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纳米PCR技术检测产肠毒素大肠杆菌耐热型肠毒素方法的建立及初步应用: :建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)耐热型肠毒素STa和STb的纳米PCR方法.方法:根据ETEC耐热型肠毒素STa和STb的基因序列,用Primer5.0软件设计2对特异性引物,优化得到最佳反应条件,并进行灵敏度和特...; 吴玉娟孔繁德徐淑菲王仍瑞; 关键词：动物检疫产肠毒素大肠杆菌

耐热型产肠毒素大肠杆菌检测方法的建立及应用: 2014年; 为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)耐热型肠毒素STa和STb的纳米金PCR方法,根据ETEC耐热型肠毒素STa和STb的基因序列,用Primer 5.0软件设计了2对特异性引物,优化得到最佳反应条件,并进行灵敏度和特异性的测试.实验结果表明:本文所建立的体系均能扩增到目的条带,灵敏度为47.5 cfu/mL,且特异性良好;所建立的纳米金PCR方法在人工染菌实验中也获得了较高的灵敏度和特异性.; 吴玉娟孔繁德徐淑菲王仍瑞; 关键词：ETEC

台湾输入甲鱼中检出O1群霍乱弧菌被引量：1: 2014年; 将甲鱼体表涂抹物在碱性蛋白胨水中进行增菌培养,分离单菌落后分别用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、血清学方法及PCR进行鉴定,结果从台湾输入大陆的甲鱼中检出O1群稻叶型霍乱弧菌一株,不含ctx基因和toxR基因。为此,应加强水产品尤其是甲鱼的监测工作,防止霍乱弧菌在不同地区间的传播和流行。; 吴玉娟孔繁德徐淑菲叶妍妍龚艳清王仍瑞; 关键词：甲鱼霍乱弧菌

荧光定量PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用: 根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计了1对特异性引物,建立了副溶血弧菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,进行了标准曲线的建立,并对所建立方法进行了特异性和灵敏度测试。结果表明所...; 孔繁德吴玉娟黄新新黄标敏彭小莉徐淑菲林立; 关键词：微生物检测副溶血弧菌荧光定量PCR法; 文献传递

MALDI-TOF-MS在鉴定进口甲鱼卵病原菌中的应用被引量：1: 2014年; 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)仪器和Biotyper分析软件对台湾进口的甲鱼卵进行携带病原菌的检测。方法选用合适的培养基对进境甲鱼卵进行细菌分离培养,选取可疑菌株,纯化后接种肉汤培养,然后按照MALDI-TOF-MS要求进行样品制备,点靶并获取样品质谱图,并运用Biotyper分析软件对所获取的质谱图进行分析。同时用全自动微生物鉴定系统进行辅助分析鉴定。结果应用MALDITOF-MS方法从台湾输入大陆的73批甲鱼卵中分离出绿脓杆菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯氏菌、霍乱弧菌、沙门氏菌等25个属49个种242株致病菌,其中大部分是对人和动物的条件致病菌。结论当前进境甲鱼卵携带病原菌形势严峻,需引起进出口商、检验机构及其他相关部门重视。本研究对规范甲鱼卵贸易、保障人民健康都有着重要的作用。; 徐淑菲吴玉娟孔繁德赵冉彭小莉叶妍妍陈信忠; 关键词：甲鱼卵 MALDI-TOF-MS 病原菌

荧光定量PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用: 2013年; 目的:建立副溶血弧菌SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。方法:根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计了1对特异性引物,进行了最佳引物浓度的确定,建立了标准曲线和溶解曲线,对所建立方法进行了特异性、灵敏度和稳定性测试,并进行了临床样本检测。结果:副溶血弧菌SYBR Green I荧光定量PCR的最佳引物浓度为0.2 µmol/L,标准曲线循环阈值和模板浓度呈良好的线性关系,相关系数R2为0.996,扩增效率E接近100%,溶解曲线特异,最低检出量为2.14个拷贝,特异性和重复性较好。临床检测结果与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。结论:建立了特异灵敏的副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法,对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。; 孔繁德吴玉娟黄新新黄标敏彭小莉徐淑菲林立; 关键词：副溶血弧菌荧光定量PCR

台湾进口甲鱼蛋的检疫及风险评估: 甲鱼是一种具有很高的营养价值和药用价值的水产品，大陆用于种苗孵化的甲鱼蛋主要来自台湾。现阶段国内关于甲鱼蛋携带病原菌的普查较少，进口甲鱼蛋中检出霍乱弧菌的报道时有发生，台湾也发生过食用甲鱼蛋引起食物中毒事件。因此，本研究...; 吴玉娟; 关键词：病原菌 MALDI-TOF-MS 风险评估; 文献传递

厦门市售甲鱼蛋携带病原菌情况初步调查: 2014年; 目的:了解厦门市售甲鱼蛋携带病原菌情况。方法:按照病原菌的检测标准进行分离培养,获得纯培养物后,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合相应的诊断血清及PCR方法进行鉴定。结果:自7批厦门市售甲鱼蛋中分离到了16个属26种共76株细菌,甲鱼蛋带菌率为100%,多重带菌情况严重。结论:该次甲鱼蛋的检验结果表明,甲鱼蛋所携带病原菌种类广,大部分为多重带菌,部分携带致病菌或条件致病菌。因此必须做好甲鱼蛋的检疫工作,以确保人们身体健康和养殖业的健康持续发展。; 吴玉娟孔繁德徐淑菲王仍瑞; 关键词：MALDI-TOF-MS 病原菌

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吴玉娟