顾怡
- 作品数：26 被引量：88H指数：5
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- HRM筛查PROC基因突变方法的建立和应用
- 2012年
- 目的利用高分辨率熔解曲线（HRM）结合PCR技术，建立遗传性蛋白C缺陷症患者的蛋白C基基因（PROC）突变筛查方法。方法收集仁济医院2010年4月～2011年6月收治的9例蛋白C缺陷的静脉血栓患者（经测序PROC基因均已知）及其6例确认有PROC基因缺陷的患者家属DNA标本，通过设计HRM引物，用已知PROC突变的DNA标本进行构建，建立PROC基因外显子1，2，3，7，8突变HRM筛查方法。同时对3例疑似PROC基因缺陷患者，进行该方法的验证。结果PROC基因外显子1，2，7，8区，突变体与野生型通过HRM图形可进行区分。对3例疑似PROC基因缺陷标本，HRM均筛查出突变，经测序2例为相同外显子7区杂合突变c．565C〉T，合并外显子2区杂合同义突变c．66T〉C，另1例为外显子7区杂合缺失C．577～579del，合并外显子1区多态性位点rs1799810A〉T。综合统计15例已知标本和3例验证标本，HRM对于PROC基因外显子1，2，7，8区准确度分别为100％，94．4％，100％和91．7％。外显子3区由于缺乏突变病例，无法构建，改为直接测序法。结论该研究建立了HRM结合直接测序法筛查PROC基因变异的方法。该方法能较快速、方便、经济地筛查PROC变异，适用于遗传性PC缺陷症基因诊断。
- 沈薇顾怡张岚张纪蔚应春妹傅启华
- 关键词：高分辨率熔解曲线蛋白C基因
- 重症肝炎和肝硬化患者肝移植前后生物标志物水平差异及其预后评估价值
- 2023年
- 目的比较不同病因(重症肝炎和失代偿期肝硬化)肝移植患者术前、术后血常规和生化指标的变化,探讨各项指标与患者预后的关系。方法选取2020年1—12月上海交通大学医学院附属仁济医院行原位肝移植的患者99例,其中重症肝炎44例(重症肝炎组)、失代偿期肝硬化55例(肝硬化组)。收集患者术前和手术当天(以d0表示)、术后1~7 d(以d1、d2、d3、d4、d5、d6、d7表示)的实验室检测结果,包括白细胞(WBC)计数、中性粒细胞绝对数(NEUT#)、淋巴细胞绝对数(LYMPH#)、血小板(PLT)计数、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、直接胆红素(DBil),计算中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、丙氨酸氨基转移酶/直接胆红素比值(ADR)。采用Logistic回归分析评估肝移植患者术后7 d内预后不良(发生急性排斥或肺部感染)的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标判断肝移植患者术后7 d内预后不良的效能。结果重症肝炎组术前WBC计数、NEUT#、DBil、ALT、NLR显著高于肝硬化组(P<0.01),PLT计数、ADR、PLR均显著低于肝硬化组(P<0.01),2个组之间LYMPH#差异无统计学意义(P=0.828)。重症肝炎组d0、d1、d2、d3、d4时间点PLT计数、d1、d2、d3和d5时间点PLR、d1时间点NEUT#、d2时间点NLR均显著低于肝硬化组(P<0.05)。重症肝炎组d0~d7各时间点DBil水平均显著增高于肝硬化组(P<0.05),ADR均显著低于肝硬化组(P<0.001)。d0和d1时间点重症肝炎组DBil水平显著下降,肝硬化组则稍升高,d2时间点后2个组DBil水平均持续下降。2个组ADR均于d0、d1、d2时间点升高随后下降。d0~d7各时间点2个组之间WBC计数、LYMPH#、ALT差异均无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,PLR-d1是肝硬化组术后7 d内预后不良的危险因素。ROC曲线分析结果显示,PLR-d1判断肝硬化患者肝移植术后7 d内预后不良的曲线下面积(AUC)为0.706。结论不同病因肝�
- 顾怡王蕊邓杰杨易静周王柯陈予诺陈小松沈薇周景艺
- 关键词：肝移植重症肝炎失代偿期肝硬化预后急性排斥
- 使用血常规HCT值对全血CRP测定实时修正性能评估
- 目的：评估SYSMEX XN2800血常规CRP流水线利用血常规HCT值对全血CRP测定实时修正结果的准确性.方法：收集仁济医院2017.8月217例血常规检测标本,37例HCT＜35%,128例标本HCT介于35％～4...
- 马继荣顾怡沈文艳沈薇
- 一例遗传性蛋白C缺陷症家系的实验诊断
- 2013年
- 目的对一个蛋白C(PC)缺陷家系进行临床表型及基因突变检测,初步探讨突变位点的作用机制。方法采用发色底物法和ELISA双抗体夹心法分别检测先证者和家系成员的血浆PC活性和PC抗原含量。用PCR法对先证者PROC基因9个外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后测序,检测基因突变;对于家系成员,仅检测先证者发现基因突变部位的外显子及其侧翼序列。通过对突变前后蛋白质的构象分析,初步推测突变位点的分子机制。结果先证者的PC活性和PC抗原含量分别为38%和33.6%。基因测序显示先证者的PROC基因外显子7区同时存在1个杂合错义突变[c.541T>G(p.Phe181Val)]和1个无义突变[c.595C>T(p.Arg199*)]。前者引起181位苯丙氨酸(Phe)变为缬氨酸(Val),后者使199位精氨酸(Arg)突变为终止密码子。其父亲和儿子的PC活性分别为49%和42.2%,PC抗原含量分别为90%和97.4%,存在一个相同的杂合无义突变c.595C>T。其母亲的PC活性为84.4%,PC抗原含量为100%,外显子7区在位点c.541T>G存在杂合错义突变。所有成员蛋白S活性和AT活性均在正常范围。结论通过表型检测、家系调查和基因诊断,明确先证者为遗传性PC缺陷症,先证者的2个突变分别来自父亲和母亲,是导致先证者患PC缺陷症的原因,突变位点c.595C>T可能是导致患者PC活性下降的主要原因。
- 朱芮张岚顾怡沈薇张纪蔚应春妹
- 关键词：静脉血栓蛋白C基因
- 乳腺癌术后获得性血友病A的临床研究
- 2024年
- 目的 探讨1例乳腺癌术后获得性血友病A(AHA)的病因、临床表现、诊断与治疗过程,并通过检索文献,从实验室检查的角度出发,总结AHA的成因、诊断、治疗、预防等情况,以提高临床对AHA的认识。方法 分析该院2023年5月13日收治的1例乳腺癌术后患者创面渗血不止的原因,同时进行活化部分凝血活酶时间(APTT)纠正试验和凝血因子Ⅷ抑制物检测。以“获得性血友病A”“AHA”为关键词,对万方数据库和PubMed数据库2015-2024年发表的中文文献进行检索并分析。结果 该例患者APTT孤立性延长伴凝血因子Ⅷ∶C显著降低。APTT纠正试验提示患者存在时间温度依赖性凝血因子Ⅷ抗体,凝血因子Ⅷ抑制物滴度为1∶16.。该患者临床诊断为AHA,经注射重组活化人凝血因子Ⅶ止血,加用环磷酰胺清除凝血因子Ⅷ抑制物,患者血红蛋白水平逐渐稳定升高。文献检索结果发现,共检索到文献15篇,其中单病例报道的有10篇,多病例报道的有5篇,共涉及78个病例,其中无明确病因35例,自身免疫性疾病19例,约50%病例伴有基础疾病。结论 外科手术一定要重视凝血功能检测,对于孤立性APTT延长的患者,最好查找APTT延长的根本原因,同时临床要提高对AHA的识别、诊断和治疗水平。
- 顾怡周景艺沈薇
- 关键词：获得性血友病A乳腺癌活化部分凝血酶时间
- Sysmex KX-21应用于浆膜腔积液和脑脊液检查的探索
- 目的了解Sysmex KX-21血液细胞分析仪是否可适当运用于浆膜腔积液和脑脊液的检查。方法按照《全国临床检验操作规程》第3版要求对浆膜腔积液和脑脊液标本进行操作。同时根据标本颜色用KX-21进行计数和分类.鲜红色标本采...
- 沈薇顾怡于嘉屏
- 关键词：浆膜腔积液脑脊液
- 文献传递
- 血栓相关凝血标志物在诊断深静脉血栓患者中的应用被引量：21
- 2018年
- 目的评估凝血标志物凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、凝血酶调制蛋白(TM)、纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PIC)、组织型纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t PAI-C)、D二聚体(D-D)、纤维蛋白降解产物(FDP)在深静脉血栓患者中的应用。方法利用仁济医院收集的深静脉血栓(DVT)患者样本66例,32例为慢性期DVT,34例为急性期DVT检测凝血标志物。使用SYSMEX CS5100血凝分析仪测定D-D和FDP,使用SYSMEX HISCL5000化学发光免疫分析仪测定TAT、TM、PIC、t PAI-C,均为配套试剂。同时选取40例健康体检样本作为正常对照。数据用SPSS11.0软件分析。结果慢性期DVT患者,D-D、FDP、TAT、TM、PIC、t PAI-C均值分别为(0.079±0.093)μg/ml、(1.60±2.41)μg/ml、(3.36±3.73) ng/ml、(9.89±2.13) TU/ml、(1.008±1.096) ug/ml、(9.83±3.84) ng/ml;急性期DVT患者,D-D、FDP、TAT、TM、PIC、t PAI-C均值分别为(2.47±2.80)μg/ml、(32.6±42.11)μg/ml、(17.64±18.35) ng/ml、(9.74±3.01) TU/ml、(5.658±6.974) ug/ml、(11.58±6.52) ng/ml;正常对照组,D-D、FDP、TAT、TM、PIC、t PAI-C均值分别为(0.073±0.088)μg/ml、(1.62±2.49)μg/ml、(2.60±1.13) ng/ml、(8.08±1.49) TU/ml、(0.459±0.105) ug/ml、(5.59±2.25) ng/ml。组间比较显示,急性和慢性期DVT间有统计学差异(P <0.05水平)的指标为D-D、FDP、TAT、PIC。正常组和急性期DVT间有统计学差异(P <0.05水平)的指标为D-D、FDP、TAT、TM、PIC、t PAI-C;正常组和慢性期DVT间有统计学差异(P <0.05水平)的指标为TM、t PAI-C。结论对于诊断急性DVT来说,D-D、FDP、TAT、TM、PIC、t PAI-C这6项指标均有良好的诊断价值;慢性DVT患者相对于正常人群而言,TM、t PAI-C表现增高,说明血栓后血管修复是一个漫长持续的过程,而对于急性期DVT而言,D-D、FDP、TAT、PIC下降明显,对于DVT的诊断和治疗有良好的指导意义。
- 沈薇周景艺顾怡沈文艳李敏
- 关键词：凝血酶-抗凝血酶复合物纤溶酶-抗纤溶酶复合物复合物
- 一例遗传性蛋白C缺陷症家系的实验诊断被引量：5
- 2011年
- 目的对1例遗传性蛋白C缺陷症家系进行临床表型诊断和基因突变检测。方法用发色底物法测定血浆蛋白C活性;用聚合酶链反应(PCR)法对先证者PC基因(PROC)的9个外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变。家系成员DNA在先证者PROC基因突变区域扩增后测序,进行家系调查以期发现遗传规律。结果先证者蛋白C活性为38.6%,抗原为45.3%。直接基因测序分析发现先证者PROC基因外显子7区存在杂合错义突变c.565C>T,该突变将引起编码的蛋白C 147位精氨酸被色氨酸替换(p.Arg147Trp)。家系分析发现先证者的c.565C>T突变遗传于其父亲。结论 c.565C>T杂合突变是导致该家系遗传性PC缺陷症的原因。
- 沈薇顾怡张岚张纪蔚应春妹郁婷婷傅启华
- 关键词：蛋白C基因突变
- 一例血小板卫星现象病例分析被引量：1
- 2015年
- “血小板卫星现象”是指在乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血中血小板黏附于白细胞表面周围，形成花环的一种现象。一般认为更换抗凝剂可消除此现象的发生，与疾病和药物无关。我们在工作中遇到一例血小板卫星现象病例，患者最终死亡，提示这一现象可能与疾病关联，现报道如下。
- 沈文艳顾怡邵康沈薇李敏
- 关键词：血小板黏附病例分析白细胞表面EDTA抗凝血抗凝剂
- EDTA-K_(2)抗凝真空采血管抗凝剂过量对血常规检查结果的影响被引量：2
- 2023年
- 目的探讨EDTA-K_(2)抗凝真空采血管抗凝剂过量对血常规检查结果的影响。方法随机抽取门诊行血常规检测者60人,先用7.2 mg EDTA-K_(2)采血管取血约2 mL(观察组)后,再用3.6 mg EDTA-K_(2)采血管取血(对照组)至负压耗尽。两组分别于采样后30 min、1 h、2 h、4 h和6 h,在Sysmex XN全自动血细胞分析仪上以自动进样模式检测血常规,得到白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞百分比(Neu%)、淋巴细胞百分比(Lym%)、单核细胞百分比(Mon%)。根据两组在各时间点的均值、差值均值计算偏差率,以允许总误差(TEa)为参考,评价检测结果的一致性。选取两组1 h的检测结果,采用Bland-Altman法,进行单次测量结果的一致性评价。结果采样后30 min、1 h、2 h、4 h和6 h检测偏差率最大的分别是PLT(0.66%)、Mon%(1.16%)、Mon%(0.83%)、PLT(0.71%)、PLT(0.98%)。所有指标远小于1/3 TEa水平,基本达到1/6 TEa水平。Bland-Altman图中90%以上的点落在95%一致性界限(LoA)之内。采样后1 h血常规8项必需指标单次测量的一致性评价结果显示,各指标95%LoA置信区间对应的偏倚(CV%)与TEa相比全部符合要求,WBC、Hct、MCV、MCH、MCHC、PLT达到<1/2 TEa标准。结论EDTA-K_(2)抗凝真空采血管抗凝剂过量对采血后6 h内的血常规检查结果没有明显影响。
- 沈文艳张悦辉周景艺沈薇顾怡
- 关键词：抗凝剂全血细胞计数真空采血管
