曹冠琳
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划引进国际先进农业科技计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- PtLF和PtAG不育结构转化烟草和毛白杨的研究
- 毛白杨(Populus tomentosa Carr.)是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨在花期有飞絮散粉现象,给人们的生产生活带来诸多不便。为获得不飞絮、不散粉的不育毛白杨,将两个不育结构35S-PtLF::PtAG-...
- 曹冠琳安新民张志毅
- 文献传递
- PtAP3不育结构转化毛白杨的研究被引量：3
- 2010年
- 毛白杨是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨雌株在蒴果成熟时有飞絮现象,给人们的生产和生活带来诸多不便。为获得不飞絮的不育毛白杨,将利用不育结构35S-PtAP3-IR-NOS对毛白杨进行转化,经PCR验证,共获得阳性转化植株12株,通过荧光定量检测转基因植株中外源基因AP3的表达量,发现不同株系间表达量一致,差异较小,相对表达量最高的株系为内参的4.96倍,最低的株系为内参的3.02倍。转基因植株中的上游基因LFY、PI的相对表达量与野生型对照相比下降明显,而下游基因SEP2、SEP3、SEP4的相对表达量与野生型对照比较没有太大变化。这些研究结果表明:转35S-PtAP3-IR-NOS不育结构的毛白杨阳性植株中AP3、LFY、PI基因的表达受到明显抑制,对毛白杨花发育将起到一定的抑制作用。本研究为利用转基因手段获得不育材料提供了依据。
- 于来安新民曹冠琳陈仲张志毅
- 关键词：毛白杨
- MdSPDS1基因导入毛白杨的遗传转化体系优化研究被引量：4
- 2010年
- 为了建立农杆菌介导的高效毛白杨遗传转化体系,并大量获得转MdSPDS1基因的转基因毛白杨,对MdSPDS1基因导入毛白杨的遗传转化体系中关键转化因子进行了优化。获得的优化转化体系如下:叶片预培养3d后,用OD600为0.4的菌液侵染7min,再共培养3d。卡那霉素抗性芽的二次筛选中,卡那霉素的选择压分别为20和50mg/L。实验获得毛白杨卡那霉素抗性植株共43株,经PCR检测,其中9株呈阳性,占抗性植株总数的20.9%,优化转化系统的阳性植株转化率达到9.38%。本研究为下一步鉴定基因功能和转基因植株耐盐性的分析奠定了基础。
- 龙萃庞晓明曹冠琳刘颖张志毅
- 关键词：毛白杨农杆菌
- 毛白杨PtLFY在花芽发育中的表达模式与花芽形态分化被引量：7
- 2010年
- 以毛白杨花芽为材料,采用RT-PCR技术分离克隆毛白杨PtLFYcDNA序列,测序结果表明该序列全长1314bp,包含1个开放阅读框,编码377个氨基酸。Alignment分析显示该基因与拟南芥等物种LFY/FLO同源基因所编码的氨基酸相似性达到68%～75%。蛋白结构预测分析表明,在PtLFY蛋白N-端和C-端具有2个高度保守的区域,其中PtLFY-C端由7个α-helix组成Helix-turn-helix结构。采用Real-time qRT-PCR技术检测PtLFY在雌雄花芽发育过程中的表达模式,结果显示从9月13日到翌年1月25日,PtLFY在毛白杨雌雄花芽中持续稳定表达,到2月25日表达量少许下调,但该基因在雄花芽中的相对表达量明显高于雌花芽。解剖分析结果表明,雄花芽形态分化进程明显早于雌花芽,这种差异可能与PtLFY在雌雄花芽发育过程的差异表达存在密切联系。研究结果对于阐明PtLFY在毛白杨雌雄花芽发育和开花中的分子作用机制具有重要的理论意义,为进一步开展毛白杨开花调控研究奠定基础。
- 安新民王冬梅王泽亮王静澄曹冠琳薄文浩张志毅
- 关键词：毛白杨花芽形态分化QRT-PCR
- 杨树不育基因转化毛白杨和烟草
- 本研究将不育基因PTAG-IR::PTLF-IR,PTLF-PTAG-IR,AG-m2和AG-m3转化到农杆菌GV3101中去,再利用农杆菌介导法转化毛白杨雌性无性系5082和雄性无性系鲁毛50。转化过程中使用的叶片分化...
- 曹冠琳安新民王冬梅博文浩张志毅
- 关键词：毛白杨不育基因花发育
- 文献传递
- 杨树花发育关键基因的RNAi、DNM载体转化毛白杨的研究
- 毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨雌株花期产生大量飞絮,给生产生活带来诸多不便。LFY是花分生组织特征基因,控制花启动,毛果杨PTLF（P.trichocarpa）...
- 曹冠琳安新民于来薄文浩王静澄张志毅
- 关键词：毛白杨RNAIDNM
- 文献传递
- 外源突变基因AGM3过表达对烟草开花的抑制和花器官发育的影响被引量：1
- 2011年
- 为了解AGM3基因在异源植物中对开花及花器官发育的影响,采用农杆菌介导法将dominant negative mutation(DNM)结构基因35S-AGM3-E9导入烟草(Nicotianatabacum),经PCR和Southern检测获得了一批阳性转化植株。荧光定量分析结果显示,AGM3在各个转基因株系中均有表达,且不同株系间表达量差异极显著。调查结果分析表明:与野生型植株相比,46.7%的转基因株系未成花,33.3%的转基因株系开花时间平均推迟29.7天,20%的转基因株系开花时期与野生型相同。对花器官形态的观察发现,转基因烟草出现花萼数目减少、花冠产生深裂、花瓣和雄蕊形状改变、雄蕊数目增多或减少等变异。这些研究结果表明35S-AGM3-E9有效地抑制了花的发育,为利用转基因手段获得不育材料的研究奠定了基础。
- 曹冠琳安新民龙萃薄文浩张志毅
- 关键词：DOMINANTNEGATIVE烟草
- PTLF-PTAG-IR对转基因烟草开花的抑制效应被引量：3
- 2010年
- PTLF(LEAFY同源基因)和PTAG(AGAMOUS同源基因)是杨树中控制花发育的重要基因,为了解RNA干涉同时抑制PTLF和PTAG对花发育的影响,本研究采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将35S::PTLF-PTAG-IR导入烟草(Nicotiana tabacum)。经PCR检测获得了15株阳性转化株系,进一步的Southern分析证实PTLF-PTAG-IR基因已整合到烟草基因组中。荧光定量分析结果显示,转基因烟草内源NFL(LEAFY同源基因)和NAG1(AGAMOUS同源基因)的表达量均低于野生型。对开花时间调查的结果表明:与野生型烟草相比,53.3%的转基因株系开花受到完全的抑制,26.7%的转基因株系开花时间平均推迟34.3d,仅20%的转基因株系与野生型在同一时期开花。另外,对转基因烟草花器官的观察发现花瓣形态,雄蕊着生方式、数目等方面发生变异,这些研究结果表明过量表达35S::PTLF-PTAG-IR对烟草花发育起到抑制作用,本研究将为利用转基因手段获得不育材料提供参考。
- 曹冠琳安新民薄文浩于来龙萃马开峰张志毅
- 关键词：RNAI花器官发育烟草
