于萍
- 作品数：21 被引量：304H指数：6
- 供职机构：四川大学华西第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学自动化与计算机技术电子电信更多>>
- 中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测
- 2003年
- 采用 Roche公司的 RT(Reverse transcriptase,RT)检测试剂盒 ,按其操作步骤进行 ,用 HIV- 1作为试剂盒的阳性参照绘制标准曲线 ,PK15作为猪内源性逆转录病毒 (Porcine endogenous retrovirus,PERV)的阳性对照 ,定量检测 34头中国版纳微型猪近交系 (Banna minipig inbreed,BMI)血浆中表达的 PERV的逆转录酶。各猪RT结果均于 4 0 5 nm处测定 OD值 ,用 HIV- 1的实测标准曲线进行定量 (pg/ m l)。检测结果表明全部 34头猪均为阳性反应 ,但各猪血浆中有活性的酶远低于 HIV- 1,也弱于
- 李胜富于萍张立步宏李幼平曾养志
- 关键词：酶活性检测试剂盒
- 国际产科脓毒症临床指南系统比较研究被引量：3
- 2016年
- 目的：系统评价国际产科脓毒症临床指南,以期为临床应用提供参考。方法：计算机检索多种数据库建库以来至2015年4月30日的文献,独立采用临床指南研究与评估（AGREE）Ⅱ工具评价指南的制定和报告质量。结果：①最终纳入4篇指南,时间跨度2012~2014年,包括英国2篇,爱尔兰1篇,澳大利亚1篇,我国尚无产科脓毒症的指南。②纳入指南AGREEⅡ领域得分较高的是＂范围和目的＂（67.91%）,＂清晰性＂（62.50%）。爱尔兰和英国指南为B,澳大利亚指南为C。③4篇指南均涉及产科脓毒症的病因和治疗。澳大利亚指南和爱尔兰指南均明确指出孕产妇与非孕妇成人脓毒症的炎症诊断标准不同;澳大利亚指南提出了脓毒症除细菌之外的多种病原体来源;仅英国指南给出了鉴别诊断和抗菌药物使用的详细意见;对静脉免疫球蛋白的使用,英国和爱尔兰指南给出了不同意见;英国指南还涉及孕产妇的病情监测、转诊以及胎婴儿的处理、脓毒症的预防等。结论：迄今为止尚无统一的国际产科脓毒症指南,专科指南系统评价质量不高,各指南中重点侧重点不同,对我国产科脓毒症临床处理和指南的制定有一定借鉴作用。
- 周淑韩临晓于萍张维宏
- 关键词：脓毒症妊娠产褥期
- 先天性白内障家系的产前超声与致病基因研究被引量：2
- 2018年
- 目的分析先天性白内障家系的产前超声诊断情况和致病基因,为发现潜在基因突变位点和早诊早治提供科学依据。方法对1例先天性白内障先证者孕妇进行产前超声检查和病史调查,在其分娩后采集双胎脐血。经过完善的眼科学检查后,采集该大家系共19名成员(包括10名患者,9名非患者)血液样品,将患者与非患者进行全外显子组基因测序,筛选候选基因,对基因突变位点进行直接测序并在相关群体中进行验证。结果产前超声检查发现该患者分娩双胎均为先天性白内障患者,该家系为5代患病的先天性白内障常染色体显性遗传家族。经全外显子基因组测序,新发现SNP 2 553个,新发现Indel 3881个。经候选基因一代测序,验证发现家系内患者CRYGD基因第2外显子70位有1个C>A碱基的杂合突变(c.70C>A),并由此导致了蛋白第24位上脯氨酸被苏氨酸所取代(p.Pro24Thr),正常对照未见该点突变。结论 CRYGD基因的错义突变c.70C>A是该先天性白内障家系的致病原因。家系调查询问病史尤为重要,在孕期错过基因诊断的情况下,产前超声诊断为更有效的筛查手段。
- 刘珍曹洪瑞王月郭义雄于萍李娜娜邓莹朱军
- 关键词：先天性白内障产前诊断产前超声
- 环孢霉素A和FK506对高脂血症大鼠血管内皮的影响被引量：3
- 2012年
- 目的对比观察免疫抑制剂FK506和环孢霉素A(CsA)对高脂血症大鼠血管内皮细胞的影响。方法建立高脂血症大鼠模型,分别采用CsA〔2mg/(kg.d)〕和FK506〔0.2mg/(kg.d)〕灌喂7d进行干预,取胸主动脉HE染色观察对血管内皮的影响。采用RT-PCR和免疫组织化学染色观察血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、补体促衰变因子(DAF)和C反应蛋白(CRP)基因和蛋白的表达;取血清检测活性氧簇(ROS)水平。结果与FK506相比,CsA损伤高脂血症大鼠血管内皮细胞,破坏血管内皮的完整性。CsA明显抑制高脂血症大鼠血管内皮中VEGF和DAF基因和蛋白的表达,上调CRP基因和蛋白的表达,而FK506无上述干预效应。此外,CsA还能明显上调ROS水平,FK506无相似的效应。结论在高脂环境中,CsA能通过VEGF/DAF和ROS/CRP途径激活补体系统,从而导致补体所介导的血管内皮细胞的损伤;而FK506对VEGF/DAF通路和ROS/CRP表达均没有明显的影响。
- 王巍杨开选张朋于萍周淑
- 关键词：环孢霉素AFK506高脂血症
- 猪内源性逆转录病毒体外感染人胚肾细胞系HEK-293的初步研究被引量：1
- 2005年
- 目的 对猪内源性逆转录病毒(PERV)体外感染人胚肾细胞系HEK 293的能力进行检测。方法 建立体外感染人胚肾细胞系HEK -293的方法,用免疫电镜的方法观察PERV粒子,聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)检测与PERV共培养24h后HEK 293细胞基因组中PERV前病毒基因的整合、表达并对PERV亚型进行鉴定,激光共聚焦显微镜检测PERV -gag蛋白的表达并进行定量分析。结果 电镜下可观察到PERV的圆形病毒粒子;与PERV共培养24h后HEK -293细胞基因组中检测到PERV前病毒DNA,且mRNA也有效表达,PERV亚型为PERV -A,B型;激光共聚焦显微镜观察到PERV -gag蛋白在感染细胞HEK- 293的胞质表达,但表达量下降。结论PERV具有体外感染人胚肾细胞系HEK- 293的能力,病毒蛋白可以有效表达,因此在猪到人的异种器官移植研究中对PERV可能引起的人兽共患病进行安全性评价是极有必要的。
- 于萍张立步宏李胜富李幼平程惊秋
- 关键词：内源性逆转录病毒体外感染器官移植
- 产前诊断技术及其临床应用被引量：37
- 2007年
- 产前诊断是实现优生预防缺陷儿出生的重要手段,其为可能出现遗传病或与遗传因素有关的疾病以及具有其他导致畸胎因素的高风险家庭提供了充足可靠的信息,使他们能够在妊娠期对异常的胎儿作出自己适当的选择。随着我国产前诊断技术的不断发展以及产前诊断在国内诸多医院的逐步开展,有效的降低了部分先天缺陷胎儿的出生率。但目前采用的产前诊断技术也存在诸多问题,诊断水平还远远不能达到优生优育的需要,因此,进一步提高现有产前诊断技术的特异性和敏感性将是今后产前诊断研究的重要方向。
- 于萍王和袁粒星
- 关键词：产前诊断产前筛查特异性敏感性
- 免疫组化结果的图像分析与人工计数方法的对比研究被引量：218
- 2003年
- 针对长期以来免疫组化结果难以准确判定的问题 ,选取图像分析 (Image analysis,IA)的常用参数——阳性面积 (Area) ,平均光密度 (Mean Density) ,积分光密度 (IOD)和人工计数方法的常用参数——阳性细胞百分比 ,灰度及两者乘积 ,通过图像分析和人工计数两种方法对分别代表胞浆、胞核和胞膜阳性的乳腺癌 PS2、ER、c- erb B- 2三个指标的免疫组化结果进行分析比较 ,从而探讨图像分析与人工计数方法在免疫组化染色结果的半定量评分中各自的优缺点、重复性及两者的相关性。实验结果表明 :IA对免疫组化中胞浆 ,胞核及胞膜着色的结果判定均有较好的重复性 ,人工计数方法对胞核、胞膜阳性的结果判定重复性尚可 ;两种方法在免疫组化结果的判定上存在正相关关系。此外 。
- 于萍步宏王华赵高平张景丽周桥
- 关键词：免疫组化法
- 原代人脐静脉内皮细胞分离培养方法的探讨及其鉴定被引量：6
- 2010年
- 目的通过比较两种原代人脐静脉内皮细胞的分离培养方法并对细胞特异性抗原进行鉴定,探索提高原代内皮细胞体外培养存活率及纯化率的方法。方法采用一次性无菌注射器向人脐静脉灌注消化液,消化液的浓度和消化时间分别0.25%(质量体积比)胰蛋白酶,10min和0.1%(质量体积比)胶原酶Ⅱ,15min。通过在倒置显微镜下观察细胞的形态特点和用免疫荧光染色的方法对细胞进行鉴定,比较两种消化方法的优劣。结果 0.1%胶原酶Ⅱ,15min的消化方法较0.25%胰蛋白酶,10min对原代人脐静脉内皮细胞有更好的分离效果,活细胞数量多且细胞纯度较高。免疫荧光染色结果表明细胞内有Ⅷ因子相关抗原表达。结论胶原酶Ⅱ可以有效分离脐静脉内皮细胞,最佳消化条件是0.1%胶原酶Ⅱ,37℃,15min。
- 严凤英于萍关林波彭冰周淑
- 关键词：人脐静脉内皮细胞
- 噬菌体展示技术筛选MRC-5细胞上人巨细胞病毒的结合位点
- 2010年
- 目的以人巨细胞病毒(HCMV)感染的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)为靶细胞,寻找参与HCMV识别并结合细胞的多肽区域,研究HCMV膜蛋白中哪些功能域参与细胞识别以及膜融合过程。方法以HCMV感染阳性的MRC-5细胞为液相筛选物,从随机七肽噬菌体展示库中筛选出能够与感染阳性MRC-5细胞特异性结合而与正常细胞不结合的噬菌体配体。通过ELISA分析亲和力、DNA测序、序列对比及理化性质分析多肽。结果初步发现EVNMSDS、NVSVFET和GQQPTTV3个肽段可能参与HCMV与宿主细胞的识别过程。同时通过同源比对分析还发现,这3个七肽与HCMVgB和gH蛋白存在共有序列。结论应用PHD7噬菌体随机肽库和生物信息学方法筛选出3个可能参与HCMV识别宿主细胞并进行膜融合的功能域,为进一步研究HCMV感染宿主细胞的具体机制提供新的思路以及为抗HCMV感染提供新的策略。
- 王巍张立于萍
- 关键词：噬菌体展示HCMV
- HS上的N-硫酸化即艾杜糖醛酸基团分布对RSV粘附人胚肾上皮细胞等细胞株
- 目的既往研究显示,呼吸道合胞病毒(RSV)是触发微小病变型肾病综合征(MCNS)最常见的呼吸道病毒,病毒病毒基因反式激活是该病发病最重要机理之一。这些研究是在RSV入侵机体细胞后,在细胞内发生的损害过程,而RSV如何进入...
- 董丽群王峥于萍吴瑾郭妍南
