许铭炎
- 作品数:64 被引量:164H指数:7
- 供职机构:汕头大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 蛋白激酶C介导转化生长因子β诱导人口腔鳞癌细胞整合素β6的表达被引量:1
- 2015年
- 目的:研究蛋白激酶C(PKC)是否参与转化生长因子β(TGF-β)诱导的人口腔鳞癌细胞(SAS)整合素β6表达。方法:人口腔鳞癌细胞SAS培养于含10%胎牛血清DMEM培养基中,经TGF-β诱导后,裂解细胞提取总RNA和蛋白质,采用实时荧光定量RT-PCR及蛋白印迹方法分别检测整合素β6mRNA和蛋白表达情况;利用PKC阻断剂研究PKC对整合素β6表达的影响。结果:TGF-β诱导人口腔鳞癌SAS细胞整合素β6mRNA及蛋白表达呈时间依赖性;广谱型PKC抑制剂RO-31-8220呈剂量依赖性阻断TGF-β诱导的SAS细胞整合素β6mRNA和蛋白表达,而Ca2+依赖型PKC抑制剂G6976则没有阻断作用。结论:非Ca2+依赖途径的PKC介导TGF-β诱导人口腔鳞癌细胞SAS细胞整合素β6表达。
- 谷胤征邓小玲李祺福石松林陈锡和许铭炎
- 关键词:转化生长因子Β蛋白激酶
- ADV-tk重组腺病毒的构建及检测被引量:2
- 2010年
- 目的应用基因重组技术,构建含胸苷激酶(tk)自杀基因的复制缺陷型腺病毒(ADV-tk),为进一步研究tk自杀基因对肿瘤的抑制作用奠定基础。方法采用细胞内同源重组法构建携带tk基因的ADV-tk,经PCR鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定。重组腺病毒ADV-tk体外转染人肝癌SMMC-7721细胞,RT-PCR检测tk基因的整合和表达。建立裸鼠人肝癌动物模型,腹腔注射ADV-tk,荧光显微技术观察ADV-tk基因在肝脏的转染情况和对肿瘤细胞的抑制作用。结果构建的重组腺病毒中带有tk基因,经扩增、纯化后测得重组腺病毒滴度为1.4×1010pfu/ml。ADV-tk体外转染SMMC-7721细胞后,RT-PCR检测显示tk基因在细胞中整合并且有效表达。体内检测结果发现ADV-tk在肝脏有明显转染,肿瘤组织中凋亡细胞明显增多。结论本研究构建的携带tk基因的复制缺陷型腺病毒获得成功,可用于下一步研究。
- 陈耿臻韩慧许铭炎邓小玲
- 关键词:自杀基因胸苷激酶基因腺病毒载体
- 潮汕地区汉族人群MTHFR基因rs1801131多态性与非综合征型唇腭裂的相关性研究
- 2021年
- 目的:研究5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因rs1801131位点多态性与潮汕地区汉族人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法:收集潮汕地区汉族人群NSCL/P患儿357名、患儿父亲199名、患儿母亲198名及健康对照者354名的外周血,提取基因组DNA,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测MTHFR基因rs1801131位点的基因多态性。采用卡方检验对病例组与正常对照组基因型、等位基因频率进行比较分析。在核心家庭中进行等位基因的传递不平衡检验。家系分析由FBAT 2.0.2软件完成。结果:病例组及正常对照组MTHFR基因rs1801131位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡。病例-对照研究发现rs1801131位点基因型多态性和等位基因多态性与NSCL/P的发病风险无显著相关关系(P>0.05),核心家庭等位基因A或C均不存在传递不平衡(P>0.05),家系分析显示该人群NSCL/P的发病与rs1801131位点等位基因的分布频率无显著相关关系(P>0.05)。结论:MTHFR基因rs1801131位点多态性与潮汕地区汉族人群NSCL/P发病无显著相关。
- 陆雪梅许铭炎许铭炎刘庭英邓小玲
- 关键词:基因多态性非综合征型唇腭裂
- 肌腱膜纤维肉瘤癌基因B型同系物基因的单核苷酸多态性与非综合征型唇腭裂关联研究被引量:5
- 2012年
- 目的揭示位于染色体20q12的肌腱膜纤维肉瘤癌基因B型同系物基因(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B,MAFB)上游单核苷酸多态性位点rs17820943与中国南方汉族人群非综合征型唇腭裂(non-syndromic cleft lip with or without cleft palate,NSCL/P)发病的相关性。方法采用引物单碱基延伸、基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析法检测了300例NSCL/P患者(病例组)和354例健康志愿者(对照组)以及168个完整患儿-健康父母3人核心家系的rs17820943基因型。并以测定的基因型为基础分别进行病例-对照研究以及患儿-健康父母3人家系研究。结果 rs17820943的等位基因和基因型频率在病例组与对照组间差异均有统计学意义(P等位基因=0.001和P基因型=0.002)。其中等位基因T(频率病例∶对照=0.358∶0.448)和基因型TT(频率病例∶对照=0.110∶0.195)的比值比(oddsratio,OR)和95%可信区间(95%confidence interval,95%CI)值分别为ORT=0.69(95%CI:0.55~0.86)和ORTT=0.43(95%CI:0.26~0.70)。患儿-健康父母3人家系研究也表明该位点与NSCL/P存在强阳性关联(ORT vs.C=0.55,95%CI:0.41~0.75,传递不平衡检验P=0.000)。结论 MAFB基因的rs17820943位点的单核苷酸多态性与中国南方汉族人群的NSCL/P易感性相关,表明MAFB基因可能是NSCL/P的易感基因。
- 程红球黄恩民唐世杰许铭炎舒申友
- 关键词:非综合征型唇腭裂单核苷酸多态性位点
- 四川彝族人群HIV-1辅助受体CX3CR1基因多态性分析被引量:2
- 2006年
- 背景与目的:了解四川省彝族人群中HIV_1辅助受体CX3CR1基因多态性在正常人和HIV_1感染者中的分布特点,探讨此辅助受体多态性对HIV感染的影响。材料与方法:从202份外周血中提取基因组DNA(正常人115份,HIV_1感染者87份)。用PCR_限制性片段长度多态性(PCR_RFLP)技术检测V249I和T280M两种变体,检测结果用行列表χ2检验法进行统计学分析。结果:在检测的115例正常人样品中,249I和280M等位基因频率分别为8.3%和5.7%;HIV感染者中,两种等位基因频率分别为7.5%和5.7%。249I和280M间存在明显的连锁关系。正常人和感染者的两种等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:所获得的四川彝族人群HIV_1辅助受体CX3CR1基因多态性资料有助于进一步分析四川彝族人群HIV感染和艾滋病病程的影响因素。
- 邓小玲洪坤学陈健平阮玉华许铭炎秦光明邢辉李克邵一鸣
- 关键词:HIV-1CX3CR1等位基因遗传多态性
- 新生鼠卵巢FOXO3a表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究被引量:15
- 2006年
- 目的:探讨新生大鼠卵巢中FOXO3a(forkhead box groupO)转录因子表达水平与卵母细胞凋亡的相关性。方法:取出生后2d、3d、8d、15d龄大鼠的卵巢,用免疫组化方法观察FOXO3a、caspase-3在卵巢组织中的定位及表达水平,且用TUNEL技术检测卵巢内卵母细胞的凋亡变化。结果:FOXO3a在新生大鼠部分卵母细胞巢内的卵母细胞核内高表达,而在卵泡发育启动后,FOXO3a则从卵母细胞的核内逐渐转移至胞浆。而在次级和成熟卵泡的卵母细胞内,FOXO3a仅出现在胞浆内。≤8d龄大鼠卵巢的部分卵母细胞核内或胞核、胞浆内可检测到caspase-3表达,2d、3d龄大鼠部分卵母细胞核内高表达。TUNEL染色与caspase-3结果相似,2d龄大鼠卵巢的卵母细胞阳性率最高。结论:生后2d大鼠卵巢的卵母细胞存在一个凋亡高峰期;在原始卵泡形成前,FOXO3a在部分卵母细胞核内高表达,并与卵母细胞的凋亡率呈一致性。
- 隋旭霞罗丽莉傅玉才郭宪国许铭炎许锦阶
- 关键词:卵母细胞凋亡FOXO3ATUNEL
- 阴道毛滴虫RRas同源基因的克隆和序列分析被引量:2
- 2006年
- 目的克隆和分析阴道毛滴虫RRas同源基因,以探讨其在细胞内信号传导通路中的功能。方法从已构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离得到一个与人类RRas同源的cDNA克隆,用PCR扩增该cDNA克隆TvRRas相对应的基因组DNA,并对cDNA克隆及其对应的基因组DNA进行测序。利用BLASTP,RPS-BLAST和ClustalW等工具进行序列分析。结果TvRRascDNA序列全长705对碱基,读码框含615对碱基,推测蛋白质序列具205个氨基酸。序列分析显示该基因的基因组DNA序列含有5′端ATG起始密码子和3′端的终止密码子,与cDNA序列完全一致,提示该基因无内含子;进一步分析表明该基因系RRas亚家族的同源基因,其氨基酸序列与人类和小鼠的RRas同源性最高(两者的一致性均为51%,相似性均为70%),同时拥有人类RRas基因高度保守的结合GTP的结构域和完全一致的效应结构域。进化树分析表明该基因与人类的RAS原癌蛋白基因分支及RRas分支聚类。结论获得了阴道毛滴虫RRas同源基因。
- 许铭炎傅玉才刘居理张仁利
- 关键词:阴道毛滴虫基因克隆
- 105例潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错头影测量分析
- 2013年
- 目的分析潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错畸形的颅颌特征。方法收集105例潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者X线头颅侧位定位片,采用Downs分析法进行分析,所得数据进行性别比较分析,并进一步与广东地区正常及佛山地区安氏Ⅱ类错人群Downs分析法测量值进行比较。结果获取潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者Downs分析法测量值,男女Downs分析法测量值差异没有统计学意义(P>0.05);与广东地区分析正常Downs分析法测量值比较,潮汕籍女性组上下中切牙角(t=1.19,P=0.240)及上中切牙凸距(t=1.86,P=0.070)差异无统计学意义,其它项目测量值均明显偏离正常值,差异有统计学意义(P<0.05);潮汕籍男性患者的面角(t=7.21,P=0.000)、Y轴角(t=7.37,P=0.000)、下颌平面角(t=2.15,P=0.030)及下中切牙-下颌平面角(t=3.78,P=0.000)与佛山地区男性患者相比差异具有统计学意义,潮汕籍女性患者的面角(t=5.57,P=0.000)、下颌平面角(t=2.50,P=0.015)及Y轴角(t=6.39,P=0.000)与佛山地区女性患者相比差异具有统计学意义。结论潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者具备广东人前突的侧貌特征,同时下颌后缩及向后下生长的趋势更明显。
- 林耿真许克樱许铭炎
- 关键词:头影测量
- 酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性。利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况。结果LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111bp)、Slag(109bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用。结论重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。
- 刘居理傅玉才许铭炎许锦阶
- 关键词:酵母双杂交诱饵蛋白
- 白细胞介素-13对巨核细胞系-HEL细胞原癌基因c-mpl表达的影响被引量:6
- 2001年
- 目的 :研究重组人白细胞介素 - 13 (rhIL - 13 )刺激巨核细胞系 -HEL细胞的增殖是否与原癌基因c -mpl表达有关。方法 :用MTT比色法和RT -PCR法 ,分别观察了rhIL - 13对HEL细胞增殖的影响和对c -mplmRNA表达的影响。结果 :rhIL - 13促进了HEL细胞的增殖 ,上调了HEL细胞c-mplmRNA的表达。结论 :rhIL - 13促进巨核细胞系 -HEL细胞增殖 ,其部分机制可能是通过上调c -mpl的表达来实现。
- 许铭炎石小玉李文林
- 关键词:白细胞介素-13巨核细胞基因表达细胞增殖