张传海
- 作品数:20 被引量:64H指数:5
- 供职机构:皖西学院生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- K562细胞nm23-H1基因沉默对其向巨核细胞分化的影响被引量:1
- 2008年
- 目的探讨nm23-H1沉默对K562细胞向巨核细胞分化的影响。方法采用Lipo-fectamine2000将靶向nm23-H1基因的RNA干扰质粒pSilencer^TM 4.1-CMV-sinm23及空质粒转染K562细胞,经G418筛选建立该基因稳定下调的K562细胞(K562-sinm23细胞)及空质粒转染K562细胞(K562-siNC细胞),实时定量PCR、免疫组织化学、蛋白印迹反应等方法证实了nm23基因沉默细胞构建成功。NBT还原比色试验检测细胞分化能力。流式细胞术检测在诱导剂佛波酯作用下K562-sinm23细胞表面巨核细胞分化抗原GPⅡb-Ⅲa(CD41)的表达。蛋白印迹法检测细胞在佛波酯诱导后ERK1/2磷酸化活性。结果与K562细胞和K562-siNC细胞比较,pSilencer^TM 4.1-CMV-sinm23能够沉默内源性nm23-H1 mRNA的表达,基因水平和蛋白水平的沉默效率分别达到75%和70%。经佛波酯诱导,与K562-siNC细胞比较K562-sinm细胞的分化能力明显增强(NBT还原能力A值分别为0.23±0.05和0.31±0.07)。nm23-H1基因调控K562细胞向巨核细胞分化与ERK1/2磷酸化活性增强有关。结论成功构建了nm23-H1基因稳定下调表达的K562细胞株,并且证明nm23-H1参与了K562细胞向巨核细胞系的分化。
- 金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞
- 关键词:基因NM23-H1K562细胞细胞分化RNA干扰
- SARS灭活试验疫苗免疫小鼠后CD4^+与CD8^+ T细胞动态变化
- 2003年
- 熊盛王一飞刘新建张美英张传海刘石生冉延超杨红宇李久香陆家海万卓越鄢心革郑焕英顾为望
- 关键词:SARS严重急性呼吸综合症CD4^+T细胞CD8^+T细胞
- 沉香(Aquilaria agollocha)(印度沉香)根离体培养生产沉香药材的方法研究
- 戚树源胡兰娟何梦铃张传海
- 沉香是沉香属植物中含有酯类物质的木材,是最珍贵的非材质森林产品之一。沉香的国内外市场价格不断上涨,奇货可居,供不应求。但是,到目前为止沉香的形成机理仍不清楚,沉香的生产仍处在无序状态,沉香属植物的林木不断受到人为的破坏,...
- 关键词:
- 新西兰兔对SARS-CoV实验灭活疫苗的体液免疫应答
- 2006年
- 目的:评价SARS-CoV广东F69分离株实验灭活疫苗的免疫效果。方法:病毒悬液经0·4%甲醛灭活后作为抗原,对新西兰兔进行免疫接种;采用ELISA法和微量细胞中和试验,检测血清特异性IgG抗体和中和抗体的消长规律。结果:初次免疫后第3天,即能检测到抗SARS-CoV特异性抗体,第7天检测到中和抗体。二次免疫后,特异性IgG抗体和中和抗体效价于第6周左右分别达到1∶81920和1∶20480的峰值水平。继续加强免疫,特异性抗体水平无明显变化。F69分离株与Z2-Y3广东分离株之间能够完全交叉中和。结论:F69毒株实验灭活疫苗具有很强的免疫原性。F69与Z2-Y3毒株之间尽管存在基因序列差异,但能够完全交叉免疫保护。
- 张传海郭中敏郑焕英陆家海王一飞赵勇杜雄伟张美英
- 关键词:SARS-COV灭活疫苗免疫原性中和抗体
- 灭活SARS病毒的免疫原性的实验研究被引量:1
- 2004年
- 研究灭活SARS病毒的免疫原性。SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,加入氢氧化铝佐剂 ,以 3种剂量接种BALB/c小鼠 ,定时采血 ,测定特异性抗体的滴度及其中和活性 ,同时用化学发光酶联免疫法测定抗血清与SARS病毒结构蛋白的反应特异性及其相对强度。结果发现 ,小鼠接种疫苗 4d后 ,血清中可检测到IgM抗体 ,直至 2 6d后逐渐下降 ;IgG抗体在初次免疫 8d后出现 ,4 7d时达最高峰 ,6 3d后进入稳定期 ;不同剂量组的抗体滴度具有明显剂效关系 ,低剂量组和中剂量组滴度峰值为 1∶192 0 0 ,高剂量组滴度峰值为 1∶384 0 0。中和实验结果表明 ,小鼠所产生的抗体具有中和病毒活性 ,在 6 3d时 ,低剂量组和中剂量组血清的中和效价为 1∶12 80 ,高剂量组血清的中和效价为 1∶5 12 0。抗体分类结果表明 ,小鼠抗血清中含有针对多种SARS病毒结构蛋白的特异性抗体 ,其中 ,针对N蛋白、S4蛋白和S2蛋白的抗体水平相对较高 ,而抗M抗体、抗 3CL抗体的水平相对较低。上述结果说明 ,SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,各主要结构蛋白仍保持较强免疫原性 ;免疫小鼠后 ,可以诱导产生高滴度的特异性混合抗体 。
- 熊盛王一飞张庶民陆家海孟民杰张美英刘新建张传海刘石生李久香万卓越郑焕英鄢心革
- 关键词:SARS病毒灭活IGG
- SARS及其病原体研究进展被引量:11
- 2003年
- 严重急性呼吸道综合症(SARS)的病原体已被认定为一种新的冠状病毒—SARS冠状病毒。关于SARS冠状病毒的基因组和蛋白组研究也已取得重要进展,这为探索SARS病毒的来源与进化、研制SARS诊断试剂、开发SARS疫苗和治疗药物奠定了坚实基础。本文对严重急性呼吸道综合症病原学研究取得的一些进展进行了综述。
- 张传海王一飞张美英戚树源
- 关键词:SARS非典型肺炎冠状病毒病原体
- 灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠脏器影响的实验研究被引量:3
- 2004年
- 目的 :探讨灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠是否有损伤作用。方法 :用灭活SARS冠状病毒分别免疫BALB/c和C5 7BL/ 6小鼠 ;ELISA法检测小鼠血清中抗SARS冠状病毒抗体水平 ;免疫 8周后取小鼠各脏器 ,观察其病理形态学改变。结果 :免疫 8d后 ,小鼠血清中就可检测到特异的IgM、IgG抗体 ;组织切片染色观察 ,可见少数小鼠肺及肝组织出现轻度损伤 ,其他脏器未见病变。结论 :SARS冠状病毒灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体 ,同时没有造成严重的器官损伤。
- 杜彬钟雪云熊盛张传海刘新建刘石生张美英李久香王一飞陆家海万卓越鄢心革郑焕英范江林
- 关键词:严重急性呼吸综合征冠状病毒灭活小鼠
- 皖西食用百合茎尖脱毒培养被引量:2
- 2013年
- 选取食用百合卷丹的鳞茎作为外植体,以MS为基本培养基,分热处理和非热处理两组进行茎尖离体培养,探讨不同植物激素组合对不定芽的诱导发生、继代增殖以及诱导生根的影响。结果表明,两个实验组皆以6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L的激素组合对于不定芽的分化发生为优,热处理组的芽诱导率和不定芽平均分化量分别为88.9%和4.5个,未热处理组的分别为87.5%和4.9个;不定芽增殖培养的最佳激素组合为6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增殖系数为4.20;不定芽诱导生根的最佳激素组合为6-BA 0.2mg/L+NAA 1.0mg/L。
- 张传海孙传伯谢升旺王维杰唐文娟程梦思
- 关键词:卷丹百合鳞茎茎尖脱毒培养
- Nm23-H1基因沉默后K562细胞中肿瘤相关基因的差异表达
- 2010年
- 目的:应用基因芯片技术,检测nm23-H1基因沉默后K562细胞中与肿瘤相关基因的差异表达情况,探讨nm23-H1基因沉默对K562细胞生物学行为变化的分子作用机制。方法:采用Trizol一步法抽提K562-siNM23细胞和K562-siNC细胞总RNA;用RNA扩增试剂盒进行双链cDNA的合成及荧光标记cRNA的合成,并纯化cRNA。与功能分类基因芯片杂交反应后,用计算机分析比较2种细胞中与肿瘤相关基因的差异性表达。结果:共筛选出表达差异性基因14个,其中表达上调基因9个(ratio>2);表达下调基因5个(ratio<0.5)。结论:nm23-H1基因沉默后,引起显著变化的基因与细胞周期调控和抗凋亡信号转导等生物学功能相关。
- 刘慧金琳张传海熊盛刘秋英王一飞
- 关键词:NM23-H1基因
- RNA干扰建立的nm23-H1基因沉默K562细胞模型及其生物学特点
- <正>引言:nm23-H1基因的高表达与肿瘤转移呈负相关性;相反,在恶性血液病中,nm23-H1的高表达则提示病情的恶化。目前尚未见国内外关于 nm23-H1基因与 K562细胞分化机制的报道。为了探索二者的关系,我们通...
- 金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞
- 文献传递