高磊
- 作品数：45 被引量：99H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- 尿道挫伤专用导尿管
- 本实用新型公开了一种尿道挫伤专用导尿管，包括空心的导尿管本体，所述导尿管本体设有首部和尾部；还包括位于导尿管本体尾部一侧的通气管，位于导尿管本体首部且穿插于导尿管本体上的球形冲液气囊，通气管端部的气囊注入口和导尿管本体首...
- 高磊潘铁军彭叶叶刘波谢森沈国球文瀚东周道裕
- 文献传递
- hIL-15成熟肽段基因的克隆及其原核表达载体的构建被引量：3
- 1999年
- 本文采用ＲＴＰＣＲ的方法自成人脾脏中扩增出ｈＩＬ１５成熟肽段基因，定向克隆入ｐＵＣ１９中，筛选带有插段的阳性克隆。经序列测定证实后，插入大肠杆菌融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ１中，构建重组表达质粒ｐＧＩＬ１５。ＳＤＳＰＡＧＥ证实ｐＧＩＬ１５大肠杆菌中可表达分子量为３８６ｋＤ的融合蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的１８５％。目的蛋白经纯化后具有促进靶细胞ＤＮＡ合成的作用。
- 纪宗玲陈苏民余宙耀高磊高磊陈南春粟宽源
- 关键词：RT-PCR分子克隆原核表达活性测定
- 白癜风自身免疫机理的研究进展被引量：1
- 1998年
- 白癜风是一种原因不明的常见病.本文围绕白癜风的自身免疫机理,着重介绍白癜风抗黑素细胞自身抗体及相应自身抗原,探讨白癜风与黑色素瘤之间的关系以及白癜风的HLA相关性、遗传背景.最后,讨论了白癜风基础研究的发展方向.
- 兰风华高磊陈苏民
- 关键词：白癜风自身免疫黑素细胞自身抗体黑色素瘤
- 腺病毒介导的PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyclinD1、p21表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:构建携带抑癌基因PTEN的腺病毒载体,探讨PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyclin D1、p21表达的影响。方法:采用RT-PCR方法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,连接入pENTR2A载体,在293A细胞中进行重组腺病毒的包装及扩增。以携带PTEN基因的腺病毒载体感染体外培养的前列腺癌细胞株PC-3。采用间接免疫荧光法检测细胞中PTEN的过表达情况。Western印迹检测PTEN、cyclin D1和p21表达的变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测PTEN对PC-3细胞增殖能力的影响。结果:成功构建重组腺病毒载体Ad-PTEN;PC-3细胞经Ad-PTEN感染后PTEN蛋白表达水平明显增加。Western印迹实验所得条带进行灰度值分析后与β-actin求比值,PTEN蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.215±0.065)明显高于对照组[(0.052±0.009),t=4.30,P<0.05]和Ad-LacZ组[(0.056±0.008),t=4.21,P<0.05]。cyclin D1蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.256±0.072)明显低于对照组[(0.502±0.087,t=3.77,P<0.05)]和Ad-LacZ组[(0.498±0.081,t=3.87,P<0.05)]。p21蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.589±0.076)明显高于对照组[(0.146±0.026,t=9.55,P<0.01)]和Ad-LacZ组[(0.163±0.024,t=9.26,P<0.01)]。MTT实验显示Ad-PTEN对PC-3细胞的抑制作用自48h后(21.98%)有显著性(t=6.80,P<0.01)。平板克隆实验显示Ad-PTEN组克隆形成率[(37.4±4.18)%]明显低于对照组[(54.9±4.81)%,t=4.76,P<0.01]及Ad-LacZ组[(56.5±5.42)%,t=4.83,P<0.01]。结论:通过腺病毒载体Ad-PTEN使PC-3细胞表达PTEN基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低cyclin D1表达,同时增加p21的表达。
- 高磊潘铁军武国军沈国球杨家荣文瀚东谢森钱卫红
- 关键词：前列腺癌PTEN基因腺病毒载体细胞周期蛋白
- 第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因对人前列腺癌细胞株PC-3转移及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 观察第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因（PTEN）对人前列腺癌细胞株PC-3转移及基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表达的影响.方法 以携带野生型PTEN基因的腺病毒感染体外培养的PC-3细胞,采用间接免疫荧光实验和Western blot实验检测PTEN、MMP-2 、MMP-9蛋白表达的变化;明胶酶谱实验检测MMP-2和MMP-9酶活性的变化.划痕实验和Transwell实验检测PTEN对PC-3细胞体外迁移和侵袭能力的影响.结果 Ad-PTEN感染后PC-3细胞中PTEN表达明显增加,而MMP-2和MMP-9表达水平及活性均降低.划痕实验显示Ad-PTEN组细胞迁移距离在12h为（112.36±18.38） μm,明显少于Ad-LacZ组的（166.52±19.28） μm（t=4.55,P ＜0.01）;在24 h为（214.75±35.62） μm,明显少于Ad-LacZ组的（361.87 ±46.15） μm（t=5.64,P ＜0.01）;在48 h为（436.61 ±52.69） μm,明显少于Ad-LacZ组的（732.56±78.30） μm,（t=7.01,P＜0.01）.Transwell实验结果显示Ad-PTEN组穿入下室面的细胞数[（22.40±2.41）个]明显少于Control组[（38.20±4.44）个,t=6.99,P＜0.01]及Ad-LacZ组[（37.20±4.97）个,t=5.98,P＜0.01].结论 PTEN对人前列腺癌PC-3细胞株转移及MMP-2、MMP-9表达有明显抑制作用,提示PTEN可能在前列腺癌的转移中发挥重要作用.
- 高磊潘铁军武国军沈国球谢森文瀚东
- 关键词：前列腺癌基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- 人源性抗HBsAg噬菌体抗体的筛选及纯化
- 1998年
- 目的:获得人源性抗HBsAg抗体Fab片段。方法:用预包被HBsAg的ELISA板,从构建的人全套抗体库中筛选出针对HBsAg的噬菌体抗体。并转入大肠杆菌中表达。破裂细胞后,获得可溶性Fab片段。以羊抗人Fab抗体偶联HiTrap柱。
- 余宙耀粟宽源任向荣高辉高磊张宜俊曾平鲁龙玉琴郑业华陈文吟陈南春陈苏民
- 关键词：HBSAG
- 腺病毒介导的PTEN基因对前列腺癌细胞株DU145增殖及cyclin D1、p21表达的影响
- 谢森高磊
- 工程化人源性抗-HBs Fab抗体的制备、纯化和鉴定被引量：12
- 1999年
- 用获得的表达人源性抗ＨＢｓＦａｂ片段的大肠杆菌，发酵表达该抗体的可溶Ｆａｂ片段。以羊抗人Ｆａｂ抗体偶联ＨｉＴｒａｐ柱，用Ａｃｔｉｓｅｐｅｌｕｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍ作为洗脱液，在ＦＰＬＣ上纯化。用ＳＤＳＰＡＧＥ及蛋白印迹法分析、鉴定，用固相放兔法检测其活性单位。蛋白印迹及ＥＬＩＳＡ显示转化菌株有抗ＨＢｓＦａｂ片段的表达。经ＦＰＬＣ纯化的抗体Ｆａｂ片段呈单一峰，与抗ＨＢｓ阳性血清相似。纯化后的抗体Ｆａｂ片段达到电泳纯，具有较高的活性。
- 余宙耀粟宽源任向荣曾平鲁张宜俊高辉高磊
- 关键词：HBSAG噬菌体抗体
- 经腹、经后腹腔途径3D腹腔镜肾上腺肿瘤切除术(附25例报告)
- 谢森高磊潘铁军
- 出血热病毒抗原与其抗独特型抗体基因的研究被引量：1
- 1996年
- 为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因，并与出血热病毒基因进行了比较。结果抗Ｉｄ人单克隆抗体重链可变区第４５～５５位氨基酸序列和轻链可变区第５８～６８位氨基酸序列，均与出血热病毒Ｇ２膜蛋白的第４４７～４５７位氨基酸序列高度同源，而且同源区域具有相似的蛋白质二级结构。结论抗Ｉｄ人单克隆抗体模拟抗原具有一定的分子基础。
- 高磊陈苏民陈南春赵忠良刘新平
- 关键词：病毒性出血热肾病综合征
