安新民
- 作品数：129 被引量：915H指数：14
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 柑桔酸性转化酶基因家族成员的克隆及特性分析被引量：9
- 2004年
- 分析植物液泡和细胞壁酸性转化酶基因的保守区序列 ,设计 2对PCR引物 ,以温州蜜柑基因组DNA为模板 ,采用PCR方法扩增出长分别为 74 1bp(A)和 5 2 4bp(B)的 2个DNA片段 ,克隆入pUCm T载体测序 ,序列已在GenBank中登记 (登记号分别为AY0 2 94 81和AF332 881)。在GenBank中进行同源性检索 ,结果表明片段A编码的氨基酸与植物液泡酸性转化酶同源性较高 ,与胡萝卜、马铃薯和番茄同源性分别为 79%、79%和 78%。片段B编码的氨基酸序列与草莓、拟南芥和豌豆细胞壁转化酶同源性分别为 78%、78%和 77%。推测A和B分别定位于液泡和细胞壁。运用Clustalx和Bioedit软件包对已获得的柑桔转化酶基因家族的 7个基因序列进行分析 ,结果表明 7个基因分属转化酶基因家族的 4种类型。推测A和B为 2个新成员 ,分别属于柑桔液泡酸性转化酶基因Ⅱ型(CUAI2 )和细胞壁酸性转化酶基因Ⅱ型 (CUCWI)。Southern杂交结果表明 ,CUCWI和CSCWI 2个探针有时会出现较弱的杂交干扰信号 ,可采用CSCWI与CUCWI同源性较低的另一段序列制作探针进行杂交 ,也可通过缩短杂交时间、提高杂交和洗膜的温度以及降低洗膜SSC的浓度等措施来降低 ;
- 安新民张上隆徐昌杰陶俊
- 关键词：柑桔酸性转化酶基因家族果实发育
- 毛白杨NBS型基因PtDRG01原核表达研究被引量：6
- 2008年
- 为了分析毛白杨NBS型抗病基因PtDRG01(EF157840)编码蛋白的特性,研究构建了该基因的原核表达载体pGEX-Pt01,并导入大肠杆菌XA90,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析证明,该特异蛋白的分子量约为79kD。对原核表达体系以及融合蛋白的表达特性进行优化与分析表明:最佳诱导表达条件为1mmol/L IPTG在37℃下诱导4h,所表达的融合蛋白为胞内分泌的可溶性蛋白。利用谷胱苷肽-琼脂糖亲和层析柱纯化获得了电泳纯级的目标蛋白,为PtDRG01基因编码蛋白的功能鉴定研究奠定了基础。
- 李琰张谦李海霞刘婷婷安新民张志毅
- 关键词：毛白杨原核表达蛋白纯化
- 植物杂种优势遗传机理研究被引量：11
- 2007年
- 杂种优势是广泛存在的遗传学现象。虽然对杂种优势的认识和利用已有相当长的时间,并且在生产实践中取得了惊人的成果,但对于杂种优势产生的遗传学机理尚未十分清楚。本文通过数量遗传学、分子遗传学和基因组学等方面所获得的研究成果,对植物杂种优势机理研究进行了较为详尽地评述,并简要介绍了杂种优势的最新研究进展,认为杂种优势的遗传学原因应全面包括显性效应、超显性效应和上位效应。文章最后对杂种优势研究的未来发展方向进行了展望,即应在DNA、RNA以及蛋白质水平上进行更深入、更全面的研究。
- 李博张志毅张德强李善文安新民
- 关键词：杂种优势基因效应QTLS
- 毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。
- 刘军梅李昊崔东清叶梅霞张志毅安新民
- 关键词：毛白杨克隆
- 锦叶栾光合特性变化与光合电子传递关键基因KpPetC的克隆及特性分析
- 2024年
- 细胞色素b6f复合体是植物光合电子传递中潜在的限速因子,增强该复合物的活性,将有助于提高植物光合作用的效率,因此开展光合电子传递关键基因的研究具有重要的科学意义。该研究以锦叶栾叶色变异现象为切入点,以栾树及其突变体锦叶栾为材料,利用Li-COR6800光合分析仪测量栾树和锦叶栾生长期内的光合生理指标;结合转录组数据克隆光合关键基因PetC并对其进行生物信息学分析;采用实时定量PCR分析KpPetC基因在不同组织、不同发育时期叶片中的表达模式及与净光合速率之间的相关性;通过P2A串联KpPetC和eGFP构建KpPetC超表达载体,并在84K杨中进行异源遗传转化。结果显示,锦叶栾净光合速率和蒸腾速率普遍低于栾树,胞间CO_(2)浓度显著高于栾树,非气孔限制是其光合速率减弱的主导因素;7月强光高温的天气可能导致锦叶栾光合系统元件受损,产生更严重的光抑制,从而使锦叶栾对强光的耐受性减弱;KpPetC在根、茎、叶、花芽和种子中呈组成型表达,但在叶片中高丰度表达,且与其他组织间存在显著差异;7、8、9月栾树叶片中KpPetC基因的表达量均显著高于锦叶栾,净光合速率与KpPetC基因表达量之间存在正相关关系,推测锦叶栾KpPetC基因表达的下调可能是光合速率下降的主要原因之一。总之,与栾树相比,锦叶栾光合作用能力明显减弱,这可能是KpPetC基因的表达受到抑制,使得光合通路元件受损,最终影响光合电子传递速率。该研究为今后深入研究PetC基因的功能奠定了基础,对于光合电子传递机制的研究具有重要的科学意义。
- 鲁海琳吴茹茜安新民
- 关键词：光合作用非气孔限制基因克隆
- RNAi技术沉默PtDrl01基因对毛白杨病程相关蛋白基因表达的影响
- 抗病（R）基因是植物抗病免疫系统中的关键组成部分,该类基因编码蛋白通常包含了保守的功能结构域如核苷酸结合位点（Nucleotide binding site,NBS）和富含亮氨酸重复（Ieucine rich repea...
- 刘文凤张谦郑会全雷杨林善枝安新民张志毅
- 关键词：毛白杨RNAI技术QRT-PCR
- 文献传递
- 外源突变基因AP1M2转化毛白杨的研究被引量：2
- 2014年
- 为探究毛白杨开花调控分子机制并获得不飞絮毛白杨株系,利用农杆菌介导法将显性负突变结构基因AP1M2转入毛白杨中,经PCR检测,共获得阳性转化植株7株。通过RT-qPCR检测转基因植株中外源基因AP1M2表达量,发现各株系间的表达水平差异显著,最高为内参的5.41倍,最低为1.89倍。对转基因毛白杨中内源PtAP1和其他开花关键基因的表达量进行检测,发现内源AP1的表达受到抑制,表达量明显下调;其他开花关键基因LFY、AP3、PI、SEP3和FT1等的表达量也有不同程度的降低,而FT2表达量并没有明显变化。这些研究结果表明转AP1M2毛白杨中AP1、LFY、AP3、PI、SEP3和FT1的表达受到明显抑制,对毛白杨花发育将有一定影响。
- 陈仲王静澄安新民
- 关键词：毛白杨开花
- 用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用
- 本发明公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的引物组及其应用。本发明首先公开了用于鉴定毛白杨单倍体或纯合二倍体的PCR引物。本发明基于毛白杨基因组数据信息，设计并筛选获得分别位于毛白杨19条染色体上的19对PCR引物，其...
- 安新民李娟高凯杨雄陈仲杨晓宇郭婷赵田芸
- 文献传递
- 栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法
- 本发明公开了一种栾树体细胞胚胎发生及植株再生的培养方法；所述方法包括：(1)以栾树种子为外植体进行培养获得栾树无菌苗；(2)将栾树无菌苗的叶片及茎段接种到愈伤诱导培养基中培养获得胚性愈伤组织；(3)将胚性愈伤组织在体细胞...
- 安新民杨雄高凯郭婷杨晓宇赵田芸
- 毛白杨PtSEP3-1基因启动子的克隆分析及其表达载体构建被引量：10
- 2010年
- SEP(SEPALLATA)类基因属于花器官发育ABCDE模型中的E类基因,拟南芥中的研究表明该类基因可能具有控制花器官形态发育以及激活其它类型基因的功能,是一类花发育过程中的关键基因。因此,研究杨树SEP类基因启动子表达特性对于杨树的开花调控研究具有重要意义。本文根据毛白杨SEP3基因和毛果杨基因组序列设计引物,通过PCR获得了PtSEP3-1基因上游2000bp的序列。序列分析结果表明该序列具有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box,还包含大量光响应元件ACE、Box I和Box4等,此外还有脱落酸响应元件ABRE,赤霉素响应元件GARE-motif以及胁迫响应元件HSE、TC-richrepeats等。进一步构建了一个以PtSEP3-1启动子驱动GUS基因的植物表达载体pPtSEP3-1protest,为该启动子的功能鉴定奠定了基础。
- 王静澄李昊崔东清刘军梅叶梅霞张志毅安新民
- 关键词：毛白杨启动子
