王玉强
- 作品数：18 被引量：12H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程机械工程更多>>
- 以聚乙烯亚胺为骨架的非病毒基因载体的构建及其转染大鼠肝细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 目的 构建交联聚乙烯亚胺（Polyethylenemine,PEI）衍生物PEI-Bu,研究其对大鼠肝细胞系BRL-3A的细胞毒性和转染效率.方法 以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,用凝胶渗透色谱法（GPC）测定分子量,动态光散射法（DLS）测定PEI-Bu/pDNA复合物的粒径和Zeta电位,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力.MTT法榆测PEI-Bu对BRL-3A的细胞毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/pDNA复合物在BRL-3A细胞中的转染效率.结果 GPC 测定分子量为Mw4289Da,多分散指数1.31,复合物的粒径为138-16lnm,Zeta电位为2.4-4.3mV,凝胶电泳表明在质量比大于1时 PEI-Bu 具有复合DNA的能力,在同一浓度下PEI-Bu的细胞的毒性小于PEI 25kDa （p〈0.01）,PEI-Bu/pDNA在质量比为5时达到最高转染效率,高于PEl25kDa （p〈0.01）.并与Lipofectamine2000 相当 （P〉0.05）.结论 PEI-Bu对BRL-3A 细胞是一种低细胞毒性、高转染效率的非病毒基因载体,在肝细胞基因治疗领域中具有潜在的应用前景.
- 王玉强盛净袁丽粉吕楠段诗悦苏靖金拓陆平
- 关键词：聚乙烯亚胺非病毒基因载体细胞毒性转染效率
- 磷脂酰肌醇3-激酶对心脏的调节被引量：2
- 2011年
- 磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinosito1 3-kinase,PI3K)是体内很多生理过程中起关键作用的信号分子,PI3K介导的信号转导通路调节细胞的增生、分化、凋亡等活动。以往研究较多的是PI3K与肿瘤发生发展的关系,最近很多研究发现PI3K介导的信号转导通路对心脏具有重要的调节功能。本文就近年来关于PI3K的结构和功能以及PI3K对心脏的调节的研究作一综述。
- 王玉强盛净
- 关键词：PI3K/AKT信号通路心肌肥大心衰
- 交联聚乙烯亚胺衍生物的构建及其转染COS-7细胞的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:优化构建交联聚乙烯亚胺(Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对非洲绿猴肾成纤维细胞系(COS-7)的转染活性和细胞毒性。方法:以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力,MTT法检测PEI-Bu对COS-7的毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/DNA复合物在COS-7细胞的转染活性。结果:凝胶电泳表明PEI-Bu/DNA在质量比大于1时即具有复合DNA的能力,PEI-Bu的细胞毒性随浓度增大而增大,在同一浓度下PEI-Bu的细胞毒性小于PEI 25kDa,(P<0.05),PEI-Bu/DNA在质量比为5时达到最高转染活性,高于PEI 25kDa(P<0.01),并与Lipofectamine2000相当(P>0.05)。结论:PEI-Bu在COS-7细胞中是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),其在基因治疗领域中具有潜在的应用前景。
- 王玉强臧怡蔡文玮陈谊金拓苏靖盛净
- 关键词：聚乙烯亚胺非病毒基因载体转染效率
- 一种聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法
- 本发明提供了一种聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺衍生物，由PEI-Bu溶解在碱性溶液中，与甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺碳酸酯反应得到。本发明制备的PEG修饰的PEI衍生物结构简单、易于合成；与现有PEI-Bu相比，PEG修饰后的P...
- 王玉强苏靖陈书艳
- 文献传递
- 车身零部件的匹配缺陷及其消除方法的研究
- 该文在阐述了零部件匹配的具体过程和特点的基础上,逐个分析了匹配质量的影响因素.在此基础上,提出了解决匹配缺陷的技术路线.该文应用虚拟装配技术对实际零件进行了理论定位下的虚拟匹配,通过匹配分析得到了零件间形状和尺寸的相对关...
- 王玉强
- 关键词：虚拟装配主成分分析
- 文献传递
- 肝细胞靶向性Gal-Bu对大鼠肝细胞的转染效率检测
- 2013年
- 目的检测肝细胞靶向性半乳糖基化聚乙烯亚胺衍生物Gal-Bu对大鼠肝细胞(BRL-3A)的转染效率。方法对PEI-Bu化学修饰以半乳糖基团制备Gal-Bu,琼脂糖凝胶电泳检测其复合质粒DNA的能力;MTT法检测Gal-Bu对BRL-3A的细胞毒性;以荧光素酶质粒作为报告基因,测定Gal-Bu在BRL-3A细胞的转染效率;半乳糖竞争抑制实验观察Gal-Bu对肝细胞的靶向性。结果琼脂糖凝胶电泳表明在质量比>15时,Gal-Bu具有复合DNA的能力。在5～100μg/mL浓度范围内,Gal-Bu和PEI 25 000的细胞毒性随浓度升高而增大;在同一浓度下,Gal-Bu的细胞毒性小于PEI 25 000(P<0.01)。Gal-Bu/DNA在质量比为50时达到最高转染活性,其数值为PEI 25 000的5.6倍(P<0.01),且接近Lipofectamine 2000。半乳糖竞争抑制实验表明,100 mmol/L的半乳糖可显著降低Gal-Bu的转染效率(P<0.01),但是并不影响PEI-Bu的转染效率(P>0.05)。结论 Gal-Bu是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒肝细胞靶向基因载体,在肝脏疾病的基因治疗领域中具有潜在的应用前景。
- 王玉强盛净陈书艳苏靖
- 关键词：非病毒基因载体半乳糖转染效率
- FOXO3a过表达对内皮祖细胞周期相关蛋白的调控
- 2014年
- 目的:观察FOXO3a(forkhead box O3a)的活性改变对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖和细胞周期相关蛋白表达的影响。方法:将携带突变激活FOXO3a基因的腺病毒载体Ad-TM(triple mutant)-FOXO3a和阴性对照腺病毒载体Ad-GFP体外感染人脐血来源的EPCs。观察EPCs形态学改变,CCK-8分析转染后EPCs增殖情况,Western blot检测FOXO3a蛋白、细胞周期相关蛋白p27kip1以及CDK2的表达水平。结果:构建了的2种腺病毒相关载体被成功转染。形态学改变方面,Ad-TM-FOXO3a组EPCs细胞生长缓慢,集落不明显;Western blot和CCK-8结果显示,Ad-TM-FOXO3a转染组与阴性对照组相比,EPCs增殖被抑制,FOXO3a与p27kip1蛋白过表达,CDK2表达下调。结论:FOXO3a可能通过上调p27kip1蛋白表达,下调CDK2表达,以抑制EPCs增殖。
- 桑甜甜曹青王飞黄黎亚王玉强陈书艳刘芳张建军
- 关键词：内皮祖细胞腺病毒载体细胞增殖
- 一种聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法
- 本发明提供了一种聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺衍生物，由PEI-Bu溶解在碱性溶液中，与甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺碳酸酯反应得到。本发明制备的PEG修饰的PEI衍生物结构简单、易于合成；与现有PEI-Bu相比，PEG修饰后的P...
- 王玉强苏靖陈书艳
- 文献传递
- 新型PEI衍生物在COS-7细胞中的转染与毒性研究
- 2012年
- 目的:寻找一种新型的转染效率高,毒性低的非病毒基因载体。方法:通过化学方法合成Polyimine-MPEI,然后以不同质量比包裹绿色荧光蛋白质粒,检测在COS-7细胞中的转染效率和毒性。结果:在比例从5到100之间,转染效率均比较理想,能达到1.00E+07以上,Polyimine-MPEI的毒性也很小,细胞的生长率均在80%以上,明显高于PEI25KDa对照组。结论:Polyimine-MPEI是一个很有研究前景的聚合物载体,具有高转染效率低毒性的特点,可以通过延长反应时间,增加分子量,增大转染能力。
- 臧怡黄立群王玉强周毅杜子秀
- 关键词：基因载体转染效率细胞毒性
- AGT在高血压合并心肌肥厚大鼠体内表达的研究被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚与血管紧张素原(AGT)的相关性。方法:选用20只18周龄的雄性SHR,为SHR组;选用20只同龄WKY雄性高血压模型对照大鼠,为WKY组,均饲以标准饲料。对两组大鼠分别于0周和12周时采用无创尾套法测量尾动脉收缩压(SBP)和心率,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清AGT、AngⅡ浓度,并于光镜、电镜下评估心肌组织超微结构病变。结果:经ELISA法血清检测,SHR组大鼠血清AGT、AngⅡ水平在0周和12周的时间点均显著高于WKY组大鼠,两组比较差异有统计学意义(tAGT=27.94、t=27.29,tAng II=16.20、t=31.33;P<0.05)。存在心肌病变的SHR组大鼠,12周时血清AGT、AngⅡ浓度水平明显高于0周时的浓度水平,2个时间点AGT、AngⅡ浓度水平比较,其差异有统计学意义(t=15.17,t=13.77;P<0.05),且随着心肌肥厚病变严重性的增加,血清AGT、AngⅡ浓度亦增加。结论:AGT与自发性高血压大鼠中心肌病变有一定的相关性,抑制AGT的表达很有可能会为高血压患者中心肌肥厚的防治提供一种新方法。
- 袁丽粉杜勤王玉强王健
- 关键词：自发性高血压大鼠高血压心肌肥厚血管紧张素原
