贾俊婷
- 作品数:30 被引量:30H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19污染情况调查被引量:2
- 2015年
- 目的检测混合原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19病毒)核酸,分析我国原料血浆及凝血因子类产品中B19病毒的污染情况。方法针对B19病毒的保守区域NS1区合成引物及探针,采用Taq Man实时定量PCR法检测混合原料血浆和4类凝血因子类产品中B19病毒核酸。结果混合原料血浆的B19病毒核酸的阳性率为59.49%(116/195),最高浓度可达1.35×1010拷贝/ml。因子Ⅷ、凝血酶、纤维蛋白原以及凝血酶原复合物的阳性率分别为93.55%(29/31)、100%(10/10)、85.71%(6/7)和88.89%(8/9)。结论我国混合原料血浆与凝血因子类产品中B19病毒的污染率较高,有必要进行原料血浆的B19病毒筛查,对于保障血液制品的病毒安全性具有重要意义。
- 贾俊婷马玉媛郭逸赵雄赵福广章金刚
- 关键词:人细小病毒B19
- 人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价被引量:2
- 2015年
- 目的 建立能同时检测人细小病毒B19(简称B19病毒)3种基因型的通用核酸检测(NAT)体系,并进行方法学评价。方法 对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域(NS1区)设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果,在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中,建立B19病毒实时荧光定量PCR(q PCR)标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果 建立的B19病毒实时q PCR检测体系的标准曲线在1×109~1×10^3拷贝(copies)/μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示,体系的最低检测下限为10拷贝/μl;与其他血源传播病毒等无交叉反应;批内和批间实验重复性良好。结论 建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系,不仅可用于B19病毒感染的诊断,还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查,对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。
- 贾俊婷郭逸赵雄马玉媛章金刚
- 关键词:人细小病毒B19核酸检测
- UT-7/EPO细胞培养条件的优化及复壮
- 2016年
- 目的使复苏后处于衰亡状态的UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态,并优化其生长密度。方法通过更换不同培养基(改良的RPMI1640、DMEM和IMDM培养基)、调整血清浓度(10%、15%和20%)、改变生长因子加量(1、3、5 U/ml)及将小鼠腹腔细胞作为饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养,对UT-7/EPO细胞进行复壮。对恢复正常生长状态后的UT-7/EPO细胞,利用CCK-8法绘制细胞生长曲线,并根据生长曲线通过梯度密度培养确定UT-7/EPO细胞在不同培养器皿(48、24、12、6孔板及25 cm2细胞培养瓶)中的最适培养密度。将传代后第2天处于对数生长期的UT-7/EPO细胞冻存及复苏传代3次后,连续培养9 d,检测复壮后UT-7/EPO细胞的初步稳定性。将复壮后UT-7/EPO细胞分别用人源STR试剂及小鼠细胞STR位点进行鉴定。结果更换培养基、改变血清和生长因子加量均不能使衰亡的UT-7/EPO细胞的生长状态有明显改善;饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养可使UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态;获得了UT-7/EPO细胞在不同培养器皿中的最适培养密度。复苏后的细胞生长状况良好,与未冻存前的生长状态及活力相当。人源STR位点检测结果显示,复壮后的UT-7/EPO细胞STR图谱均为单个或2等位基因峰,无其他人源细胞的污染;小鼠STR位点检测结果显示,复壮后的细胞未发现饲养细胞的污染。结论饲养细胞能够有效地使UT-7/EPO细胞复壮;最适的细胞生长密度能有效地使细胞维持在稳定、良好的生长状态。
- 宋婉莹杨姝贾俊婷马玉媛赵福广章金刚
- 关键词:复壮
- 五指山小型猪内源性反转录病毒囊膜基因变异特征研究被引量:2
- 2013年
- 为分析近交系连续3代次五指山小型猪内源性反转录病毒囊膜基因(PERV-env)变异特征,本研究采用PCR方法对该基因进行扩增、克隆和序列测定,将其与参考序列比对和遗传进化分析。序列分析显示:PERV-env核苷酸序列与参考序列之间的同源性为98.3%~99.3%,具有明显G→A突变,并且偏好发生于GA、GG。进一步分析表明,在PERV-env序列190 bp和1 875 bp位置均有G→A突变发生。PERV-env基因遗传进化树分析表明,五指山来源的PERV与国外小型猪PERV-A亲缘关系较近,但仍存在差异。本实验将有助于PERV分子特性的研究,为进一步开展异种移植中PERV的安全性评价奠定基础。
- 张念马玉媛向思龙贾俊婷吴健敏章金刚
- 关键词:近交系五指山小型猪猪内源性反转录病毒囊膜基因
- 加速试验预测纤维蛋白止血贴稳定性
- 2015年
- 目的通过加速试验推算纤维蛋白止血贴(FHP)的保存期。方法根据多点等温稳定性原理,温度选择70,80和90℃,将FHP样品放入不同温度培养箱中(70、80和90℃),在不同时间点(70℃取样时间为1、3、9、10、12、13、20、25、29、32 d;80℃取样时间为1、3、13、15、16、17 d;90℃取样时间为1、2、4 d)取样测定其活性,根据活性与对应时间建立FHP的模拟一级热降解曲线,得出不同温度下FHP的热降解速度,再分别建立FHP热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线,以此推算出FHP在4、25和37℃的保存期。结果 FHP在70、80和90℃时的热降解速度分别为0.0148、0.0247、0.1057,热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线分别为y=-0.0399x+4.445和y=-1.154x-0.376,据此推算出FHP在4、25和37℃的保存期分别为5734、958和345 d。结论 FHP在25℃条件下可以保存>2年。
- 赵雄章纳马玉媛吕茂民贾俊婷赵媛媛章金刚
- 关键词:稳定性
- 猪源生物医用材料中的内源性病毒及其控制措施
- 马玉媛范瑞贾俊婷赵雄章金刚
- 冻干血浆与人血白蛋白在战创伤休克救治中的应用被引量:8
- 2015年
- 冻干血浆和人血白蛋白在战创伤休克治疗中发挥着举足轻重的作用。冻干血浆是由健康人血浆根据血型按照一定比例混合经灭活病毒和冷冻干燥制成,其成分与新鲜冰冻血浆基本相同,对于战创伤休克、烧伤等具有良好的治疗效果,也是各国军方的研究热点。随着病毒灭活技术的不断进步,冻干血浆的安全性不断提高,已经在军队应用,在特殊情况下可以民用。白蛋白是血浆中含量最多的蛋白,具有维持血浆胶体渗透压、结合并输运血液中小分子物质等生理功能。目前上市的人血白蛋白包括血浆来源和重组来源两种,二者在分子组成、结构及生理功能上基本一致,在人体内的耐受性、安全性及药物代谢动力学等方面也没有明显差别。尽管人血白蛋白在休克救治中的作用曾存在争议,其在失血性休克、烧伤等的治疗中发挥着不可替代的作用。随着技术的不断进步,冻干血浆和人血白蛋白的质量将不断提高,更加安全、高效、经济,更加适用于战场环境。
- 赵雄章纳马玉媛吕茂民贾俊婷赵媛媛章金刚
- 关键词:休克战创伤人血白蛋白
- 猴B病毒实时荧光定量PCR方法及其通用引物、MGB探针与试剂盒
- 本发明公开了猴B病毒实时荧光定量PCR方法及其通用引物、MGB探针与试剂盒。本发明提供了的猴B病毒实时荧光定量PCR检测引物和探针,由gB‑3F引物、gB‑3R引物和gB‑3P探针组成;所述gB‑3F引物的核苷酸序列为序...
- 马玉媛章金刚贾俊婷马丽敏赵雄王延琳范瑞钟亚迪
- 猴B病毒实时荧光定量PCR方法及其通用引物、MGB探针与试剂盒
- 本发明公开了猴B病毒实时荧光定量PCR方法及其通用引物、MGB探针与试剂盒。本发明提供了的猴B病毒实时荧光定量PCR检测引物和探针,由gB‑3F引物、gB‑3R引物和gB‑3P探针组成;所述gB‑3F引物的核苷酸序列为序...
- 马玉媛章金刚贾俊婷马丽敏赵雄王延琳范瑞钟亚迪
- 文献传递
- 人细小病毒B19三种基因型的实时荧光定量PCR检测方法及其通用检测引物、TaqMan探针与试剂盒
- 本发明公开了一种对人细小病毒B19三种基因型同时进行定性、定量检测的实时荧光定量PCR检测方法及其通用检测引物、TaqMan探针与试剂盒。本发明通用检测引物、TaqMan探针可结合实时荧光定量PCR实现准确定性、定量待测...
- 马玉媛章金刚贾俊婷赵雄郭逸吕茂民尹惠琼
- 文献传递