孙艳辉
- 作品数：21 被引量：30H指数：3
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- 重组人血管内皮抑素敷贴治疗浅表血管瘤模型的实验研究
- 目的观察重组人血管内皮抑素(YH-16)瘤体表面涂擦对鼠浅表血管瘤模型的疗效,并与YH-16瘤内注射治疗及临床常用药物平阳霉素(PYM)、曲安舒松涂擦和注射治疗相比较,为下一步YH-16敷贴治疗浅表血管瘤提供实验依据。方...
- 丁雄辉金先庆张翅梁睿赵利华郭振华孙艳辉张艳
- 文献传递
- 沉默结缔组织生长因子基因重组腺病毒的构建及功能验证被引量：2
- 2010年
- 目的:构建沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-siCTGF,并进行功能验证。方法:选取已验证的能高效沉默CTGF基因的靶序列,克隆入载体pSES-HUS中;将质粒线性化处理后与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转染大肠埃希菌BJ5183,构建重组腺病毒载体Ad-siCTGF;腺病毒载体用PacI酶切线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒;采用"乒乓交互感染法"提高病毒滴度。用此病毒感染4T1细胞,行实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)及Western印迹法验证其沉默效果。结果:PacI酶切电泳证实重组腺病毒载体Ad-siCTGF构建成功,扩增纯化后测定重组病毒Ad-siCTGF的滴度为2.6×1010pfu/mL。感染此病毒后,4T1细胞中CTGF mRNA表达水平下调至36.27%,蛋白表达水平下调至31.56%。结论:成功构建能沉默CTGF基因的重组腺病毒,为进一步研究CTGF在肿瘤中的作用机制奠定了基础。
- 梁睿康权谭俊杰赵利华索涛莉孙艳辉金先庆罗庆
- 关键词：RNA干扰
- ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。
- 牟廷刚金先庆赵利华丁雄辉陈建飞孙艳辉李昆昆王士奇
- 关键词：多药耐药相关蛋白类肺肿瘤维甲酸
- 外源性人多药耐药基因转染对兔骨髓单个核细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2010年
- 目的：观察外源性人多药耐药基因（human multidrug resistance gene 1, hMDR1）对新西兰兔骨髓单个核细胞（mononuclear cells, MNCs）生物学行为的影响.方法：用携带目的基因hMDR1和绿色荧光蛋白（green fluorescence protein, GFP）报告基因的复制缺陷型重组腺病毒（rAd-hMDR1-GFP）转染原代培养的MNCs以获取hMDR1基因修饰的MNCs （MNCs-rAd-hMDR1-GFP）,荧光显微镜和FCM法检测转染效率;MTT法绘制MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞生长曲线;FCM检测MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞周期及细胞凋亡情况;RT-PCR及Western印迹法从基因和蛋白水平检测MNCs-rAd-hMDR1-GFP细胞内hMDR1的表达;柔红霉素（daunorubicin, DNR）泵出实验检测导入hMDR1基因的外排泵生理功能.结果：感染复数（multiplicity of infection, MOI）为100时,rAd-hMDR1-GFP对MNCs的转染效率为30%～35%,且不影响MNCs增殖生长;FCM结果提示,rAd-hMDR1-GFP对MNCs细胞周期及凋亡无影响（P＞0.05）;rAd-hMDR1-GFP转染72 h后hMDR1转录水平和P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）表达水平均明显升高（P＜0.01）,且外源性hMDR1能发挥外排泵功能（P＜0.01）.结论：rAd-hMDR1-GFP能将外源性hMDR1基因高效导入兔骨髓MNCs并稳定功能性表达,不影响MNCs细胞周期、细胞凋亡及细胞增殖生长等生物学特性,为进一步研究hMDR1基因的骨髓保护作用提供实验依据.
- 赵利华郭振华金先庆丁雄辉孙艳辉王士奇
- 关键词：肿瘤治疗方案MDR骨髓
- 新耐药基因HA117多克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的制备HA117多克隆抗体。方法以HA117表达质粒pAdTrack-HA117为模板,PCR扩增HA117基因,扩增产物转入BL21(DE3)感受态细胞,进行HA117蛋白诱导表达,采用SDS-PAGE检测表达产物。纯化HA117蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。通过间接ELISA检测其效价。将转染携带HA117重组腺病毒的HEK293细胞为实验组,未转染的HEK293细胞为对照组,用细胞免疫荧光和Western blot方法检测其过表达的HA117蛋白,验证制备的HA117多克隆抗体的特异性。结果成功获得HA117多克隆抗体,间接ELISA法检测显示抗HA117血清效价为1∶729 000。细胞免疫荧光和Western blot检测示制备的HA117多克隆抗体可以特异性识别HA117抗原蛋白。结论获得了效价和特异性较高的HA117多克隆抗体。
- 陈建飞金先庆丁雄辉孙艳辉赵利华郭振华王士奇
- 关键词：多克隆抗体抗体制备
- 肺表面活性物质微创给药治疗早产儿呼吸窘迫综合征临床及随访研究被引量：6
- 2023年
- 目的探讨肺表面活性物质微创给药(LISA)技术与传统的气管插管-使用肺表面活性物质(PS)-拔管(INSURE)技术治疗早产新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的临床治疗效果和预后效果。方法回顾性分析重庆医科大学附属妇女儿童医院新生儿科2019年3月至2021年2月收治的187例NRDS早产儿(胎龄24~31^(+6)周,且出生体重<1500 g)住院期间及出院后矫正年龄1岁内的随访资料,使用LISA注入PS的纳入LISA组,使用INSURE注入PS的纳入INSURE组,其中LISA组144例,INSURE组43例。采用倾向性评分匹配法对组间混杂因素进行矫正,获得组间协变量均衡样本(2组各39例)。采用t检验、χ^(2)检验等统计分析方法比较2组患儿临床治疗效果及体格发育、听力和视力发育、神经系统发育、呼吸系统疾病等预后情况。结果1.与INSURE组相比,LISA组支气管肺发育不良(BPD)[12例(33.3%)比23例(63.9%)]和视网膜病变(ROP)[13例(36.1%)比26例(72.2%)]发生率较低,差异均有统计学意义(χ^(2)=6.727,P=0.009;χ^(2)=9.455,P=0.002)。轻度BPD[8例(22.2%)比16例(44.4%)]和Ⅰ~Ⅱ期ROP[11例(30.6%)比22例(61.1%)]发生率差异均有统计学意义(χ^(2)=4.000,P=0.046;χ^(2)=6.769,P=0.009),而中重度BPD和≥Ⅲ期ROP差异均无统计学意义(均P>0.05)。2.两组患儿住院期间PS重复使用、72 h内机械通气率、气胸/肺出血、Ⅲ~Ⅳ度脑室周围-脑室内出血/脑白质软化、Ⅱ~Ⅲ期新生儿坏死性小肠结肠炎、败血症、异常振幅整合脑电图、矫正胎龄36周病死率、总吸氧时长、住院时长等差异均无统计学意义(均P>0.05)。3.出院后矫正年龄1岁内随访:宫外体质量、身长和头围发育、视力发育、听力发育、矫正胎龄40周新生儿行为神经评分、矫正月龄6个月及矫正年龄1岁时Bayley婴幼儿发育量表评分、肺炎、呼吸道疾病再住院等差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对胎龄24~31^(+6)周且出生体重<1500 g早产NRDS患儿进行治疗
- 孙艳辉钟晓云欧姜凤吴艳陈文廖翎帆秦诺赵祥群龚华
- 关键词：新生儿呼吸窘迫综合征肺表面活性物质微创外科技术
- 跨胎盘RNA干扰在先天畸形模型鼠研究中的意义被引量：3
- 2013年
- 目的应用跨胎盘RNA干扰技术抑制胚胎鼠骨形态发生蛋白4（BMP4）基因，为获取基因下调小鼠探索经济高效技术。方法构建发育相关基因BMP4下调质粒后通过尾静脉向孕鼠注射Ringer’s液、pSES质粒、pSESSiBMP4质粒。部分孕鼠注射48h后取出胚胎观测胚胎发育变化，并应用RT—PCR及Westernblotting检测BMP4基因mRNA和蛋白质；部分孕鼠自然分娩后研究子代鼠生长发育变化。结果在mRNA水平，pSES-SiBMP4组胚胎BMP4基因较Ringer’S组、pSES绢分别下调（29．4±5．0）％，（42．2±9．2）％（P％0．05）；在蛋白质水平，pSES-SiBMP4组胚胎BMP4基因较Ringer’S组、pSES组分别下调（27．0±6．4）％、（31．1±5．8）％（P〈0．05）。pSES-SiBMP4组胚胎鼠头部、胃肠道及脊柱发育异常。新生子代鼠中pSES-SiBMP4组出现癫痫，肠息肉，先天性巨结肠。结论胚胎鼠早期跨胎盘RNA干扰现实可行，跨胎盘SiBMP4可下调子代鼠基因。该方法叮用来研究基闪功能，构建先天性巨结肠，诱导肠息肉形成。
- 金鑫郭振华向丽丁雄辉孙艳辉赵占波刘宏刘靓陈中关金先庆
- 关键词：RNA干扰骨形态发生蛋白4小鼠
- GSK-3β、PTEN、PLK1在儿童急性髓系白血病中的表达及意义被引量：3
- 2013年
- 目的探讨糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、与张力蛋白同源的位于第10号染色体磷酸酶基因(PTEN)、Polo样激酶1(PLK1)在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及意义。方法 RT-PCR方法检测实验组(33例初诊AML患儿的骨髓)和对照组(10例正常骨髓)骨髓单个核细胞(BMMNC)中GSK-3βmRNA、PTEN mRNA、PLK1mRNA的表达,ELISA方法检测GSK-3β蛋白及P-GSK-3β的表达。结果实验组中GSK-3βmRNA、GSK-3β蛋白、PLK1mRNA的表达量高于对照组(P=0.012;P=0.014;P=0.040);PTEN mRNA、P-GSK-3β的表达量低于对照组(P=0.012;P=0.002)。GSK3β蛋白与PTEN mRNA的表达呈负相关(r=-0.415,P=0.016);GSK-3βmRNA、GSK3β蛋白与PLK1mRNA的表达成呈正相关(r=0.388,P=0.026;r=0.427,P=0.013)。外周血白细胞计数增高者GSK-3β蛋白表达增高;临床危险度高者GSK-3βmRNA、GSK-3β蛋白的表达增高,P-GSK-3β的表达降低。结论在儿童AML中,GSK-3β和PLK1可能起癌基因的作用,PTEN可能起抑癌基因的作用。
- 王妍徐酉华胡艳妮孙艳辉金鑫杨桂存
- 关键词：GSK-3ΒPTENPLK1前体细胞淋巴母细胞白血病淋巴瘤
- ATRA耐药基因HA117编码蛋白在常见实体肿瘤的表达及临床意义
- 目的 探讨ATRA相关多药耐药基因HA117的编码蛋白在成人肠腺癌、肺癌、乳腺癌及儿童淋巴瘤、肾母细胞瘤、神经母细胞瘤组织中的表达特点，探讨HA117基因表达的临床意义。
- 刘行段文娟牟廷刚丁雄辉孙艳辉王士奇金先庆
- 关键词：多药耐药实体瘤维甲酸
- ATRA耐药相关新基因HA117作用、机制及其临床意义研究
- 第一部分HA117在急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4中耐药作用及其机制的体外实验研究 目的:采用重组腺病毒介导的基因高表达技术，评价新基因HA117在两种人急性髓系白血病(AML)细胞株HL-60和NB4中的功能...
- 孙艳辉
- 关键词：重组腺病毒多药耐药急性髓系白血病化疗药物
