王胜利
- 作品数:4 被引量:38H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院公共卫生学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 肉类食品细菌污染生物发光快速分析技术研究被引量:32
- 2003年
- 目的 建立快速准确的肉类食品细菌污染的检测方法。方法 利用ATP生物发光分析技术和体细胞清除技术 ,测量细菌ATP和体细胞ATP ,细菌ATP量与细菌数成正比。结果 对于鲜肉类食品 ,须先清除体细胞ATP ,分析测量时间需 15min。对于熟制品 ,无需清除体细胞 ,其分析测量时间只需 4min。测量细菌的下限为 10 3cfu/g。结论 利用ATP生物发光分析技术检测肉类食品细菌污染 ,可实现快速适时的检测 ,是一项值得广泛推广应用的新技术。
- 舒柏华孙丹陵王胜利徐顺清
- 关键词:肉类食品细菌污染
- PCR产物生物发光分析技术研究被引量:1
- 2007年
- 目的基于水母发光蛋白生物发光分析技术建立一种PCR产物定量检测技术。方法利用RT-PCR对CK19-mRNA进行放大,PCR引物的5’端用生物素标记,然后用交联了地高辛寡核苷酸探针与目标生物素化的DNA模板杂交。杂交复合物与包被在微孔板上的链亲合素结合,加入标记了水母发光蛋白的地高辛抗体与地高辛特异结合,再加入钙离子激发水母发光蛋白发光,发光强度正比于CK19-mRNA的量。结果探测灵敏度可达22 amol/L的RT-PCR产物。结论该定量检测技术是一种灵敏的、可靠的、非放射性的微量CK19-mRNA定量方法。
- 舒柏华王胜利何丽芸徐顺清
- 关键词:生物发光
- 生猪肉中腺苷酸与细菌及硫化氢含量关系被引量:6
- 2004年
- 目的 探索评价生猪肉鲜度指标 (腺苷酸 )及与细菌 (BT)和硫化氢 (H2 S)关系。方法 从市场购入 5份生猪肉 ,高速捣碎成匀浆 ,分别置于 4 ,10和 2 0℃中 ,在 0~ 5d内测定生猪肉中的腺苷酸 (ATP采用生物发光法 )与BT、H2 S含量 (H2 S采用硝酸银比色法 )。结果 生猪肉中ATP含量随存放温度的上升和时间的延长而下降 ,BT和H2 S含量则反之 ,随存放温度的增高和时间的 (r值分别为 - 0 875 ,- 0 76 4和 - 0 72 8,P值均 <0 0 1)延长而增加 ,呈明显负相关。ATP测定方法 ,检出限比H2 S小 10 9倍。测定所需时间比细菌培养快 1d。结论 ATP可作为评价肉类营养和卫生质量的指标 ,比现行肉类卫生质量指标直接、快速和灵敏 ,对判定生肉保质期有一定实用价值。
- 王胜利舒柏华
- 关键词:鲜度指标ATP生物发光法
- 细胞角蛋白19-mRNA定量检测
- 2008年
- 目的基于水母发光蛋白生物发光免疫分析技术,建立一种细胞角蛋白19-mRNA(CK19-mRNA)定量检测技术。方法用生物发光分析技术检测淋巴细胞的CK19-mRNA。利用RT—PCR对CK19-mRNA进行放大,PCR引物的5′端用生物素标记,然后用交联了地高辛寡核苷酸探针与目标生物素化的DNA模板杂交。杂交复合物与包被在微孔板上的链亲合素结合,加入标记了水母发光蛋白的地高辛抗体与地高辛特异结合,再加入钙离子激发水母发光蛋白发光,发光强度正比予CK19-mRNA的量。结果该技术的线性范围可达5个数量级,标准曲线的直线回归系数r=0.98~0.99,探测灵敏度可达22amol/L的CK19-mRNA产物。重复性检测中,批间变异系数〈70%,批内变异系数〈6%。结论生物发光分析技术是一种灵敏可靠、非放射性的微量CK19-mRNA定量方法。
- 何丽芸王胜利徐顺清朱慧君舒柏华
- 关键词:逆转录聚合酶链反应生物发光