吕庆华 作品数:44 被引量:366 H指数:11 供职机构: 浙江大学医学院附属第二医院 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 浙江省中医药管理局科研基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
非霍奇金淋巴瘤诊断流程与临床检测项目 2013年 淋巴瘤(lynlphoma)是一组起源于淋巴结和结外部位淋巴组织的免疫系统恶性肿瘤,其发生大多与机体免疫应答过程中淋巴系统的某种免疫细胞恶变有关。 童杰峰 杨海燕 路莎莎 李金范 张晓红 周燕 洪波 王云贵 朱蕾 吕庆华 赵小英 金洁关键词:非霍奇金淋巴瘤 机体免疫应答 免疫系统 恶性肿瘤 淋巴组织 细胞恶变 裸鼠腹腔输注体外扩增人脐血干/祖细胞的研究 被引量:3 2002年 赵小英 吴东 徐荣臻 王连聪 吕庆华 周璇 张晓红 严菊浓关键词:裸鼠 体外扩增 Shp-2过度表达与人白血病细胞恶性增殖相关性研究 2005年 目的研究Shp-2酪氨酸蛋白磷酸酶对白血病细胞恶性增殖的影响。方法应用W estern b lot和RT-PCR技术分析白血病细胞和正常造血细胞样本Shp-2蛋白和mRNA表达水平;采用反义寡核苷酸技术和流式细胞术分析下调Shp-2表达对白血病细胞增殖与凋亡的影响。结果与正常造血细胞相比,磷酸化Shp-2蛋白在白血病细胞中呈过度表达状态,Shp-2与-βactin比值在白血病组(n=36)、正常骨髓造血细胞组(n=8)及正常外周血细胞组(n=12)分别为1.23±0.74、0.163±0.088和0.034±0.045。同样,Shp-2 mRNA在白血病细胞样本中呈高表达状态,其与-βactin比值在白血病组(n=26)和正常造血细胞组(n=25)分别为1.242±1.057和0.046±0.076。用Shp-2特异性反义寡核苷酸阻断Shp-2表达后,白血病细胞出现明显凋亡和生长抑制。结论Shp-2在人白血病细胞中呈过度表达状态,其表达水平可能与白血病细胞增殖程度密切相关。 虞瑛姿 方永明 粱云 董庆华 吕庆华 赵小英 徐荣臻关键词:白血病 酪氨酸蛋白磷酸酶 苦参碱对白血病细胞诱导分化作用和机理研究 被引量:39 2001年 为了解苦参碱对人粒系白血病细胞系HL 60细胞的诱导分化作用并探讨其机制 ,采用MTT法、光镜观察、S AP免疫组织化学法、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原试验、流式细胞仪检测、逆转录酶 /多聚酶链反应 (RT PCR)检测 ,观察苦参碱对HL 60细胞的增殖抑制作用、分化诱导作用及其对细胞周期移行和癌基因表达的影响。结果表明 :苦参碱明显地抑制HL 60细胞的增殖 ,并诱导其向成熟粒系分化 ;苦参碱对HL 60细胞的诱导分化作用与其下调c myc基因表达、阻滞细胞在G1 朱宁希 罗文纪 虞荣喜 吕庆华 徐荣臻 郑树关键词:苦参碱 白血病 HL-60细胞 抑制增殖 诱导分化 Annexin V标记法检测骨髓增生异常综合征造血细胞凋亡 被引量:1 2001年 朱宁希 沈建平 陈均法 林圣云 周郁鸿 虞荣喜 吕庆华 杨骅关键词:骨髓增生异常综合征 造血细胞凋亡 FITC 小檗胺对人慢性粒细胞白血病细胞发生凋亡的诱导机制研究 被引量:8 2006年 目的研究新型p210 bcr/aN抑制剂小檗胺诱导人慢性粒细胞白血病细胞凋亡分子的机制。方法培养表达内源性p210 bcr/abl蛋白的Ph+人慢性粒细胞白血病细胞系K562,用小檗胺按指定时间和剂量干预细胞。应用膜联蛋白荧光素(Annexin-V-Fluos)/碘化丙啶(propidium iodide, PI)试剂盒和流式细胞术定量分析凋亡细胞百分比;用cytoperm/cytofix和天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3-McAb-PE定量检测含活化天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)细胞百分比;以免疫共沉淀技术(c-abl抗体)和Western印迹[p-Tyr(pY99)抗体]定量分析p2m bcr/abl蛋白磷酸化;p210 bcr/abl蛋白总量直接用Western印迹(c-abl抗体)检测;H8p90和Hsp70等分子伴侣蛋白水平的变化用Western印迹(Hsp90和Hsp70抗体)。结果48 h IC50浓度小檗胺(8μg/ml)作用48 h后,45.69%K562白血病细胞表达活化的Caspase-3凋亡分子和48.43%白血病细胞发生凋亡。免疫印迹和免疫共沉淀结果显示,低剂量小檗胺可明显抑制白血病细胞内p210 bcr/abl磷酸化:8μg/ml浓度小檗胺处理6 h后,白血病细胞磷酸化p210 bcr/abl蛋白含量仅为对照组的8.41%,而p210 bcr/abl蛋白总量并无变化。小檗胺还能直接下调p210 bcr/abl分子伴侣Hsp90蛋白水平:白血病细胞经8μg/ml浓度小檗胺处理24 h时的Hsp90水平只有对照组的18.37%,而且对能诱导白血病细胞产生凋亡抵抗的Hsp70蛋白水平影响不明显。结论(1)小檗胺是一种新型p210 bcr/abl蛋白磷酸化抑制剂,能通过抑制p210 bcr/abl蛋白磷酸化和诱导Caspase-3通路介导的Ph+白血病细胞发生凋亡; (2)与已知Hsp90抑制剂格尔德霉素(GA)不同,小檗胺能直接下调Hsp90蛋白水平,而对与肿瘤细胞凋亡抵抗有关的Hsp70蛋白表达影响不大,这提示小檗胺可能还是一种新型蛋白分子伴侣Hsp90抑制剂,值得进一步研究。 孙建荣 张晓红 何智文 古莹 虞瑛姿 方永明 吕庆华 董庆华 徐荣臻关键词:小檗胺 P210 热休克蛋白90 脱噬作用 复方三根制剂逆转多药耐药的实验研究 被引量:25 2003年 [目的]探讨复方三根制剂逆转K562/ADR、K562/VCR细胞株耐药性的机制。[方法]细胞K562、K562/ADR、K562/VCR培养于RPMI鄄1640安全培养液中。MTT法测定两株细胞的抗药性。RT鄄PCR法测定给药处理后24h、48h、72h后两耐药细胞株MDR1表达量。[结果]复方三根制剂和维拉帕米对K562/ADR和K562/VCR不同时段表达MDR1的量有显著差异。[结论]推测复方三根制剂逆转多药耐药机制为在转录水平下调MDR1mRNA,从而降低多药耐药细胞P鄄gp的表达。 冯正权 郭勇 朱宁希 吕庆华 沈敏鹤 吴良村 王泽时关键词:中药 多药耐药 逆转录多聚酶链反应 叶绿酸铜钠抗肿瘤作用的体外实验研究 被引量:6 2004年 目的研究叶绿酸铜钠(CHL)体外抑制HT29肠癌细胞的作用及机理。方法①MTT法测半数抑制浓度(IC50)及生长曲线;②Wright-Giemsa染色、DNA电泳和流式细胞仪观察CHL对HT29细胞凋亡的诱导作用;③PCR-ELISA方法定量定性检测CHL对HT29细胞端粒酶的影响;④RT-PCR、Westernblot方法检测环氧化酶2(COX-2)的表达。结果①CHL能抑制HT29细胞生长且呈剂量依赖关系;②CHL能够使HT29细胞阻滞在G1期,但并不能诱导细胞凋亡;③CHL能够抑制HT29细胞端粒酶活性和COX-2的表达。结论CHL能抑制HT29细胞生长,这种抑制作用同端粒酶活性抑制、COX-2表达下调及细胞G1期阻滞有关,但与细胞凋亡无关。 丁小文 郑树 彭佳萍 吕庆华 黄建关键词:叶绿素 端粒 末端转移酶 结直肠肿瘤 苦参碱对K562及其多药耐药细胞K562/vin、K562/dox的诱导凋亡作用 被引量:77 2000年 目的 明确中药苦参碱对化疗敏感和耐药细胞的诱导凋亡作用。方法 采用MTT法测定苦参碱对各细胞的IC5 0值。K 5 6 2、K 5 6 2 /vin、K 5 6 2 /dox细胞与适宜浓度苦参碱共同孵育于 16 40培养液中 ,一定时间后对细胞行Wright′s Giemsa染色 ,做形态学观察 ,同时行DNA凝胶电泳、流式细胞仪DNA含量分析以检测凋亡。结果 细胞形态学观察可见 0 .2 5~ 1.0 0mg/ml浓度苦参碱作用后的细胞体积缩小、核固缩深染、细胞质空泡化、核碎裂等 ;DNA电泳可见阶梯状条带 ;流式细胞仪检测可见有低G1期细胞出现 ,并S期细胞比例增高。在试验范围内凋亡比率与药物浓度呈一定相关。苦参碱对敏感和耐药细胞的诱导凋亡作用无明显差异。结论 苦参碱可诱导K 5 6 2细胞凋亡 ,对其多药耐药细胞K 5 6 2 /vin、K 5 6 2 /dox亦有诱导凋亡作用 ,其作用与药物浓度呈一定相关性。苦参碱诱导肿瘤细胞凋亡可能与其S期阻滞有关。 李旭芬 张苏展 郑树 潘锵荣 吕庆华关键词:苦参碱 K562细胞 多药耐药性 强直性脊柱炎患者血清和关节液白细胞介素15水平分析 被引量:8 2006年 杨旭燕 许东航 吕庆华关键词:白细胞介素15 强直性脊柱炎 关节液 疾病活动指数 IL-15