陈锡和
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
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- 口腔鳞癌细胞中ITGB6基因主要转录调控区域的定位分析被引量：1
- 2013年
- 目的:鉴定ITGB6基因在口腔鳞癌细胞中的主要调控区域,为研究基因在口腔鳞癌细胞中的转录调控机制奠定基础。方法:构建含有ITGB6基因转录起始点上游5'端侧翼区不同长度DNA序列的重组pGL2荧光素酶报告基因质粒,转染口腔鳞癌细胞株TCA8113和SAS,利用双荧光素酶报告基因系统检测启动子转录活性,并通过生物信息学方法预测ITGB6基因中潜在的主要转录因子结合位点。结果:获得一系列不同长度ITGB6基因5'侧翼区序列的重组荧光素酶报告基因质粒;当ITGB6基因5'端侧翼片段截短到-187～-35和-35～+27之间时,启动子活性均显著下降;生物信息学分析显示,在-187～-35区域有2个Ets-1的潜在结合位点,而在-35～+27区域有1个IRF-4潜在结合位点。结论:在口腔鳞癌细胞中,ITGB6基因-187^-35和-35^+27区域是主要的转录因子结合区。
- 陈锡和邓小玲尹丽琴傅玉才许铭炎
- 关键词：口腔鳞癌转录因子
- 飞行时间质谱法检测干扰素调节因子6单核苷酸多态性的研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术检测唇腭裂相关基因干扰素调节因子6(interferon regulatory factor 6,IRF6)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的效果。方法样本来自201名健康志愿者,利用PCR扩增出IRF6基因含rs2235371和rs642961位点片段作为模板,并以位点特异引物进行单碱基延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOF-MS技术对rs2235371和rs642961的多态性进行检测。结果 201名健康志愿者IRF6基因rs2235371和rs642961位点的基因型和等位基因的分布频率与HAPMAP基因库中中国人群同一基因位点的分布频率相近。结论 MALDI-TOF-MS技术是一种高通量快速检测基因SNPs的方法。
- 许铭炎邓小玲陈锡和陈庆珊姚小武唐世杰
- 关键词：单核苷酸多态性唇腭裂
- 蛋白激酶C介导转化生长因子β诱导人口腔鳞癌细胞整合素β6的表达被引量：1
- 2015年
- 目的:研究蛋白激酶C(PKC)是否参与转化生长因子β(TGF-β)诱导的人口腔鳞癌细胞(SAS)整合素β6表达。方法:人口腔鳞癌细胞SAS培养于含10%胎牛血清DMEM培养基中,经TGF-β诱导后,裂解细胞提取总RNA和蛋白质,采用实时荧光定量RT-PCR及蛋白印迹方法分别检测整合素β6mRNA和蛋白表达情况;利用PKC阻断剂研究PKC对整合素β6表达的影响。结果:TGF-β诱导人口腔鳞癌SAS细胞整合素β6mRNA及蛋白表达呈时间依赖性;广谱型PKC抑制剂RO-31-8220呈剂量依赖性阻断TGF-β诱导的SAS细胞整合素β6mRNA和蛋白表达,而Ca2+依赖型PKC抑制剂G6976则没有阻断作用。结论:非Ca2+依赖途径的PKC介导TGF-β诱导人口腔鳞癌细胞SAS细胞整合素β6表达。
- 谷胤征邓小玲李祺福石松林陈锡和许铭炎
- 关键词：转化生长因子Β蛋白激酶
- 溶血磷脂酸对上皮细胞整合素β_6表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)在体外对整合素β_6(ITGB6)表达的影响,并进一步研究LPA诱导的活化转化生长因子β(TGF-β)在此过程中的作用。方法:原代培养的正常人支气管上皮(NHBE)细胞接种于6孔板中,经LPA诱导,收集细胞,分别利用RT-PCR和流式细胞术检测ITGB6 mRNA及细胞表面蛋白的表达;利用转染有TGF-β应答性纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)启动子片段并融合萤火虫荧光报告基因片段的转化貂肺上皮细胞(TMLC)作为TGF-β活性报告细胞检测活化的TGF-β。结果:(1)10μmol/L LPA诱导2 h后,ITGB6mRNA在上皮细胞中表达显著增加,具有明显的时间依赖性。(2)10μmmol/L LPA诱导4 h后,上皮细胞表面ITGB6蛋白表达明显增加。(3)抗α_vβ_6抗体可阻断LPA诱导的活化TGF-β,但不能阻断LPA诱导的ITGB6 mRNA的表达。结论:(1)LPA可诱导上皮细胞ITGB6 mRNA和细胞表面蛋白的表达。(2)LPA诱导的ITGB6 mRNA表达不依赖LPA诱导的TGF-β活化。
- 许铭炎邓小玲陈锡和杨利和姚小武傅玉才
- 关键词：溶血磷脂酸上皮细胞转化生长因子Β
- MALDI-TOF-MS检测人群中骨形成蛋白4基因编码区突变方法的建立
- 2011年
- 目的:应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术建立检测人群中骨形成蛋白4(BMP4)基因编码区突变的平台。方法:采用PCR扩增BMP4基因,产物纯化后利用MALDI-TOF-MS技术对广东籍100例非综合征型唇腭裂患儿及91例健康对照者外周血进行BMP4基因突变的检测并进行测序验证。结果:采用MALDI-TOF-MS平台检测的191份样本均未发现BMP4基因编码区存在T102A、R162Q及R198X突变,与测序结果一致。结论:成功建立基于MALDI-TOF-MS检测BMP4基因编码区突变的平台,该方法具有高通量、快速、准确的特点。
- 许铭炎邓小玲陈锡和刘庭英陈庆珊姚小武唐世杰
- 关键词：突变
- 转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6基因表达的影响
- 2014年
- 目的:研究肿瘤相关转录因子YY1对口腔鳞癌细胞整合素β6(integrinβ6,ITGB6)基因表达调控的影响。方法:用生物信息学方法预测分布在ITGB6启动子区域的转录因子YY1潜在的结合位点,构建萤光素酶报告基因质粒,利用双萤光素酶报告基因系统检测ITGB6启动子片段的转录活性;利用染色质免疫沉淀技术检测在天然染色质条件下转录因子YY1与ITGB6启动子的结合情况;采用定点突变方法检测YY1结合位点对ITGB6启动子活性的影响;利用RT-PCR方法检测过表达转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA表达水平的影响。结果:ITGB6启动子-421^-150 nt区域存在多个转录因子YY1潜在的结合位点。在口腔鳞癌细胞的天然染色质中,转录因子YY1结合于ITGB6启动子-421^-150 nt区域;定点突变YY1潜在结合位点对口腔鳞癌细胞中ITGB6启动子活性无显著影响。另外,过表达的YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA的表达水平也无影响。结论:转录因子YY1在口腔鳞癌细胞中结合于ITGB6基因启动子-421^-150 nt区域,但对ITGB6基因的基础转录水平无影响。
- 尹丽琴尹丽琴陈锡和陈锡和舒申友傅玉才
- 关键词：口腔肿瘤
- 广东人群MSX1编码区(G267C和P278S)突变与非综合征性唇腭裂相关性研究
- 2011年
- 目的探讨MSX1基因编码区突变G267C和P278S与广东人群非综合征性唇腭裂(NSCL/P)发病的相关性。方法收集广东籍NSCL/P患儿100名及健康对照者91名的外周血,提取基因组DNA,应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)对MSX1基因编码区G267C和P278S突变进行研究。结果 G267C(799G>T)和P278S(832C>T)的突变在本次研究的广东人群中并未发现。结论 MSX1基因编码区G267C和P278S突变与中国广东人群NSCL/P没有明显的相关性。
- 许铭炎邓小玲陈锡和刘庭英陈庆珊傅玉才唐世杰
- 关键词：非综合征型唇腭裂MSX1基因突变
- 人口腔鳞癌细胞中整合素β6基因启动子的克隆及转录活性研究
- 研究目的: 鉴定ITGB6基因5’侧翼主要转录调控区域,探讨调控口腔鳞癌细胞中ITGB6基因基本转录活性的主要转录调控元件及转录因子。 材料和方法: 利用生物信息学方法预测ITGB6基因的转录起始位点、翻译起始位点...
- 陈锡和
- 关键词：口腔鳞癌肿瘤细胞基因克隆转录活性启动子
- 文献传递
