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卜玲毅: 作品数：15 被引量：45H指数：5; 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金卫生行业科研专项国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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我国内脏利什曼病山丘疫区与平原疫区利什曼原虫SSUrDNA多变区序列分析被引量：7: 2000年; [目的 ]分析我国内脏利什曼病 (VL)山丘疫区与平原疫区利什曼原虫 (L .d )分离株小亚基核糖体DNA (SSUrDNA)多变区的序列差异。 [方法 ]nDNA进行PCR扩增 ,将扩增出的SSUrDNA基因的特异片段克隆于 pGEMR TEasyVector上 ,采用通用引物M 13进行PCR扩增 ,全自动测序仪测序。 [结果 ]序列分析显示 ,扩增的 5株利什曼原虫SSUrDNA序列大小均为 392bp ;序列差异均发生在两个独特序列区 (UQ Ⅰ和UQ Ⅱ ) ;山丘疫区L .d甘肃分离株和四川分离株均在UQ Ⅱ区上有 2个相同的碱基突变 ,L .d甘肃分离株UQ Ⅰ区上有 1个碱基突变 ;无移码突变。 [结论 ]山丘疫区分离株与平原疫区分离株之间的碱基序列有差异 ,平原疫区L .d山东分离株与婴儿利什曼原虫 (L .infantum); 卜玲毅胡孝素敬保迁易桃林

我国山丘疫区杜氏利什曼原虫LACK保护性抗原基因克隆和序列分析被引量：4: 2002年; 利什曼原虫的LACK抗原是利什曼原虫的蛋白激酶C受体的同源物 ,是新发现的一种抗原蛋白。本实验用分子克隆的方法获得我国山丘疫区杜氏利什曼原虫编码LACK保护性抗原的基因片段 ,测序并对其序列分析比较。我国山丘疫区杜氏利什曼原虫 (L dSC10 )LACK抗原基因片段的大小为 94 2bp ,与GenBank中LACK的核苷酸序列一致性在 94 %以上 ,呈高度同源性 ;推导的氨基酸序列与GenBank中LACK的氨基酸序列一致性达 95 %以上 ,具有高度保守性 ;该蛋白质属于WD蛋白家族 ,有重要的生物学意义。; 卜玲毅胡孝素易桃林; 关键词：利什曼原虫聚合酶链反应克隆

Difference in DNA sequences in SSU rDNA variable regions among pathogens isolated from different epidemic foci of visceral leishmaniasis in China: 2002年; To confirm the existence of point mutations in the SSU rDNA variable regions of 5 Leishmania donovani (L d ) isolates from different epidemic foci in China Methods Specific SSU rDNA fragments from nuclear DNA of 7 Leishmania species/isolates were amplified by PCR and then cloned into pGEM R T Easy Vectors After that, the specific fragments were sequenced by an automated DNA sequencer Results Sequence analysis showed that the amplified DNA fragments of 7 Leishmania species/isolates were all 392 bp in length All 5 point mutations were located in two unique sequence blocks (UQ Ⅰ and UQ Ⅱ), and no insertions or deletions were found The identities of comparison of Leishmania in GeneBank were more than 98% Conclusion Five point mutations exist in the SSU rDNA variable region of 5 L d isolates from different epidemic foci of visceral leishmaniasis (VL) in China Sequence differences of the SSU rDNA variable region exist among L d isolates from different foci; 胡孝素卜玲毅马莹王雅静敬保迁易桃林; 全文增补中

日本血吸虫Mr23000抗原与白细胞介素-12多价DNA疫苗诱导小鼠保护性免疫的研究被引量：8: 2005年; 目的研究能共同表达日本血吸虫Mr23000膜抗原(Sj23)与白细胞介素-12(IL-12)的多价DNA疫苗PV-IL12-Sj23诱导BALB/c小鼠免疫保护作用。方法在多价DNA疫苗PV-IL12-Sj23和PV-IL12的基础上,构建空白质粒PV和仅表达Sj23的质粒PV-Sj23。50只BALB/c小鼠分为5组,每组10只,分别注射多价DNA疫苗PV-IL12-Sj23、表达Sj23的质粒PV-Sj23、表达IL-12质粒PV-IL12、空白质粒PV和生理盐水,100μg/只,免疫1次。4周后每只鼠攻击感染40±2条尾蚴,42d后剖杀,计数成虫及肝内虫卵数。结果成功地构建了空白质粒PV和只表达Sj23的质粒PV-Sj23及多价DNA疫苗PV-IL12-Sj23。PV-IL12-Sj23组和PV-Sj23组分别获得了45.5%和27.2%的减虫率,两组比较差异有显著性(P<0.05),减卵率分别为58.4%和33.9%。结论多价DNA疫苗PV-IL12-Sj23可诱导BALB/c小鼠产生较显著的抗血吸虫免疫保护作用,且保护性效果比单价DNA疫苗PV-Sj23好。; 卜玲毅石佑恩甘燕朱晓华宁长修朱红刚; 关键词：日本血吸虫 DNA疫苗诱导保护性免疫多价DNA疫苗 SJ23

利什曼原虫中国分离株SSU rDNA多变区序列分析被引量：7: 2001年; 目的分析我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株的 SSU r DNA多变区序列差异。方法 n DNA进行PCR扩增 ,将扩增出的 SSU r DNA基因的特异片段克隆于 p GEMR-T Easy Vector上 ,采用通用引物 M1 3进行 PCR扩增 ,全自动测序仪测序。结果序列分析显示本文报道的荒漠、山丘疫区的 2株利什曼原虫 (L.d.XJ771、L.d.SC6)的 SSU r DNA序列大小均为 3 92 bp;序列差异发生在两个独特序列区 (UQ- 和 UQ- ) ,无移码突变 ;与 Gene Bank中的利什曼原虫比较分析 ,同源性在 98%以上。结论我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株之间的 SSU r DNA多变区的碱基序列有差异 ;荒漠疫区分离株 L.d.XJ771与国际标准株 L.d.DD8的 SSU r; 卜玲毅胡孝素敬保迁马莹易桃林; 关键词：利什曼原虫聚合酶链反应克隆基因变异

北京市密云县野栖鼠感染田鼠巴贝西虫的检测被引量：2: 2013年; 针对2012年6月于北京市密云县辖区捕获的15只野栖鼠，检测其巴贝西虫感染状况。通过制备薄血涂片及采集心、肺组织样本提取基因组，结合镜检及聚合酶链式反应确定感染阳性样本，对巴贝西虫核糖体小亚基编码基因虫种特异片段进行扩增并测序，通过序列对比及进化树构建对野栖鼠感染的巴贝西虫进行同源性分析及虫种鉴别。本次检测的野栖鼠中1份社鼠Niviventerconfucianus血液镜检阳性，对应的心、肺组织样本检测到巴贝西虫虫种特异DNA片段，同源进化分析表明，该虫株与我国浙江、福建、台湾地区的田鼠巴贝西虫分离株具有高度同源性，属于田鼠巴贝西虫Babesiamicroti。北京市密云县野栖鼠首次被证实存在感染田鼠巴贝西虫的情况。; 王振生王小梅窦相峰李旭任海林刘娟卜玲毅王恒; 关键词：聚合酶链式反应

我国黑热病不同疫区病原体是否存在与疾病类型相关的分子水平差异——20年分子生物学技术系列研究被引量：2: 2011年; 中国的内脏利什曼病(也称为黑热病)传统上分为平原、山丘和荒漠三个不同类型的疫区,不同疫区的临床表现和流行病学特征有明显差异。这种差异是否可在不同疫区病原体分离株的分子水平上表现出来?如果是的话,这些分子水平的差异可否作为分子标记对不同疫区的分离株加以鉴别?本文总结了20年来本课题组通过动基体DNA、nDNA杂交、PCR-SSCP、RAPD及SSU rDNA可变区和LACK基因序列测定等方法进行的技术,结果显示:来自中国不同疫区的利什曼原虫分离株在分子水平上存在异源性,为不同类型利什曼病的防治对策提供理论依据。; 马莹卜玲毅胡孝素; 关键词：利什曼原虫

利什曼原虫核酸疫苗的研究现状被引量：1: 2000年; 卜玲毅胡孝素; 关键词：利什曼病

杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达被引量：1: 2002年; 目的　在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法　以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果　 1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论　得到了高效表达的LACK纯化蛋白。; 卜玲毅胡孝素敬保迁王雅静马莹; 关键词：利什曼原虫聚合酶链反应克隆免疫印迹

Ⅰ我国内脏利什曼病不同疫区病原体SSUrDNA多变区序列差异与RAPD结果分析比较 Ⅱ我国山丘疫区利什曼原虫（L.d.SC10）LACK抗原基因克隆和表达: ＜正＞目的分析我国内脏利什曼病（VL）山丘、平原与荒漠疫区利什曼原虫（L.d.）分离株小亚基核糖体DNA（SSUrDNA）多变区的序列差异。与 3个疫区分离株RAPD结果分析比较。方法本实验用L.d.7种/株nDNA进...; 胡孝素卜玲毅芦殿梅敬保迁; 文献传递

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