甘雨
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 产碱杆菌DN25纯化降氰酶稳定剂的选择
- 2013年
- 向产碱杆菌(Alcaligenes sp.)DN25的纯化降氰酶中分别添加不同浓度的多元醇类、金属离子类、糖类、防腐剂类等添加剂,研究不同种类、不同浓度的添加剂对降氰酶稳定性的影响,优选可以提高降氰酶稳定性的添加剂。结果表明:外加添加剂甘油浓度为1.5%(m/V)时,酶活保留率为5.4%;[NH4]2SO4浓度为4%(m/V)时,酶活保留率为5%;淀粉浓度为6%(m/V)时,酶活保留率为14.3%;甘氨酸浓度为3%(m/V)时,活力酶活保留率为19.6%。甘氨酸对产碱杆菌DN25降氰酶具有最强的保护作用。
- 汪艳华刘幽燕李青云唐爱星王顺成甘雨
- 关键词：稳定剂酶活
- 重组大肠杆菌表达降氰酶的诱导条件优化被引量：3
- 2014年
- 采用积分光密度法对产碱杆菌(Alcaligenes sp.)降氰酶基因在大肠杆菌中的高效表达进行了诱导条件优化,以工程菌BL21(DE3)-pET28a-cdE的诱导表达条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和活性。结果显示,重组菌表达降氰酶的最佳诱导条件为温度28℃,初始菌体浓度OD600值为0.6,IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导时间12h。研究发现,诱导剂的添加浓度对外源蛋白的表达水平具有显著影响,使用终浓度为0.8mmol/L的IPTG,诱导表达12h,降氰酶蛋白收率达到143.27mg/L,比活力达到11560 U/mg。与不添加诱导剂相比,重组蛋白的收率和比活力分别提高了64倍和9倍。
- 陈焕基李青云尹业兴刘幽燕甘雨
- 关键词：重组大肠杆菌
