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张美英: 作品数：123 被引量：591H指数：14; 供职机构：暨南大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>

合作作者

人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用被引量：2: 2007年; 目的:快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA,为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法:应用RT-PCR扩增人HSV-1F株UL40基因,将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质粒共转染Vero细胞,通过观察绿色荧光蛋白报告基因的表达筛选高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。结果:倒置荧光显微镜观察发现设计的4对siRNA中siRNA3和siRNA4能明显降低绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测证明siRNA3和siRNA4对目的基因沉默效率分别达到76.99%和84.00%。结论:成功构建了人HSV-1 UL40基因融合表达载体pEGFP-N1-UL40,并利用该载体筛选出2对高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。; 任哲张美英王一飞朱钦昌张春龙陆大祥胡巢凤李久香张佩琢杨志荣; 关键词：SIRNA

兔抗SARS冠状病毒IgG的纯化及鉴定被引量：3: 2005年; 目的:制备高纯度的兔抗SARS冠状病毒的IgG。方法:采用辛酸-硫酸铵沉淀进行初纯,以及DEAE离子交换层析精纯IgG,利用SDS-PAGE对纯化后的IgG纯度进行测定,利用间接ELISA、病毒中和滴定对IgG进行效价测定。结果:纯化后的IgG相对纯度达到90%以上,ELISA检测效价为1∶4 800,病毒中和效价为1∶640。结论:利用上述纯化工艺能获得高纯度的兔抗SARS冠状病毒IgG,同时抗体活性损失较小。; 钱垂文王一飞陆家海熊盛张美英刘新建李久香; 关键词：严重急性呼吸综合症免疫球蛋白G 纯化

SARS及其病原体研究进展被引量：11: 2003年; 严重急性呼吸道综合症(SARS)的病原体已被认定为一种新的冠状病毒—SARS冠状病毒。关于SARS冠状病毒的基因组和蛋白组研究也已取得重要进展,这为探索SARS病毒的来源与进化、研制SARS诊断试剂、开发SARS疫苗和治疗药物奠定了坚实基础。本文对严重急性呼吸道综合症病原学研究取得的一些进展进行了综述。; 张传海王一飞张美英戚树源; 关键词：SARS 非典型肺炎冠状病毒病原体

灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠脏器影响的实验研究被引量：3: 2004年; 目的 :探讨灭活SARS冠状病毒疫苗对小鼠是否有损伤作用。方法 :用灭活SARS冠状病毒分别免疫BALB/c和C5 7BL/ 6小鼠 ;ELISA法检测小鼠血清中抗SARS冠状病毒抗体水平 ;免疫 8周后取小鼠各脏器 ,观察其病理形态学改变。结果 :免疫 8d后 ,小鼠血清中就可检测到特异的IgM、IgG抗体 ;组织切片染色观察 ,可见少数小鼠肺及肝组织出现轻度损伤 ,其他脏器未见病变。结论 :SARS冠状病毒灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性抗体 ,同时没有造成严重的器官损伤。; 杜彬钟雪云熊盛张传海刘新建刘石生张美英李久香王一飞陆家海万卓越鄢心革郑焕英范江林; 关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒灭活小鼠

RNA干扰建立的nm23-H1基因沉默K562细胞模型及其生物学特点: ＜正＞引言:nm23-H1基因的高表达与肿瘤转移呈负相关性;相反,在恶性血液病中,nm23-H1的高表达则提示病情的恶化。目前尚未见国内外关于 nm23-H1基因与 K562细胞分化机制的报道。为了探索二者的关系,我们通...; 金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞; 文献传递

pQE-hbFGF表达系统的构建及其蛋白质的表达和纯化: 2005年; 目的　构建pQE hishbFGF表达载体 ,通过一步纯化得到 6×HishbFGF蛋白质。方法　用PCR扩增目的基因hbFGF ,连接到pQE4 0载体上 ,转化到Top10菌株筛选重组子 ,经测序后将质粒转化到表达菌M15上 ,经IPTG诱导表达 ,超声波破菌后通过镍离子螯合层析一步纯化得 6×HishbFGF蛋白质 ,ELISA鉴定产物 ,用MTT法检测产物促细胞增殖的生物活性。结果　hbFGF基因插入pQE载体中 ,在M15中 6×HishbFGF的表达量达到 2 0 % ,且为可溶性表达。经一步纯化后得到N端带 6个组氨酸的hbFGF蛋白 ,纯度为 96 % ,6×HishbFGF具有免疫原性及促进NIH3T3细胞增殖的活性。结论　 6×HishbFGF蛋白质在M15中可溶性地高效表达 ,并经一步亲和层析得到纯度高活性高的产物 ,降低了生产成本。; 刘秋英王一飞熊盛胡红梅钱垂文张美英冉延超袁茵吴志聪; 关键词：人碱性成纤维细胞生长因子可溶性表达

人重组核苷二磷酸激酶α亚基对MCF-7/S的影响被引量：2: 2003年; 软琼脂集落形成实验检测rhNDPK -α对乳腺癌细胞株MCF - 7 S集落形成率的影响 ,结果表明 ,MCF - 7 S集落形成率随rhNDPK -α浓度增高下降 ,提示rhNDPK -α可能具有抑制乳腺癌细胞株MCF - 7 S转移作用 ;MTT法检测rhNDPK -α分别联用丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱对MCF - 7 S的增殖影响 ,结果显示 ,rhNDPK -α分别联用三种化疗物与这三种化疗药物单独作用于MCF - 7 S无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示rhNDPK -α对丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱没有增敏作用。; 苏运贞王一飞张美英邢少璟钱垂文罗勇李久香熊盛黄立; 关键词：Α亚基乳腺癌细胞株增敏作用化疗药物

50L规模中试发酵重组核苷二磷酸激酶A工程菌: 规模生产重组人核苷二磷酸激酶A(rhNDPK-A).摇瓶培养一级种子至OD600为5.0～5.5，以10％比例接种二级种子培养基，在7L发酵罐中培养至OD600为9.6～10.5，然后转入80L发酵罐中进行补料分批培养，...; 熊盛钱垂文黄立刘秋英张美英王一飞; 关键词：核苷二磷酸激酶 DNA重组中试规模发酵条件