代红艳
- 作品数:73 被引量:488H指数:13
- 供职机构:沈阳农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 山楂过氧化物酶基因的克隆及在烟草中异位表达分析被引量:7
- 2015年
- 【目的】从山楂(Crataegus pinnatifida)中克隆过氧化物酶(POD)编码基因,通过转基因验证其在木质素合成中的作用,为揭示山楂内果皮形成分子机制奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从山楂克隆基因,以p RI 101-AN为构建基因过量表达载体的基础载体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入烟草。【结果】从山楂中克隆出编码序列长度为996 bp的POD72基因,命名为Cp POD72。山楂POD72与木本和草本植物POD72的氨基酸序列一致性均较高。构建了Cp POD72基因的过量表达载体,通过农杆菌介导的转化获得了66个烟草转化植株。RT-PCR检测结果显示Cp POD72基因在烟草转基因植物中异位表达,组织化学染色分析表明转Cp POD72基因烟草植株中木质素含量增加。【结论】Cp POD72基因可能参与木质素合成。
- 代红艳闫玉娇李晓明李贺张志宏
- 关键词:山楂过氧化物酶基因木质素转基因烟草异位表达
- 山楂属植物中苹果褪绿叶斑病毒的RT-PCR检测及病毒脱除方法被引量:2
- 2016年
- 【目的】建立优化的山楂属植物苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的RT-PCR检测体系,获得以山楂组培苗为试材的高效ACLSV脱除方法。【方法】基于转录组高通量测序解析的山楂属植物ACLSV基因组序列设计病毒检测引物,比较c DNA模板浓度、Taq DNA聚合酶种类及采样部位对病毒RT-PCR检测效果的影响。通过组培苗热处理和培养基中添加三氮唑核苷来脱除山楂植株中的ACLSV。【结果】基于转录组高通量测序获得的2个ACLSV山楂分离物的全基因组序列设计并筛选出适合于山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测引物。建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系。对80份山楂样品进行病毒检测,其中有18个样本检测出ACLSV,带毒率为22.5%。比较了热处理(37℃、30d)、化学处理(培养基中添加20 mg·L-1的三氮唑核苷,处理40 d)、热处理与化学处理结合方法(处理30 d)3种方法对山楂组培苗中ACLSV的脱除效率,表明热处理或热处理与化学处理结合的方法能够完全脱除山楂中的ACLSV,而单独化学处理的脱毒率不能达到100%。【结论】建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系,表明组培苗热处理是脱除山楂植株中ACLSV的有效方法。
- 郑文燕郭巍马跃李晓明代红艳
- 关键词:苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR组培脱毒
- 草莓主栽品种再生和转化的研究被引量:97
- 2001年
- 建立草莓主栽品种高效、稳定的离体再生体系和遗传转化体系 ,获得了转基因植株。‘弗吉尼亚’和‘森嘎拉’的叶片离体再生芽频率达到 10 0 %。试管苗叶片与农杆菌菌株EHA10 5共培养 3d。共培养后的叶片在附加卡那霉素 4 0mg/L的再生培养基上选择培养 4周后 ,外植体再生出转化芽 ,弗吉尼亚的转化芽再生频率可达 6.8%。采用组织化学染色法对随机选取的 10个GUS基因转化植株进行基因表达测定 ,结果 5个植株强烈表达GUS活性。转bar基因植株在附加除草剂草丁膦 10mg/L的培养基上能够正常分化 ,在田间对草丁膦表现出强烈抗性。转基因植株开花。
- 张志宏吴禄平代红艳王国英赵天永毕晓颖杜国栋
- 关键词:草莓抗除草剂
- 草莓斑驳病毒的生物学鉴定及PCR检测研究
- 利用PEG沉淀粗提纯草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV),并进行电镜观察.粗提纯液摩擦接种昆诺藜,昆诺藜叶片显示斑点症状.利用指示植物小叶嫁接法和RTPCR技术对SMoV进行了检测,两...
- 杨洪一张志宏高秀岩杜国栋代红艳
- 关键词:草莓植物病毒RT-PCR
- 文献传递
- 一种黑果枸杞稳定遗传转化体系及其应用
- 本发明公开了一种黑果枸杞稳定遗传转化体系及其应用,无刺黑果枸杞蔗糖合酶<I>SUS</I>基因,序列如序列表SEQ ID NO.1所示;一种转基因植物表达载体质粒,它是在植物表达载体中插入了<I>SUS</I>+<I>X...
- 王钦美高悦李娜齐新宇张志宏王玉成李璐佳杨爱琳代红艳
- 文献传递
- 高等农业院校分子生物学课程教学改革探索被引量:8
- 2019年
- 分子生物学课程是研究生命本质的一门新兴学科,是高等农业院校生物学科群相关本科专业的必修课程。目前分子生物学课程内容庞杂及其教学体系不完备,与其他课程内容之间缺乏协调与整合,教学方法比较单一、缺乏专业特色,教学手段落后导致大学生学习积极性差和教学效率低。对此,结合沈阳农业大学大学生的特点,分子生物学课程教学应通过重新修订教学大纲,整体梳理、优化教学内容;改进教学方法和考核方式,形成各个专业的特色教学模式;提高教师的综合教学素养,结合本专业展开特色教学内容;采用现代化教学技术,调动大学生学习积极性和提高教学效率等策略来创新分子生物学教学,以达到提高教学质量、培养高素质创新型人才的目的。
- 袁晖王爱德代红艳刘月学
- 关键词:高等农业院校分子生物学教学改革教学质量
- 园艺产品营销学课程教学研究被引量:4
- 2015年
- 针对园艺产品营销学课程教学的现状及存在的问题,从课程性质、先修课程安排、实践教学、教学方法和教学考核模式等方面,结合相关课程教学改革及该课程的教学实践进行了教学探讨,提出了课程改革完善的建议,同时对课程的性质、特点及发展趋势进行了总结与展望。
- 赵玉辉代红艳王锦霞董文轩
- 关键词:教学改革
- 一种草莓组培苗移栽的光环境调控方法
- 本发明涉及草莓种植技术领域,具体而言,尤其涉及一种草莓组培苗移栽的光环境调控方法。所述方法包括以下步骤:(1)当组培苗根长4‑6cm时,进行组培瓶开盖驯化,清洗根部培养基,移栽至基质上,置于培养室,保湿;(2)对组培苗施...
- 代红艳李祎鸣张志宏于智慧姚秀桦
- 山楂中木质素合成调控转录因子MYB46的克隆及功能鉴定被引量:2
- 2020年
- 模式植物拟南芥AtMYB46在次生壁形成过程中充当纤维素、木质素和木聚糖生物合成基因的转录调节因子,其表达受植物特异性转录因子NAC家族成员的调控。然而,果树次生壁生物合成的调节机制在很大程度上尚不清楚。从山楂(Crataegus pinnatifida)中分离克隆得到与拟南芥和苹果中MYB46具有高度保守R2R3 MYB DNA结合结构域的MYB46编码基因,并将其命名为CpMYB46。通过农杆菌介导的转化方法分别在拟南芥、烟草和苹果中异位表达CpMYB46基因。异位表达CpMYB46基因的拟南芥和烟草的次生壁过量沉积而导致生长受到限制,表现出株型矮小和叶片上卷的表型。定量RT-PCR数据表明,CpMYB46基因可以调控转基因植株次生细胞壁生物合成中下游基因的表达,茎切片观察表明异位表达CpMYB46明显增加了转基因拟南芥、烟草和苹果木质部中次生壁厚度。EMSA实验结果表明其上游NAC家族成员CpSND1可以直接结合CpMYB46基因的启动子。研究揭示了CpMYB46在DNA结合结构域与拟南芥和苹果中的MYB46具有高度保守性,而且在植物次生壁合成调控中也存在功能保守性。研究为揭示山楂内种皮中木质素的合成提供了分子依据,也为山楂的分子育种奠定了基础。
- 陈可钦雷莹莹郭运娜宋梦如刘丽馥代红艳
- 关键词:木质素山楂转录因子转录调控
- 草莓轻型黄边病毒抗血清的制备
- 草莓轻型黄边病毒(Strawberry mild yellow edge virus,SMYEV)是草莓生产中危害严重的一种病毒.本文探索在原核细胞中表达SMYEV的外壳蛋白(CP),并以其为抗原制备SMYEV抗血清的方...
- 代红艳于翠梅李贺马跃刘月学张志宏
- 关键词:外壳蛋白原核表达抗血清