病患多,医生和床位少,教学任务重,医患关系紧张,都制约临床实习教学的有效开展。随着网络的普及,网络平台被广泛应用教学改革中。本文旨在探讨临床实习教学和网络平台相结合,实现医疗活动的情景化,从而提高医学生在神经内科的实习质量。
- 胡丹熊婧彭勃张兆辉
- 关键词：神经病学情景教学网络平台
