陈勇
- 作品数：42 被引量：69H指数：5
- 供职机构：兰州大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学天文地球化学工程更多>>
- 人β-NGF真核表达载体的构建及其表达产物的生物活性被引量：7
- 2005年
- 目的在CHO细胞中共表达二氢叶酸还原酶(DHFR)基因及人神经生长因子β亚基(-βhNGF)基因,并对表达产物进行鉴定和生物活性分析。方法克隆DHFR和-βhNGF基因,测序,酶切,连接到真核表达载体pBudCE4.1中,构建人NGF基因重组表达质粒pBudCE4.1/DHFR/-βhNGF,经电转染法导入二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-DHFR-)中,经添加Zeocin抗生素和撤除H、T(次黄嘌呤、胸腺嘧啶脱氧核苷)双筛选,获得了DHFR+细胞克隆。经MTX加压筛选高表达-βhNGF的CHO细胞株。SDS-PAGE、ELISA和Western blot对表达产物进行鉴定,并利用鸡胚背根神经节法检测表达蛋白的生物活性。结果人神经生长因子在CHO细胞中得到较高表达,表达量达0.3μg/ml,且表达产物具有良好的生物活性。结论为大规模工业化生产重组人神经生长因子奠定了基础。
- 陈勇蒋琳杨军李萍梁凌宇沈心亮谢云飞
- 关键词：真核表达载体基因表达生物活性二氢叶酸还原酶
- 极稀溶液中聚N,N-二乙基丙烯酰胺构象转变机理的研究
- 合成了苊烯(ACE)标记的聚N,N-二乙基丙烯酰胺(PDEA)、N，N-二乙基丙烯酰胺与N-羟甲基丙烯酰胺共聚物(P(DEA-co-NHMAA))和N，N-二乙基丙烯酰胺与苯乙烯共聚物(P(DEA-co-St));利用光...
- 陈勇
- 关键词：构象转变氢键静电疏水缔合
- 文献传递
- 人巨细胞病毒糖蛋白gB基因重组腺病毒载体的构建及包装
- 目的：构建携带有人巨细胞病毒糖蛋白gB基因的重组腺病毒载体，利用重组腺病毒表达功能蛋白，产生类病毒颗粒。
方法：首先将gB克隆至穿梭质粒Track-CMV构建重组质粒，再次克隆至转移载体pAD-Easy-1，构...
- 马超陈勇巩俐郭敏李萍蒋琳
- 关键词：人巨细胞病毒糖蛋白GB基因腺病毒载体基因克隆
- 文献传递
- 长效GLP-1受体激动剂的研发进展被引量：3
- 2017年
- 胰高血糖素样肽-1(glucagon-like Peptide-1,GLP-1)是机体在葡萄糖等刺激下释放的一类肠促胰岛素。GLP-1具有促进葡萄糖依赖性胰岛素分泌,促进胰岛β细胞增殖并抑制其凋亡、抑制摄食、减慢胃排空和减轻体重等作用。GLP-1在体内极不稳定,易被二肽基肽酶-IV(dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV)降解,半衰期短。从墨西哥巨蜥蜴唾液中分离得到GLP-1的天然类似物Exendin-4与其有着相似的作用,且不易被DPP-IV降解。以GLP-1及Exendin-4为基础,研发长效GLP-1受体激动剂,已成为研发新型糖尿病治疗药物的热点之一。本文就长效GLP-1受体激动剂的研发现状予以综述。
- 贝凯(综述)蒋琳陈勇
- 关键词：胰高血糖素样肽-1长效化2型糖尿病
- 恶性疟原虫膜蛋白Pfs25在毕赤酵母中的组成型表达被引量：6
- 2011年
- 目的:Pfs25蛋白是传播阻断型恶性疟疾疫苗的侯选抗原,在毕赤酵母中表达Pfs25蛋白,并对表达产物进行鉴定。方法:参照GenBank中公布的pfs25基因序列,通过毕赤酵母喜好密码子分析人工合成目的基因;采取定向克隆策略构建重组表达质粒pfs25/pGAPZαA,经BstXⅠ线性化,电转染法转化酵母菌株GS115,在Zeocin抗性的筛选培养基上获得表达目的基因的pfs25/pGAPZαA/GS115重组酵母菌,SDS-PAGE和Western印迹检测表达产物;通过在YPD培养基上传代培养和目的基因表达,验证重组菌株的遗传稳定性。结果:在毕赤酵母中表达了Pfs25蛋白,且重组菌株遗传性质稳定。结论:为研制基于Pfs25蛋白的传播阻断型恶性疟疾疫苗奠定了基础。
- 陈勇雷清刘晓马亚茹卜晓萍蒋琳
- 关键词：毕赤酵母组成型表达
- 恶性疟原虫CSP基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量：1
- 2016年
- 目的用毕赤酵母表达系统表达恶性疟原虫环子孢子蛋白（CSP）,便于恶性疟疾疫苗的进一步研究。方法根据Gen Bank得到恶性疟原虫7G8的基因序列,选取该序列628~1 194位基因,以密码子最佳化为原则合成基因后构建酵母表达载体CSP/p GAPZa A,电转毕赤酵母菌PDI-GS115,获得酵母重组体。三角瓶规模表达重组菌,获得表达上清。结果经SDS-PAGE电泳、Western blot检测表达上清,均显示有目的蛋白表达。结论在毕赤酵母中实现了CSP基因的表达,为恶性疟疾疫苗的研发作了必要的补充。
- 雷清梁凌宇王爱秀陈俏丽李刚陈勇蒋琳
- 关键词：环子孢子蛋白毕赤酵母基因表达
- 人干扰素和脑啡肽融合蛋白的表达和生物学活性被引量：3
- 2002年
- 以INFα -m基因为模版 ,采用overlappingPCR技术构建甲硫氨酸脑啡肽干扰素表达质粒 pBV2 2 0 /Enk - /Met-INFα -m ,转化大肠杆菌DH5α表达 ,产物以包涵体形式存在。包涵体经分离、变性、复性 ,然后经CM -Sepharose-FF、DEAE -Sepharose -FF离子交换层析和Sephacryal-HR10 0分子筛纯化 ,获得较纯的Enk -IFNα -m融合蛋白。生物活性检测表明 ,融合蛋白不仅具有干扰素的抗病毒、抗增殖、增强NK细胞功能的活性 。
- 吕宏亮陈勇李武平段招军魏开坤赵军侯云德
- 关键词：人干扰素脑啡肽融合蛋白生物学活性
- 脑啡肽-干扰素α-m融合蛋白外用治疗单纯疱疹病毒感染被引量：1
- 2002年
- 为探讨脑啡肽 -干扰素α -m融合蛋白 (EI)外用治疗单纯疱疹病毒感染的作用 ,分别用HSV - 1感染兔子角膜、HSV - 2感染豚鼠阴道建立动物感染模型。兔子角膜感染 2 4h后用融合蛋白滴眼液治疗 ,每天 3次 ,每次0 5ml,共 14天。豚鼠阴道感染 4 8h后 ,用融合蛋白涂剂抹外阴病灶 ,每天 3次 ,每次 10mg ,共 14天。用IFNα -m和生理盐水 /赋形剂作为对照。采用记录病损程度分级法进行临床症消减观察 ,并于治疗前后测定实验动物病灶病毒滴度、HSV抗体滴度及NK细胞活性。结果显示 :与IFNα -m相比 ,EI治疗组实验动物病毒感染症状大幅减轻且病程缩短 ,动物病灶中病毒滴度下降 ,抗HSV抗体滴度升高 ,NK细胞活性增强。说明脑啡肽干扰素融合蛋白具有较强的消除炎症和局部抗病毒作用 。
- 吕宏亮李武平张成海马超王玉淋邹勇衣作安陈勇吴斌文段招军侯云德
- 关键词：脑啡肽融合蛋白外用单纯疱疹病毒感染
- 人巨细胞病毒糖蛋白gB基因重组腺病毒载体的构建及包装被引量：3
- 2008年
- 目的构建携带有人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白gB基因的重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中进行包装。方法将gB基因克隆至穿梭质粒Track-CMV,构建重组质粒Track-CMV/gB,亚克隆至转移载体pAD-Easy-1,构建重组质粒pAD-Easy-1/gB,将该重组骨架质粒转染HEK293细胞,利用HEK293细胞产生重组腺病毒。空斑法及PCR法挑选重组病毒,荧光显微镜观察标志蛋白(绿色荧光蛋白)的表达,利用噬斑法检测病毒滴度。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确,转染重组腺病毒载体的HEK293细胞经PCR扩增,可见约700bp的目的基因片段,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达,空斑试验检测病毒滴度为2×106PFU/ml。结论已成功构建了含有gB基因的重组腺病毒载体,为进一步研制重组腺病毒载体HCMV疫苗提供了条件。
- 马超陈勇巩莉郭敏李萍蒋琳
- 关键词：人巨细胞病毒腺病毒载体
- 青藏高原冰雪微生物多样性及其与气候环境关系的研究
- 冰川由于其独特的地理环境特征蕴藏着大量具有独特遗传学和适应环境变化机制的微生物，是一个天然的微生物的“储存库”，记录着不同时期大气环流向冰川输送的微生物菌群数量和结构变化，是包含生物进化以及地球上生物生存环境变化信息的优...
- 陈勇
- 关键词：青藏高原冰川微生物菌群气候环境流式细胞技术
- 文献传递
