汪艳华
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:广西大学化学化工学院更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程更多>>
- 产碱杆菌DN25中降氰酶的分离纯化及生化特性被引量:2
- 2012年
- 以一株可降氰的产碱杆菌DN25为酶来源,通过超滤、30 mg/mL硫酸鱼精蛋白沉淀、30%~70%硫酸铵盐析和Phenyl-Toyopearl 650M疏水层析等步骤,获得比活力为44 U/mg的纯化酶制剂.在确定酶浓度、反应时间等氰降解活力测定条件后开展酶学性质研究,试图为将来氰降解代谢机理的深入研究和菌株的基因工程改造提供理论基础.研究结果表明,此纯化酶催化氰化物水解的最适pH值为8.0,最适温度为30℃.该酶在pH 7.0~8.0区域稳定,而在pH>9时会很快失活;在30℃保存10 h,酶活力保持稳定,高于60℃,酶快速失活.加入甘氨酸稳定剂,在60℃下保存20 min酶活仍可保留19.6%.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.11 mmol/L,最大反应速率Vmax为0.23 mmolL-1min-1.
- 汪艳华刘幽燕唐爱星李青云王顺成
- 关键词:分离纯化酶特性氰化物
- 产碱杆菌DN25氰降解酶法机理研究
- 本文利用实验室分离保藏的一株具有高效降氰活性的产碱杆菌Alcaligenes sp.DN25,通过分析分别以氰化钾、甲酰胺为底物的降解产物和文献报道[1]的F-、Pb2+、Hg2+、N3-对其降氰活力的影响来确定其降解途...
- 汪艳华刘幽燕王顺成董园李青云童张法覃益民许建和
- 关键词:产酶条件优化
- 文献传递
- 产碱杆菌DN25纯化降氰酶稳定剂的选择
- 2013年
- 向产碱杆菌(Alcaligenes sp.)DN25的纯化降氰酶中分别添加不同浓度的多元醇类、金属离子类、糖类、防腐剂类等添加剂,研究不同种类、不同浓度的添加剂对降氰酶稳定性的影响,优选可以提高降氰酶稳定性的添加剂。结果表明:外加添加剂甘油浓度为1.5%(m/V)时,酶活保留率为5.4%;[NH4]2SO4浓度为4%(m/V)时,酶活保留率为5%;淀粉浓度为6%(m/V)时,酶活保留率为14.3%;甘氨酸浓度为3%(m/V)时,活力酶活保留率为19.6%。甘氨酸对产碱杆菌DN25降氰酶具有最强的保护作用。
- 汪艳华刘幽燕李青云唐爱星王顺成甘雨
- 关键词:稳定剂酶活
- 产碱杆菌DN25降氰酶产酶条件初步优化被引量:1
- 2010年
- 以实验室保藏的一株具有高效降氰活性的菌株Alcaligenes sp. DN25为研究对象,通过分析其降解产物,发现终产物中存在甲酸,初步判断此菌株降氰反应为氰水解途径。在培养基中添加KCN来考察底物对菌体产酶的诱导作用,结果发现菌体的活力没有提高,表明菌株DN25所产降氰酶应为组成型酶。在培养基中添加4种金属离子和4种含硫物质,其中微量金属离子对菌体的生长和活性均有抑制;Na2SO4和Na2S2O3对菌体生长和产酶均无明显影响;DL-半胱氨酸对菌体产酶有明显促进作用,DL-甲硫氨酸可同时提高菌体的生长量和产酶水平,从而提高发酵液比活力。研究结果为降氰酶的大量获得以及酶制剂在氰污染治理方面的应用研究奠定了基础。
- 王顺成刘幽燕汪艳华李青云
- 关键词:降解途径
- 来源于产碱杆菌DN25的降氰酶纯化及酶学性质研究
- 环境污染已成为当今社会的关注热点,生物技术在污染治理中可起到积极作用。分离纯化获得具有解毒作用的微生物酶并阐明毒物降解过程和机理是环境微生物研究的一个重要领域,在此基础上可进一步了解基因功能和生物学信息。本论文利用实验室...
- 汪艳华
- 关键词:降解机理分离纯化酶学特性
- 文献传递