刘娟
- 作品数：11 被引量：48H指数：4
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目杨森科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程电气工程机械工程更多>>
- siRNA沉默COX-2基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:研究siRNA沉默环氧合酶-2(COX-2)基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响。方法:以Lipofectamine 2000(Lipo)为载体转染siRNA-COX-2至Capan-2细胞。应用RT-PCR、realtime PCR检测COX-2-mRNA表达,Western blotting检测COX-2蛋白的表达。应用细胞直接计数法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡与周期。应用裸鼠模型评估COX-2-siRNA转染的Capan-2细胞成瘤能力的影响。结果:在siRNA-COX-2浓度为50 nmol/L、Lipo为5μL∶2 mL转染容积条件下,在Capan-2细胞的转染效率可达96.47%。siRNA-COX-2沉默Capan-2细胞中COX-2基因表达的最佳序列为siR-NA006,转染24 h以后沉默效率达73%,COX-2蛋白表达水平在转染后48 h和72 h分别被下调了67%和61%。转染48 h后,Capan-2细胞生长明显减慢(P<0.05),48 h和72 h抑制细胞增殖率分别为35.48%和56.32%。细胞凋亡率较对照组高(P<0.05),48 h和72 h细胞凋亡率为2.03%和3.27%。转染24 h、48 h和72 h G0/G1期的比例分别是58.03%、63.31%和65.66%,S期的比例分别是30.27%、24.87%和22.2%。siRNA-COX-2转染Capan-2细胞在裸鼠的皮下形成的肿瘤体积和重量明显减少(P<0.05)。结论:siRNA006-COX-2可有效沉默COX-2基因的表达,可明显抑制Capan-2细胞的生长并降低其成瘤能力。
- 钟英强黄花荣刘娟林莹夏忠胜昝慧
- 关键词：环氧合酶-2细胞增殖细胞周期
- hTERT在人胰腺癌组织中的表达及其与COX-2、P-gp、Bcl-2蛋白表达和临床病理特征的关系被引量：14
- 2008年
- 目的研究端粒酶逆转录酶(hTERT)、环氧合酶-2(COX-2)、P-糖蛋白(P-gp)和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中的表达及其相互关系,以及hTERT与胰腺癌的病理特征的关系。方法选择胰腺癌38例,慢性胰腺炎25例,正常胰腺组织20例。以SABC法检测hTERT、COX-2、P-gp和Bcl-2的表达。按手术记录描述肿瘤的病理特征。结果在38例胰腺癌组织中hTERT、P-gp、COX-2、Bcl-2阳性表达率分别为81.58%、52.63%、76.32%、57.90%,评分分别为(6.04±1.08)分、(4.50±1.75)分、(5.96±1.60)分、(5.61±1.08)分,而正常胰腺组织和慢性胰腺炎组织的hTERT与Bcl-2阳性表达率和评分均为0,在慢性胰腺炎P-gp、COX-2阳性率分别为20.00%、24.00%,评分分别为(1.21±0.86)分、(3.59±1.42)分,在正常胰腺组织阳性率分别为15.00%、0,评分分别为(0.90±0.58)分、0分。胰腺癌组与其他组各项阳性表达率和评分比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在胰腺癌组织中,hTERT表达与P-gp(rp=0.365,P<0.05)、COX-2(rp=0.534,P<0.001)、Bcl-2(rp=0.557,P<0.001)表达和临床分期(rp=0.333,P<0.05)呈显著正相关。结论hTERT、P-gp、COX-2和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中均有较高表达,hTERT表达与P-gp、COX-2、Bcl-2表达和胰腺癌的临床分期均有显著的正相关性。
- 钟英强沈溪明李海刚曾志勇刘娟朱兆华
- 关键词：P糖蛋白环氧化酶2
- CCR5第二胞外环的拮抗短肽对哮喘小鼠肺组织炎症细胞浸润和TNF-α表达的影响被引量：6
- 2017年
- 目的:研究与CC趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)第二胞外环特异性结合的拮抗短肽对哮喘小鼠肺组织炎症细胞浸润和TNF-α表达的影响。方法:筛选最适宜的卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏浓度,构建OVA诱导的BALB/c小鼠哮喘模型。模型构建成功后通过尾静脉注射不同浓度拮抗短肽干预模型小鼠,HE染色对肺组织进行病理细胞学分析及炎症分级,real-time PCR与Western blot实验分别检测小鼠肺组织TNF-α的mRNA和蛋白表达水平。结果:筛选出的OVA最佳致敏浓度为500 mg/L(0.1 mL)。尾静脉注射0.2m L不同浓度(1.5 g/L、2.5 g/L和3.5 g/L)拮抗短肽干预哮喘小鼠,能减轻哮喘小鼠肺组织炎症程度,抑制TNF-α的表达,以2.5 g/L浓度效果最佳,较模型组炎症程度减轻2级,炎症细胞数明显减少,TNF-α的mRNA表达量较模型组下降近90%,蛋白表达水平下降约70%。同时该短肽(2.5 g/L)也起到了一定的预防作用,炎症程度改善1级,TNF-α的mRNA及蛋白水平较模型组下降约50%左右。结论:CCR5第二胞外环的拮抗短肽能有效减轻哮喘小鼠肺组织炎症程度,抑制TNF-α的表达。
- 梁蓉蓉李雯静刘娟沈溪明黄花荣
- 关键词：TNF-Α
- siRNA靶向沉默hTERT基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡和周期的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究hTERT-siRNA对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。方法利用RNAi技术靶向沉默Capan-2的hTERT基因表达,应用细胞直接计数法和流式细胞术(FCM)检测Capan-2细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果在hTERT-siRNA的使用浓度为50nm、Lipo转染浓度为3μl/2ml转染体积和hTERT沉默效率为100%的条件下,转染hTERT-siRNA24h后,细胞生长已明显减慢,抑制细胞增殖率为26.39%(P<0.05),第2、3、5、7天抑制细胞增殖率分别为46.77%、70.61%、84.71%和85.99%(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养时间的延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显;活性细胞明显减少(P<0.001),而损伤细胞明显增多(P<0.001),以6h后明显;死亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显。siRNA组与阴性对照组和Lipo对照组均有明显差异(P<0.001)。G0～G1期细胞明显增多(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),以24h后明显;G2～M期细胞明显减少(P<0.01),以48h后明显;晚期凋亡细胞增多(P<0.05),以48h后明显。结论hTERT-siRNA可抑制人胰腺癌Capan-2细胞生长,使较多的细胞停留在G0～G1期,而进入G～M期和S期的细胞减少,可促进细胞凋亡。
- 钟英强魏菁罗招凡傅玉如邵静刘娟朱兆华
- 关键词：胰腺肿瘤细胞周期
- CCR5第2胞外环特异性拮抗短肽对哮喘小鼠肺组织自噬相关基因的表达和自噬泡形成的影响被引量：1
- 2019年
- 目的研究CC趋化因子受体5(CCR5)第2胞外环特异性拮抗短肽对哮喘小鼠肺组织自噬相关基因Beclin1、ATG5、LC3的表达和自噬泡形成的影响。方法将40只BALB/c小鼠随机分为5组,每组各8只,空白对照组小鼠予生理盐水腹腔注射致敏、生理盐水滴鼻激发,致敏组小鼠予鸡卵白蛋白(OVA)致敏、生理盐水激发,哮喘模型组小鼠予OVA致敏、OVA激发,地塞米松磷酸钠(Dex)组小鼠予OVA致敏、激发后予Dex尾静脉注射,拮抗短肽组予OVA致敏、激发后予拮抗短肽尾静脉注射。分别采用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法和透射电镜评估哮喘小鼠肺组织中自噬水平的变化。结果哮喘模型组的Beclin1、ATG5和LC3mRNA表达水平及LC3蛋白表达水平均低于空白对照组(P均<0.05),拮抗短肽组的Beclin1、ATG5、LC3mRNA和蛋白表达水平均高于哮喘模型组(P均<0.05)。透射电镜显示,哮喘模型组小鼠肺组织中自噬泡数量较空白对照组稍减少,自噬泡主要位于具有免疫功能的2型肺泡上皮细胞。拮抗短肽组、Dex组中自噬泡数量较模型组增多,但多为未成熟的自噬泡,且自噬泡同样主要位于2型肺泡上皮细胞中。结论哮喘小鼠存在自噬功能障碍,CCR5第2胞外环的特异性拮抗短肽能升高哮喘小鼠肺组织中自噬相关蛋白Beclin1、ATG5和LC3的表达水平。
- 刘娟梁蓉蓉张颖丽谢艾岑黄花荣
- 关键词：哮喘自噬
- 复方枸橼酸阿尔维林治疗腹泻型肠易激综合征的随机对照临床研究被引量：12
- 2009年
- 背景:肠易激综合征(IBS)发病机制未明,治疗上主要针对其病理生理特点,罗马Ⅲ理论认为复方制剂的疗效优于单方制剂。目的:观察复方枸橼酸阿尔维林治疗腹泻型IBS的疗效、费用和不良反应。方法:82例腹泻型IBS患者随机分入研究组和对照组,分别口服复方枸橼酸阿尔维林胶囊和匹维溴铵片8周。以分级记分法描述症状,参照症状积分的变化评价疗效,计算费用-效益比(C/E),观察药物不良反应。结果:两组治疗前各症状积分和总积分均无明显差异。治疗第8周末,研究组各症状积分和总积分均较治疗前显著下降,而对照组仅腹痛、腹泻积分和总积分显著下降(P<0.01);研究组治疗后腹胀、直肠肛门不适感积分和总积分显著低于对照组(P<0.05)。研究组腹痛、腹泻症状的疗效与对照组无明显差异,腹胀、直肠肛门不适感症状的疗效和总疗效显著优于对照组(P<0.05),两组腹胀、直肠肛门不适感和总疗效的ITT/PP分析总有效率分别为73.2%/78.9%对29.3%/30.8%、68.3%/73.7%对41.5%/43.6%和80.5%/86.8%对58.5%/61.5%。对照组C/E优于研究组(6.58对8.95),两组不良反应发生率无明显差异(10.5%对7.7%)。结论:复方枸橼酸阿尔维林治疗以腹胀、直肠肛门不适感为主要表现的腹泻型IBS,总有效率高且不良反应发生率低。
- 钟英强刘娟李山山曾志勇
- 关键词：匹维溴铵肠易激综合征药物不良反应随机对照试验
- 自噬功能与支气管哮喘被引量：4
- 2017年
- 自噬通常被认为是一种具有防御和应激调控作用的细胞分解代谢过程,但自噬功能受损却与人类多种疾病相关联。支气管哮喘作为一个复杂的、多种炎症细胞浸润的慢性炎症性疾病,其发生与发展可能与自噬功能低下有关。该文通过对自噬与哮喘的关系及可能存在的治疗靶点进行探讨,为哮喘的临床治疗提供新方向。
- 刘娟黄花荣
- 关键词：自噬哮喘哮喘治疗
- IL-4和IFN-γ在反流性食管炎和Barrett食管活检黏膜中的表达及其与病理和内镜分级的关系被引量：3
- 2009年
- 目的研究IL-4和IFN-γ在反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)和Barrett食管(barrett′s esophagus,BE)活检黏膜中的表达及其与病理和内镜分级的关系。方法RE、BE患者和正常对照组各30例。记录RE患者内镜下表现以及RE和BE的病理表现。IL-4和IFN-γ在食管黏膜中的表达应用SABC法检测。结果IFN-γ在RE组(5.39±1.14)和BE组(5.94±1.79)表达的免疫组化评分均明显高于正常对照组(0.71±0.24)(P<0.001);IL-4在BE组(4.45±1.41)表达的免疫组化评分明显高于RE组(1.28±0.35)和正常对照组(0.80±0.20)(P<0.001);BE组病理损伤轻于RE组;RE组的IFN-γ表达分别与镜下分级(r=0.509,P<0.01)、病理分级(r=0.493,P<0.01)呈正相关。结论Th1/Th2免疫反应可能在RE和BE的发病机制中起到不同的作用,RE以Th1免疫反应为主,BE中则Th1、Th2免疫反应均起到重要作用。
- 钟英强许哲沈溪明李海刚刘娟李山山曾志勇
- 关键词：BARRETT食管内窥镜检查白细胞介素4
- 阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨阳离子脂质体Lipofectamine2000(Lipo)在一定浓度下对细胞毒性的作用机制。方法应用一定毒性浓度的Lipo作用于胰腺癌Capan-2细胞,利用细胞直接记数法和流式细胞术检测其对Capan-2细胞生长、细胞凋亡和周期的影响。结果Lipo与siRNA的浓度均影响转染率的高低。在2ml转染体积中,Lipo在5μl的浓度下,使Capan-2细胞生长明显减慢,以第3天后更加明显(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养的时间延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.05),活性细胞明显减少(P<0.01),而损伤细胞和死亡细胞明显增多(P<0.001),以48h后更明显;G0～G1期细胞明显增多(P<0.05),G2-M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),晚期凋亡细胞减少(P<0.05)。结论在一定浓度下,Lipo可影响细胞的生长、早期凋亡和细胞周期分布,因此,利用Lipo在不同的细胞系进行基因转染过程中Lipo应进行浓度梯度筛选。
- 钟英强魏菁傅玉如邵静梁倚文林燕华刘娟朱兆华
- 关键词：脂质体LIPOFECTAMINE胰腺肿瘤细胞生长流式细胞术
- CCR5膜外环2的拮抗短肽对哮喘小鼠肺组织炎症细胞浸润和TNF-α/NF-κB信号通路的影响
- 梁蓉蓉李雯静刘娟黄花荣
