葛宜和
- 作品数:42 被引量:121H指数:7
- 供职机构:鲁东大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金淮安市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- rpoS基因插入突变对铜绿假单胞菌两个吩嗪合成基因簇的调控被引量:3
- 2010年
- 【目的】为了研究铜绿假单胞菌rpoS基因对吩嗪(Phenazine)合成基因簇phz1和phz2的调控方式与机制。【方法】采用抗庆大霉素基因(gentamycin resistance cassette,aacC1)插入失活的策略构建了rpoS基因突变株PA-SG;同时利用lacZ的翻译融合表达载体pME6015,构建了phz1′-′lacZ和phz2′-′lacZ翻译融合表达载体pMEZ1和pMEZ2。采用电转化法分别将pMEZ1、pMEZ2和pME6015导入铜绿假单胞菌突变株PA-SG和野生株PAO1,用Miller法检测融合β-半乳糖苷酶活性。【结果】在KMB或PPM培养基中,pMEZ1在突变株PA-SG中的表达均增强,为野生株的4-5倍;而pMEZ2在突变株PA-SG中的表达均降低,野生株是突变株的2-3倍。【结论】由此推测,铜绿假单胞菌rpoS基因对两个不同吩嗪合成基因簇的调控作用具有特异性,在一定程度上,rpoS负调控phz1,正调控phz2。
- 周金凤葛宜和刘婷程显好王磊高兴喜
- 关键词:铜绿假单胞菌RPOS吩嗪
- 假单胞菌M18调控因子GacA与RsmA的相关性及对抗生物质合成代谢调控机制的分析被引量:3
- 2006年
- 假单胞菌M18是一株可同时合成并分泌吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和藤黄绿脓菌素(Pyoluteorin,Plt)两种抗生物质的生防菌株。为了进一步研究假单胞菌M18抗生物质合成代谢的调控方式与机制,在分别构建gacAr、smA等单基因突变株基础上,又构建了gacArsmA双基因突变株M18GR以及gacA′-l′acZ和rsmA′-′lacZ等翻译融合表达载体(pMEGA和pMERA)。通过在PPM和KMB两种培养基中发酵培养和两种抗生物质PCA和Plt的HPLC定量测定显示,双突变株M18GR的PCA和Plt的合成量不论在PPM还是在KMB培养基中都介于单突变株M18G和M18R之间。由实验结果分析推测,两种调控因子对抗生物质合成的调控作用不是发生在转录水平,很可能发生在转录后水平。由β-半乳糖苷酶的定量分析表明,在假单胞菌M18中,两种调控因子不存在自诱导机制;虽然GacA未调控RsmA的合成,但RsmA可能部分正向调控GacA的表达。
- 葛宜和黄显清张雪洪许煜泉
- 关键词:假单胞菌M18GACARSMA双突变
- 灵芝耐药性研究
- 2005年
- 为探索生料栽培灵芝的可行性,研究了6种杀菌剂对杂菌的抑制作用以及对灵芝菌丝的影响.其中代森锰锌和克霉灵对灵芝菌丝生长影响很小,与熟料栽培无显著差异,可供灵芝生料栽培使用;氢氧化铜、高锰酸钾、硫粉、百菌清对灵芝菌丝生长有不同程度的抑制,与熟料栽培有显著差异,因而不适用于灵芝的生料栽培.
- 温鲁葛宜和邱燕
- 关键词:杀菌剂灵芝生料栽培
- 一种蜜环菌子实体的人工栽培方法、其培养基及其应用
- 本发明公开了一种蜜环菌子实体栽培的方法,其步骤包括:准备蜜环菌菌种;配制培养基:其配方重量比组分为:18~25%的粮食作物,75~82%的水;在种子培养基中培养蜜环菌,获得的蜜环菌种子接种到制得的培养基上,15~30℃下...
- 程显好刘林德刘静葛宜和高兴喜张秋胜缪静屈慧鸽
- 文献传递
- 胶东地区金银花品种间遗传关系的RAPD分析被引量:4
- 2017年
- [目的]探讨不同金银花(Lonicera japonica)品种间的遗传关系。[方法]利用RAPD分子标记技术对胶东地区31个金银花品种的遗传多样性及遗传关系进行研究。[结果]5个引物共扩增出650条带,每个引物可扩增出0~9个条带。聚类分析结果表明,31个金银花品种可以分为两大类,采自昆嵛山太白顶的金银花品种为一类,其余30个金银花品种为一类。从遗传距离来看,采自昆嵛山太白顶的品种与中医世家引进金银花品种大毛花遗传距离最远,为2.507;采自龙口兰高镇马蔺塂(Ⅱ)与中医世家引进金银花品种四季丰遗传距离最近,为0.020。[结论]不同金银花种源间具有较高的遗传多样性,不同金银花种源间的遗传关系与地理分布有一定的相关性。
- 王一斐刘林德葛宜和孙太元
- 关键词:金银花聚类分析RAPD
- 假单胞菌株M18抗生物质合成代谢的分子调控机制及相关性研究
- 假单胞菌株M18(Pseudomonassp.M18)与已报道所有假单胞菌属菌株不同,可以同时合成并分泌两类抗生物质。一类是吩嗪(Phenazine),另一类是藤黄绿菌素(Pyoluteorin,Plt)。吩嗪类物质主要...
- 葛宜和
- 关键词:假单胞菌M18吩嗪-1-羧酸藤黄绿菌素
- 文献传递
- 一株产酪氨酸解氨酶的菌株及应用
- 本发明涉及一株产酪氨酸解氨酶的菌株及应用,属于生物技术领域,所述菌株分类命名为约氏不动杆菌Acinetobacter johnsonii,已于2020年5月15日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号...
- 冯志彬张娟程仕伟葛宜和
- 产L-天冬氨酸α-脱羧酶细菌的分离、鉴定及发酵条件优化被引量:9
- 2016年
- 【目的】从葡萄园土壤中分离L-天冬氨酸α-脱羧酶的产生菌株,对其进行分类鉴定,优化其产生L-天冬氨酸α-脱羧酶的发酵条件,为β-丙氨酸的生物合成提供基础。【方法】采用变色圈法和液体复筛培养基分离筛选具有L-天冬氨酸α-脱羧酶活力的菌株,对菌株进行形态、生理生化特征试验及16S r RNA序列同源性分析鉴定菌株的系统发育学地位,采用单因素及正交设计试验优化培养基及发酵条件。【结果】筛选到一株L-天冬氨酸α-脱羧酶高产菌株Pan D37,其亲缘关系和特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)较近,且形态与培养特征、生理生化特性与特基拉芽孢杆菌基本相符。研究表明其最佳发酵配方和培养条件为:蔗糖22.5 g/L、富马酸7.5 g/L、蛋白胨20 g/L、L-天冬氨酸6 g/L、Triton X-100 2g/L,起始p H为7.0,装液量50 m L/500 m L,摇床转速220 r/min,种子液接种量为5%(V/V),35°C培养28h。在最优条件下L-天冬氨酸α-脱羧酶活力可达44.57 U/m L,比初筛时提高2.57倍。【结论】分离并获得一株特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)Pan D37,经条件优化后具有较高的L-天冬氨酸α-脱羧酶产生能力,有望应用于β-丙氨酸的工业生产。
- 冯志彬张娟陈国忠察亚萍刘进杰葛宜和程仕伟于波涛
- 关键词:发酵条件优化Β-丙氨酸
- 甜酒酿的制作方法及其影响因素分析被引量:5
- 2017年
- 为了获得科学的甜酒酿制作方法,本研究以糯米为主要原料,首先确定发酵基料最佳含水量,通过四因素三水平正交试验分析优化接种量、发酵温度、总发酵时间、有氧发酵时间对制作质量的影响,并对发酵过程中酵母菌生长规律、还原糖和酸度的变化规律进行测定.结果表明:最适含水量为45%,接种量为1%,发酵温度为34℃,封罐发酵,总发酵时间为32h,所得甜酒酿的酒香协调,酸甜适宜.发酵过程中,8~32h为酵母菌的对数生长期,32h后酵母菌的数目逐渐减少;还原糖含量在8~32h快速增加,32~72h内缓慢上升,在72h达到最高值后快速下降.酸度在整个过程都呈现上升趋势,而在16~40h之间快速上升,其他时间则缓慢上升.
- 缪静贠波兰程仕伟冯志彬陈国忠葛宜和
- 关键词:甜酒酿发酵制作方法正交试验
- 产羧甲基纤维素酶的 Bacillus sp.B59培养优化研究被引量:2
- 2021年
- 芽孢杆菌来源纤维素酶具有耐热耐碱等优良特性,在饲料添加剂等行业具有重要应用。本文以分离自近海土壤的芽孢杆菌(Bacillus sp.)B59为研究对象,通过优化碳源、氮源、金属盐、初始pH值、培养温度和接种量对菌株产羧甲基纤维素酶的影响,正交试验确定最佳产酶工艺为:2 g·L^(-1)果糖,20 g·L^(-1)蛋白胨,0.5 g·L^(-1) FeCl _(3),3 g·L-1 ZnSO_(4),0.2 g·L^(-1)羧甲基纤维素,pH值8.5,接种量1%(v/v),培养温度28℃。在优化条件下发酵培养40 h,获得羧甲基纤维素酶活力为786.92 U·mL^(-1),为后续的规模制备及应用奠定基础。
- 仉倩马瑞梅解孝满董全行葛宜和冯志彬程仕伟
- 关键词:芽孢杆菌羧甲基纤维素酶发酵生产