陈苏民
- 作品数：227 被引量：770H指数：12
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 人组织era基因mRNA的表达谱被引量：9
- 2001年
- 目的 研究人 era基因 m RNA在不同组织、不同细胞系的表达水平 .方法 用 α([32 p]d CTP标记人 era编码区基因作为探针 ,分别用 Northern杂交和斑点杂交分析含 12种不同成人组织 m RNA的 Multiple tissue northern(MTN)blot膜和含 76种成人、胎儿及常用细胞系 m RNA的 Multipletissue expression (MTE) array膜 ,并用同位素扫描系统对杂交结果进行图像分析 .结果 Northern blot杂交所检测的 12种组织中均有位于 2 .2 kb处的杂交条带 ,斑点杂交显示人era m RNA在所检测的 76种组织中均有表达 ,但表达水平有很大差异 ,在神经系统、某些胎儿组织以及某些肿瘤细胞中高表达 .结论 人 era m RNA表达于所有检测的组织或细胞系 ,可能为一种组成性表达的基因 .
- 纪宗玲柴玉波陈苏民张俊杰陈南春吴元明
- 关键词：基因核酸杂交基因表达ERA基因
- 成纤维细胞中hEra-EGFP融合蛋白的表达定位被引量：2
- 2001年
- 目的 研究人 era基因在体外培养细胞中的定位 .方法 将人 era基因克隆入带绿色荧光蛋白 (EGFP)荧光标签的真核表达载体 p SMEGFP,使其位于 EGFP的 N端 ,转染NIH3T3细胞 ,于转染后 2 4和 36 h分别用荧光显微镜观察 .结果 成功构建了 EGFP- h Era融合蛋白的表达载体 ,转染细胞后可见融合蛋白位于细胞的胞质近核膜处 .结论 用EGFP融合蛋白的方法初步将 h
- 纪宗玲陈苏民陈南春张俊杰吴元明刘慧平
- 关键词：基因基因表达成纤维细胞
- 骨形成蛋白诱导型真核载体的构建及其表达
- 2003年
- 成骨分化相关基因骨钙素 (OC)等的启动子内均含有成骨特异性转录因子Cbfa1特异性作用元件 ,而骨形成蛋白 (bonemorphogeneticprotein ,BMP)的促成骨分化作用正是通过其首先引起Cbfa1的升高 ,而后Cbfa1激活这些基因的表达 ,最终出现成骨分化表型 .为解决BMP没有理想的活性测定方法的问题 ,在RT PCR结果证实BMP 2可促进NIH3T3和C2C12细胞Cbfa1表达后 ,构建了串联6个Cbfa1作用元件的小鼠OC部分启动子 (6OCP)控制萤光素酶 (luciferase)报告基因的真核表达质粒 ,以期来放大BMP诱导报告基因表达的作用效果 .即通过细胞转染、rhBMP 2刺激后检测萤光素酶活性变化 ,从而间接定量测定rhBMP 2的生物学活性 .结果表明 ,pcDNA3 6OCP Luc转染细胞后其报告基因的基础活性较pcDNA3 Luc大为降低 ;而且在一定剂量范围内 ,转染细胞的萤光素酶活性 (荧光值 )随rhBMP 2剂量增加而升高 ,并呈线性正相关 。
- 朱帮福卢兹凡陈苏民陈南春纪宗玲张斌柴玉波李毅
- 关键词：骨形成蛋白基因表达萤光素酶
- 溶氧反馈-分批补料高密度培养人骨形成蛋白-2工程菌被引量：3
- 2002年
- 对表达人骨形成蛋白 2成熟肽的基因工程大肠杆菌E .coliDH5α pDH B2 m在 5 0 0mL摇瓶中进行了培养条件的摸索实验 ,并在此基础上扩大至NBSBiofloIV 2 0L发酵罐 ,利用溶氧反馈 -分批补料培养技术 :在培养过程中保持适当的溶解氧 (4 0 % ) ,以溶氧值在线反馈控制搅拌速度及流加补料培养基 ,使细菌保持适当的比生长率 ,成功地进行了工程菌的高密度培养 ,最终菌体密度达OD60 0 =5 7,每升干菌量 2 2 .8g ,目的蛋白的表达量占细菌总蛋白的30 % ,人骨形成蛋白 2成熟肽的理论产率达到 3.5 9g L。
- 李毅蒲勤赵忠良柴玉波陈南春陈苏民
- 关键词：人骨形成蛋白-2工程菌
- 兔肝、肠碱性磷酸酶的提纯和鉴定被引量：1
- 1993年
- 作者应用正丁醇抽提和DEAE-纤维素离子交换、NaCl线性梯度洗脱方法从家兔肝脏和小肠粘膜组织中提取出肝型碱性磷酸酶(L-ALP)和小肠型碱性磷酸酶(I-ALP).抑制试验表明,EDTA对I-ALP和L-ALP均有显著抑制作用,抑制率分别为46.7%和64.3％,二者相差不显著.L-苯丙氨酸对I-ALP有特异性抑制作用(P<0.01),而左旋咪唑对L-ALP有特异性抑制作用(P<0.05).热稳定性分析表明,L-ALP能耐受56℃20 min,I-ALP对热较敏感.经测定L-ALP和I-ALP的Km值分别为4.2×10^(-4)mol/L和1.3×10^(-3)mol/L.园盘聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,L-ALP和I-ALP酶染色带谱差异显著,前者主要呈两条带,而后者可见四条带.
- 吉昌华张晓光沈利群苏成芝陈苏民
- 关键词：碱性磷酸酶同功酶
- 底物诱导重组人表皮生长因子的复性被引量：3
- 1998年
- ｐＧＥＸ－载体是以融合蛋白形式表达外源基因的有效载体。本文将表皮生长因子（ＥＧＦ）基因克隆入该载体后，使外源基因获得了高效表达，但所获表达产物为不溶性、且无生物学活性的包涵体。为获得有活性的产物，我们尝试了用还原型谷胱甘肽诱导ＧＳＴ－ＥＧＦ的复性获得...
- 路凡赵忠良陈南春陈苏民
- 关键词：表皮生长因子复性
- 人DOC-2氨基端PID结构域的克隆与原核表达被引量：4
- 2003年
- 目的 :克隆人DOC 2氨基端PID结构域 (暂命名为nDOC 2 ) ,并在原核细胞中表达。方法 :用RT PCR从正常人卵巢组织中扩增nDOC 2基因 ,并克隆到载体 pUC 19中。经测序证实后 ,用BamHI/EcoRI双酶切 ,亚克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1,并转化E .coliDH5α菌株。取工程菌 ,用IPTG诱导表达 ,对表达产物进行SDS PAGE鉴定。结果 :①经RT PCR、测序和酶切鉴定 ,成功地克隆了人nDOC 2基因。②经IPTG诱导的重组质粒pGEX 4T nDOC 2表达出相对分子质量 (Mr)约为 5 0 0 0 0的融合蛋白 ,与预期的结果相符。结论 :成功克隆到人DOC 2氨基端PID结构域 ,并在E .coliDH5α中表达出GST nDOC
- 刘淑娟郑维国纪宗玲陈苏民张新海杨力军
- 关键词：DOC-2肿瘤抑制基因基因克隆原核表达
- hIL-15成熟肽段基因的克隆及其原核表达载体的构建被引量：3
- 1999年
- 本文采用ＲＴＰＣＲ的方法自成人脾脏中扩增出ｈＩＬ１５成熟肽段基因，定向克隆入ｐＵＣ１９中，筛选带有插段的阳性克隆。经序列测定证实后，插入大肠杆菌融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ１中，构建重组表达质粒ｐＧＩＬ１５。ＳＤＳＰＡＧＥ证实ｐＧＩＬ１５大肠杆菌中可表达分子量为３８６ｋＤ的融合蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的１８５％。目的蛋白经纯化后具有促进靶细胞ＤＮＡ合成的作用。
- 纪宗玲陈苏民余宙耀高磊高磊陈南春粟宽源
- 关键词：RT-PCR分子克隆原核表达活性测定
- 人破骨细胞生成抑制因子在真核细胞中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的克隆人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因并在真核 细 胞中表达，为进一步研究OPG/OCIF的生理功能及探讨骨质疏松症等疾病的治疗奠定基础。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板，采用RT-PCR法得到人OPG/OCIF 的 编码区cDNA，构建真核表达载体并转染成肌细胞，应用核酸杂交及western blot法证实OP G/OCIF在真核细胞中表达。结果获得人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCI F) 编码区全长cDNA，经序列测定证实与文献报道的OPG/OCIF编码区基因的核苷酸序列完全一致 。成功构建OPG/OCIF真核表达载体pcDNA3-OPG。重组质粒转染小鼠成肌细胞C2C12，建立稳 定转染OPG/OCIF编码区cDNA的细胞系，经核酸杂交及western blot法证实OPG/OCIF在真核细 胞中表达。结论 获得人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区全长cD NA并证实在真核细胞中表达，为OPG/OCIF进一步的功能研究奠定了基础。
- 刘继中纪宗玲陈苏民胡蕴玉路凡陶惠人
- 关键词：基因重组真核细胞表达骨质疏松症RT-PCR
- cⅠ857基因的体外定位同义突变被引量：5
- 1994年
- ｃⅠ８５７基因的体外定位同义突变陈南春，高辉，陈苏民，杨萍，刘新平（西安第四军医大学分子生物学研究所，西安７１００３２）外源基因要在大肠杆菌中获得高表达，需要合适的ＳＤ序列和可调控的强启动子［１］。ＰＬ启动子在原核启动子中属强启动子，它受ｃⅠ基因产物...
- 陈南春高辉陈苏民杨萍刘新平
- 关键词：外源基因定位突变
