常晨
- 作品数:24 被引量:43H指数:4
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- 发文基金:江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 提高猪圆环病毒2型产量的方法比较
- 2015年
- 为了获得较高的病毒滴度,降低疫苗成本,选用4种刺激剂:二磷酸氯喹(CQ)、刀豆素(Con A)、D-氨基葡萄糖(D-G)和β-甲基-环糊精(MβCD),采用单独刺激和联合刺激感染PCV2的PK-15细胞,研究PCV2增殖情况。结果显示,MβCD和D-G单独作用均能显著促进PCV2的感染和复制,且效果优于另外2种单独作用;采用3 mmol/L D-氨基葡萄糖和2.5 mmol/L MβCD联合作用方法,在病毒5次传代期间病毒滴度显著高于单独作用组,最高滴度达到107.3TCID50/m L,该法有助于提高PCV2复制效率,提高疫苗的产量。
- 华涛张雪花唐波常晨刘国阳冯磊吴培培张道华侯继波
- 关键词:PCV2病毒滴度D-氨基葡萄糖
- 猪伪狂犬病病毒野毒SYBR-Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立被引量:2
- 2017年
- 根据猪伪狂犬病病毒(PRV)g I/g E基因序列,设计一对特异性引物,建立了鉴别PRV野毒感染的荧光定量PCR方法。该方法灵敏度达到102拷贝/μL,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、乙脑病毒(JEV)不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;用PRV强毒攻毒仔猪,荧光定量PCR比普通PCR能更灵敏检出组织带毒量。该方法可以用于猪的组织样品,如脑、肺、扁桃体、淋巴结等样品中伪狂犬野毒的定量,可用于临床伪狂犬野毒感染的早期检测和定量分析猪伪狂犬病毒感染程度。
- 常晨张道华唐波刘国阳华涛侯继波
- 关键词:猪伪狂犬病病毒荧光定量PCR野毒
- 猪细小病毒在ST细胞中增殖规律的动态分析被引量:2
- 2015年
- 将猪细小病毒接种于ST细胞,于不同时间点收获病毒测定其病毒滴度与病毒拷贝数,以此分析该病毒在ST细胞上的增殖规律。细胞于感染后48 h开始出现细胞病变,84 h细胞出现脱落和崩解。TCID50结果显示,病毒感染后18 h即能检出病毒滴度,随后逐渐升高至72 h达到峰值(107.2/m L),其后逐渐下降。通过SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法测定不同时间病毒体外感染细胞后的复制动态水平,病毒含量的增长于108 h达到峰值随后逐渐下降。通过对PPV在ST细胞中的体外复制动态分析结果表明感染后96~108 h为最佳收毒时间,这为利用细胞增殖病毒生产疫苗提供重要参考。
- 唐波张道华张雪花常晨刘国阳王永帅唐应华华涛侯继波
- 关键词:猪细小病毒ST细胞病毒复制
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用
- 本发明提供表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用,属于生物技术领域。表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体,是将猪细小病毒VP2蛋白编码基因插入原核表达载体pEASY-blunt?E1后得到。本发明还提供表达猪细...
- 华涛张道华唐波张雪花唐应华常晨刘国洋陆吉虎吴培培于漾侯继波
- 猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、其制备方法及用途
- 本发明提供了一种猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、及其制备方法和用途,该保护剂特征为无明胶、无蛋白。该保护剂包括蔗糖2%‑8%、异麦芽酮糖3%‑6%、D‑山梨醇1%‑5%、甘油1%‑5%、羟丙甲纤维素0.1%‑5%、蛋氨酸...
- 赵艳红吕芳卢宇常晨左晓昕邓碧华张金秋
- 文献传递
- 1株猪源乙型脑炎病毒株的免疫原性研究被引量:2
- 2015年
- 将从江苏地区筛选出的1株增殖性能稳定猪源JEV JS01毒株作为疫苗,用毒株制备灭活疫苗进行免疫原性研究。试验采用经过细胞传代获得JEV JS01病毒液(1×10^(7.5)TCID50/m L),以甲醛灭活后加入油佐剂,制备猪源乙型脑炎灭活疫苗。腹腔免疫9~12 g小鼠,攻毒保护结果显示对照组小鼠全部死亡,免疫组90%以上健活。分别肌肉注射免疫仔猪及后备母猪,不同时间采集血清测定JEV ELISA抗体。检测结果显示,免疫后试验猪血清抗体效价较免疫前均有显著提高,后备母猪免疫8个月后抗体仍全部为阳性,抗体水平与免疫剂量呈正相关性。试验表明该猪源乙脑病毒JS01毒株具有良好的免疫原性,可以用作疫苗用毒株。
- 唐波张道华张雪花常晨刘国阳华涛侯继波
- 关键词:免疫原性灭活疫苗
- 一种猪圆环病毒和猪支原体肺炎的疫苗组合及其制备方法
- 本发明公开了一种猪圆环病毒和猪支原体肺炎的疫苗组合,包括灭活的猪圆环病毒1型抗原、灭活的猪肺炎支原体、猪身上可接受的载剂、疫苗佐剂和血清,其中所述灭活的猪圆环病毒1型抗原的总量占比设为5‑15%,所述灭活的猪肺炎支原体的...
- 常晨
- 文献传递
- 一种抗山羊副流感的饲料添加剂制备方法及应用
- 本发明所述一种抗山羊副流感的饲料添加剂制备方法及应用,其中组合物包括以下重量份数的组分:抗山羊副流感卵黄抗体65‑69份、抗山羊副流感转移因子0.5‑1.8份;饲料添加剂包括以下重量份数的组分:抗山羊副流感卵黄抗体65‑...
- 常晨朱亚露
- 文献传递
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用
- 本发明提供表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用,属于生物技术领域。表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体,是将猪细小病毒VP2蛋白编码基因插入原核表达载体pEASY‑blunt E1后得到。本发明还提供表达猪细...
- 华涛张道华唐波张雪花唐应华常晨刘国洋陆吉虎吴培培于漾侯继波
- 文献传递
- 南京地区1株猪伪狂犬病毒的分离与鉴定被引量:5
- 2016年
- 于2013年从南京某猪场送检发病仔猪脏器中分离获得1株病毒。病样组织液上清经BHK细胞分离培养后,利用PCR和间接免疫荧光反应进行鉴定,PCR可以扩增出PRV gE基因的全长片段,且在间接免疫荧光检测中呈现阳性荧光反应。将命名为NJ株的分离病毒接种家兔,被接种的家兔很快出现瘙痒、死亡等伪狂犬病症状。与以往发表的伪狂犬病毒gE基因序列比对及进化树分析结果显示,分离株属于一个相对独立的分支。由中国兽药监察所提供的伪狂犬病阳性血清对分离株有一定的中和能力。根据实验结果推测,南京某猪场流行的伪狂犬病毒存在一定的抗原变异。
- 常晨张道华唐波刘国阳华涛侯继波
- 关键词:伪狂犬病病毒GE基因