唐薇薇
- 作品数：13 被引量：26H指数：3
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- pGPU6-GFP-survivin-shRNA表达载体的构建及其对卵巢癌HO8910PM细胞凋亡作用的探讨
- 背景与目的:近年来,人们对肿瘤的研究逐步向分子领域延伸,以期通过基因治疗达到治愈肿瘤的目的。细胞凋亡调控的紊乱是肿瘤发生、发展的一个重要环节,其中凋亡抑制蛋白家族/(Inhibitor of apoptosisprote...
- 唐薇薇
- 关键词：真核表达载体RNAI卵巢癌凋亡
- 文献传递
- RNA干扰survivin对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰survivin基因对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响。方法实验分3个组:siRNA组,采用脂质体法将靶向survivin siRNA荧光真核表达质粒载体pGPU6-GFP-survivin-shRNA转染卵巢癌HO-8910PM细胞;空白对照组,单纯细胞培养;阴性对照组,用表达与survivin序列无同源性的siRNA片段质粒pGPU6-GFP-NC转染细胞。于转染后48 h和72 h,用PI单染法流式细胞术检测各组HO-8910PM细胞周期的变化以及Western blot检测survivin蛋白的表达情况。结果 PI单染流式细胞仪检测细胞周期结果表明,与空白对照组和阴性对照组相比较,2个时间点siRNA组转染后的G0/G1期细胞比例明显增加,而G2/M期细胞比例均下降(P<0.05);Western blot结果证实,siRNA组的HO-8910PM细胞survivin蛋白的表达量明显下调。结论导入survivin基因特异性的siRNA可导致卵巢癌HO-8910PM细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞增殖受阻,且细胞survivin蛋白表达量下降。
- 唐薇薇郑洪
- 关键词：卵巢癌SURVIVIN细胞周期
- siRNA抑制X连锁凋亡抑制蛋白基因对人HeLa细胞凋亡及周期的影响被引量：3
- 2016年
- 目的：探讨特异性 siRNA 对宫颈癌 Hela 细胞 X 连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）基因的抑制作用及其抑制后细胞凋亡和细胞周期的变化。方法设计合成 XIAP 特异性抑制 siRNA，并将 Hela 细胞分成4组，即观察组（pG-PU6／GFP／Neo ／XIAP -siRNA 转染细胞）、空白组（未加 siRNA 及转染试剂）、NC 组（阴性对照，为所选目的序列被无序打乱的 siRNA 转染）、Mock 组（转染试剂对照，加转染试剂未加 siRNA）。RT-PCR 法检测各组 XIAP mRNA 表达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及细胞周期变化。结果转染48、72 h，观察组 XIAP mRNA 表达分别为20．20±0．10、19．99±0．14，空白组分别为21．43±0．04、20．95±0．15，两组比较均有统计学差异（P 均＜0．05）。转染48 h，观察组、空白组细胞凋亡率分别为（28．91±0．12）％、（9．73±0．02）％；转染72h，观察组、空白组细胞凋亡率分别为（37．29±0．10）％、（10．62±0．04）％；观察组细胞凋亡率均高于空白组（P 均＜0．05）。空白组、Mock组、NC 组间 XIAP mRNA 表达、细胞凋亡率比较均无统计学差异（P 均＞0．05）。与空白组相比，观察组转染48、72 h 后 G0～G1期细胞增多而 S 期细胞减少（P 均＜0．05）。结论特异性 XIAP-siRNA 可有效沉默宫颈癌 Hela 细胞XIAP 基因，抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
- 唐薇薇郑洪厉国慧王琳琳
- 关键词：HELA细胞X连锁凋亡抑制蛋白
- 一种小动物手术操作台
- 本实用新型公开了一种小动物手术操作台，属于实验器具领域，包含手术板和五组螺钉组件，手术板上还设有较小的内嵌手术板。螺钉组件包含螺钉和螺钉套，螺钉上设有穿线孔，螺钉组件通过滑槽安装在手术板上。通过螺钉锁紧压迫捆绑小动物线束...
- 刘佳云李丽娟陈晓燕徐海燕唐薇薇卢癸凤王贤燕
- 文献传递
- 同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞CTCF表达的影响
- 2010年
- 目的以动脉粥样硬化(AS)的独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)处理人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),观察Hcy对VSMCs多价核因子CTCF表达的影响,探讨Hcy致AS发病的可能机制。方法 将培养的VSMCs分为0、50、100、200、500及1000 mol/L Hcy处理组,以0 mol/L Hcy组为空白对照。在VSMCs覆盖瓶底70%时,将不同浓度的Hcy加入培养液,继续培养VSMCs 48 h,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学方法分别检测VSMCsCTCF的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,Hcy刺激48h后,VSMCs CTCF的mRNA和蛋白表达皆明显增加,以高浓度组为著(500、1000 mol/LHcy,<0.05)。CTCF免疫组织化学阳性染色以细胞核为主。结论 Hcy升高可诱导VSMCs CTCF的表达上调。
- 李丽娟徐海燕唐薇薇刘佳云张冬
- 关键词：同型半胱氨酸血管平滑肌细胞CTCF动脉粥样硬化DNA甲基化
- RNAi双向沉默Survivin和XIAP基因对卵巢癌细胞A2780-cp凋亡及顺铂敏感性影响的观察被引量：3
- 2011年
- 目的:运用RNA干扰技术双向沉默卵巢癌耐顺铂细胞株A2780-cp的Survivin和XIAP基因后,观察细胞的凋亡及对顺铂敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将化学合成的Survivin-siRNA和XIAP-siRNA,共同或单独转染到卵巢癌耐药细胞株A2780-cp中,未转染组作为阴性对照;流式细胞术(FCM)检测转染细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测Survivin和XIAP基因的蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞对顺铂的敏感性及其增殖情况。结果:转染48 h后,单独和共同转染组与对照组相比可见明显的细胞凋亡形态学变化,共转染组凋亡率为26.98%,高于单转Survivin-siRNA组(12.82%)和单转XIAP-siRNA组(11.18%)。蛋白质印迹法结果显示,共转染组Survivin和XIAP的蛋白抑制率分别为71.11%和76.81%,单转染组Survivin和XIAP蛋白抑制率分别为75.00%和82.48%,与其他对照组比较差异有统计学意义,P<0.05;MTT结果显示,转染后细胞对顺铂敏感性增强,共转染组细胞生长活力下降明显,顺铂的IC50值为(0.10±0.01)μg/mL,与单转染组及脂质体转染组比较差异有统计学意义,P<0.05。结论:同时干扰Survivin基因和XIAP基因能更好的抑制卵巢癌耐药细胞株A2780-cp的生长,降低其耐药性,促进其凋亡。
- 黄佳佳吴兴龙郑洪张官嫦唐薇薇袁芳
- 同型半胱氨酸干扰胰岛素样生长因子2和H19的印迹表达及其与血管平滑肌细胞增殖的关系被引量：2
- 2010年
- 目的采用动脉粥样硬化的独立危险因子同型半胱氨酸刺激脐静脉血管平滑肌细胞,观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19表达的干扰作用,分析二者与血管平滑肌细胞增殖的关系及其在动脉粥样硬化发病中的可能作用。方法将培养的脐静脉血管平滑肌细胞分为0、50、100、200、500及1000μmol/L同型半胱氨酸组,以0μmol/L同型半胱氨酸组为空白对照组。用不同浓度的同型半胱氨酸刺激血管平滑肌细胞48 h后,MTT法检测血管平滑肌细胞的增殖水平;半定量逆转录聚合酶链反应法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19的mRNA表达水平,Western Blotting法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2的蛋白表达水平。结果与空白对照组相比较,同型半胱氨酸各浓度组血管平滑肌细胞的增殖活力明显增加,以高浓度(500及1 000μmol/L)组为著(P<0.05)。同时,同型半胱氨酸组血管平滑肌细胞H19的mRNA表达水平增加,500及1000μmol/L浓度组(0.548 6±0.063 3及0.733 3±0.049 6)明显高于空白对照组(0.202 2±0.012 4)(P<0.05);胰岛素样生长因子2的mRNA和蛋白表达均下降,尤以高浓度组为著,500及1 000μmol/L浓度组的mRNA(0.258 8±0.024 8及0.168 9±0.069 6)和蛋白(0.116 7±0.015 5及0.083 7±0.018 0)表达水平均明显低于空白对照组(0.515 8±0.018 9和0.244 3±0.042 3)(P<0.05)。结论同型半胱氨酸能干扰胰岛素样生长因子2和H19的表达,并可能进一步促进血管平滑肌细胞的增殖。
- 李丽娟杨艳徐海燕唐薇薇刘佳云王树人
- 关键词：同型半胱氨酸血管平滑肌细胞基因印迹胰岛素样生长因子2H19
- 急性胰腺炎大鼠胰腺组织cPKCα的变化被引量：1
- 2010年
- 目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺组织传统型蛋白激酶Cα(cPKCα)的水平,探讨其在AP发病中的可能作用。方法取26只SD大鼠随机分为2组:假手术(SO)组和AP组,采用牛磺脱氧胆酸钠复制AP模型,模型制成后1h、5h,采用免疫组织化学方法检测大鼠胰腺组织cPKCα的水平。结果与SO组相比较,AP组大鼠胰腺组织cPKCα阳性表达明显增高,增多的cPKCα主要聚集于细胞膜侧。结论 AP大鼠胰腺组织cPKCα的表达水平明显增高,活性增强,后者在AP的发病中可能发挥重要作用。
- 李丽娟刘敏张学晶杨艳唐薇薇徐海燕张冬
- 关键词：急性胰腺炎
- livin基因沉默对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:探讨小干扰RNA(small interfening RNA,siRNA)沉默livin基因对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响。方法:构建2个针对人源livin基因的siRNA表达质粒,并通过脂质体介导转染人恶性黑素瘤A375细胞株,利用荧光定量PCR检测livin mRNA的表达情况,AnnexinⅤ-PE FCM法检测A375细胞凋亡情况,PI单染FCM法检测细胞周期情况。结果:成功构建livin siRNA表达质粒,转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞中livin mRNA表达量较空白对照组分别下降17%和42%,72h分别下降71%和61%。转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞凋亡率(29.45%和33.25%)及72h细胞凋亡率(33.52%和38.18%)均高于空白组(7.95%和9.70%)(P<0.05)。siRNA-2可引起G0/G1期升高,S期下降(P<0.05),siRNA-1作用不明显(P>0.05)。结论:siRNA-1、2体外均能有效抑制livin mRNA的转录,促进人恶性黑素瘤A375细胞凋亡。siRNA-2表达质粒能使人恶性黑素瘤A375细胞周期出现G/G期阻滞,细胞增殖受到抑制。
- 王琳琳郑洪唐薇薇厉国慧安文波
- 关键词：黑色素瘤细胞周期基因LIVIN
- ASB-240U生物实验系统在机能实验教学中的应用
- 2010年
- 机能学实验的目的在于通过实验培养学生科学的思维方法．开拓创新的精神以及分析问题解决问题的能力^[1]。在实验课的过程中不可避免的要借助生物信号观测设备来观察正常或异常机体的功能，从而加深学生对所学理论知识的理解和认识^[2]。传统的设备如血压计、心电图仪、刺激器、示波器等种类繁多，
- 王曜晖魏玉陈小文徐海燕唐薇薇李丽娟姚宁
- 关键词：机能实验教学生物信号机能学实验心电图仪血压计
