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盐酸纳洛酮对大鼠颅脑损伤后神经细胞凋亡及脑水肿的影响被引量：3: 2009年; 目的探讨纳洛酮对大鼠颅脑损伤后神经细胞凋亡状态及脑水肿的影响。方法采用Feeney氏自由落体法制备脑损伤动物模型，将100只SD大鼠随机分为3组：假伤对照组（n=20）、损伤对照组（n=40）及治疗组（n=40）。治疗组再分4个亚组，每组10只，分别于伤后30min，6h，24h及48h给予纳洛酮，而各对照组在各时间点均给予等量的生理盐水，伤后第7天断头处死大鼠，采用缺口末端标记法（TUNEL）原位标记DNA片段检测神经细胞凋亡情况，采用干湿法测定脑组织含水量。用SPSS 10．0统计软件进行方差分析，组间比较采用单因素方差分析，以P〈0．05为并异具有统计学意义。结果损伤对照组神经细胞凋亡数和脑组织含水量较假伤对照组显著增加（P〈0．05）；与损伤对照组比较，各治疗组神经细胞凋亡数和脑组织含水量均显著减少（P〈0．05）；治疗组中各给药亚组间比较，早期给药组（伤后30min及6h）神经细胞凋亡数明显少于晚期给药组（伤后24h及48h，P〈0．05），但脑组织含水量无明显差异（P〉0．05）。结论纳洛酮可通过减轻神经细胞的凋亡及脑水肿以实现对神经细胞损伤的保护作用，且早期使用效果更佳。; 魏晓捷陈再丰傅小君许信龙潘红松谢青松; 关键词：纳洛酮颅脑损伤脑水肿凋亡

骨髓间充质干细胞向功能性神经元的横向分化: 2012年; 背景:骨髓间充质干细胞定向分化为神经干细胞并探讨提高分化效率的方法,具有重要的理论与实际应用意义。目的:建立以不同诱导方法横向分化大鼠骨髓间充质干细胞为功能神经元的方法。方法:分离、纯化得到骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物。将骨髓间充质干细胞分为神经营养因子诱导组、化学诱导组和对照组,骨髓间充质干细胞分别加入脑源性神经营养因子和碱性成纤维细胞生长因子、二甲亚砜和丁香茴醚、PBS进行诱导。结果与结论:神经营养因子诱导组和化学诱导组诱导后的细胞均表达神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2,且2组细胞的表达量接近(P>0.05),而对照组未发现神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2阳性表达。膜片钳系统检测发现神经营养因子诱导组诱导后的细胞具有神经细胞特征性的动作电位和兴奋性突触后电流,而化学诱导组和对照组均未发现动作电位和兴奋性突触后电流。提示脑源性神经营养因子联合碱性成纤维细胞生长因子是一种诱导骨髓间充质干细胞横向分化为功能神经元的可靠方法。; 黄保胜王天路李立新谢青松田和平张寅; 关键词：定向分化骨髓间充质干细胞神经元兴奋性突触后电位神经元特异性烯醇化酶微管相关蛋白2

氨甲环酸联合钻孔引流术治疗对慢性硬膜下血肿术后复发的临床研究: 目的：研究慢性硬膜下血肿钻孔引流术联合血肿腔内应用氨甲环酸对慢性硬膜下血肿(CSDH)术后复发率的影响.方法：采用前瞻性随机对照研究，将我院近2年内慢性硬膜下血肿50例随机分为实验组和对照组，每组25例.实验组行钻孔引流...; 傅小君许信龙谢青松胡益岚方战舰; 关键词：慢性硬膜下血肿术后复发钻孔引流术氨甲环酸疗效评价

经颅多普勒监测通心络胶囊对高血压脑出血后脑血管痉挛的治疗作用被引量：3: 2013年; 目的分析经颅多普勒(TCD)监测通心络胶囊对高血压脑出血后脑血管痉挛(CVS)的治疗价值。方法将70例有症状并经TCD证实有CVS的高血压脑出血患者采用数字随机表法随机分为两组,即常规西医治疗组35例,通心络胶囊治疗组35例。通心络胶囊治疗组在常规西医治疗的基础上加用通心络胶囊治疗,治疗期间根据患者症状变化动态检测TCD,包括大脑中动脉(MCA)及椎动脉(VA)脑血流速度,分析通心络胶囊对CVS的治疗效果。结果通心络胶囊组血管痉挛的改善程度明显优于对照组,且CVS恢复正常所需要时间也短于对照组(P<0.05)。结论 TCD是监测CVS的有效方法,通心络胶囊对高血压脑出血后脑血管痉挛及相关临床症状有明显的改善作用。; 许信龙陈再丰魏晓捷傅小君潘红松谢青松闻路通; 关键词：经颅多普勒通心络胶囊高血压脑出血脑血管痉挛

脊髓组织工程的体外构建被引量：3: 2007年; 目的:观察神经干细胞在聚乳酸-羟基乙酸支架上的生长和分化行为,探讨组织工程体外构建人工脊髓修复脊髓损伤。方法:实验于2005-10/2006-06在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成。①在聚乳酸-羟基乙酸支架(孔径200～300μm,孔隙率90%,聚乳酸/聚羟基乙酸=75∶25;山东医疗器械研究所)上种植孕14d的胚胎大鼠脑细胞,培养7d。②将培养7d的聚乳酸-羟基乙酸支架置入含体积分数为0.05的胎牛血清和含脑源性神经营养因子20μg/L的DMEM/F12培养基中继续培养5d,诱导其向神经元分化。③用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在聚乳酸-羟基乙酸支架上的生长和分化行为;应用免疫组织化学鉴定聚乳酸-羟基乙酸支架上培养的细胞。结果:①神经干细胞生长形态:神经干细胞克隆球充满聚乳酸-羟基乙酸支架孔隙,其形状近似孔隙的不规则几何形状。②神经干细胞超微结构:诱导分化后,大量神经干细胞长出的神经突触跨越支架孔隙的三维空间结构,布满支架的表面和孔隙,并彼此建立了突触联系。③诱导分化前后的聚乳酸-羟基乙酸石蜡切片免疫组织化学鉴定结果:诱导分化前后免疫组织化学鉴定分别为巢蛋白和微管相关蛋白2抗体阳性,说明诱导分化前是神经干细胞,诱导分化后有神经元形成。结论:聚乳酸-羟基乙酸适合神经干细胞的生长和分化,其孔隙结构规范调节了神经干细胞生长增殖的空间排列,而脑源性神经营养因子调控了神经干细胞的分化方向,可以利用该支架的空间结构和细胞因子适度调控神经干细胞在聚乳酸-羟基乙酸上的生长和分化构建脊髓组织。; 谢青松李立新黄保胜付震胡卫星鲁艾林; 关键词：干细胞脑源性神经营养因子细胞分化脊髓损伤

慢性硬膜下血肿患者白细胞介素-6的检测及临床意义: 2012年; 慢性硬膜下血肿（chronic subdural hematoma，CSDH）是神经外科常见疾病。其发生率占颅内血肿的10％，占硬膜下血肿的25％。钻孔引流术是目前治疗CSDH的首选治疗方法，但仍有3．7％至38％不等复发率翻。本次研究通过对CSDH患者血肿液、血清中炎症标志物白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量检测，旨在探讨血肿局部炎症反应及其在CSDH发生、发展及复发中的作用，为CSDH的治疗及预防复发提供理论依据和新手段。现报道如下。; 周江文傅小君许信龙汤崇辉方战舰华杰谢青松; 关键词：慢性硬膜下血肿白细胞介素-6 CSDH 局部炎症反应

脑源性神经营养因子促进神经干细胞在体内外的定向分化被引量：2: 2007年; 目的:观察脑源性神经营养因子促进神经干细胞在体内外条件下定向分化的作用,探索神经干细胞在体内外定向分化的规律。方法:实验于2006-09/2007-04在南京医科大学分子生物学实验室和动物实验中心完成。①体外研究:取孕14～16d的胚胎大鼠脑组织,以无血清培养基培养获得神经干细胞,随即分成两组进行体外研究。实验组(n=10),加入5%胎牛血清和20μg/L脑源性神经营养因子诱导其体外条件下定向分化,对照组(n=10),仅加入5%胎牛血清,用免疫荧光及流式细胞仪的方法来检测定向分化得到的神经元及其比例。②体内研究:参照Bavetta等的方法制作大鼠脊髓(T10)右半切4mm长块状缺损模型。实验组(n=10):注射移植溴脱氧尿苷标记的细胞密度为1×109L-1的神经干细胞悬液20μL。对照组(n=10):注射移植20μLPBS于模型动物中。12周后,行辣根过氧化物酶神经逆行示踪评价脊髓感觉和传导功能的恢复程度,并取损伤处脊髓组织行免疫组织化学染色,观察缺损处打入的神经干细胞的存活,分化和迁移情况。结果:参加体内实验的20只大鼠均进入结果分析。①体外条件下,两组神经干细胞定向分化后均得到微管相关蛋白2阳性神经元,并且实验组微管相关蛋白2阳性神经元的比例在分化后第3天达最高峰,约为60%,而同期对照组仅约为30%,差异有统计学意义(P<0.05)。②体内条件下,移植12周后,免疫组织化学染色显示:体内实验组损伤脊髓处可见溴脱氧尿苷标记的阳性细胞,且缺损处可见大量神经微丝相关蛋白和神经生长相关蛋白染色阳性的神经元,体内对照组则未见以上两种蛋白染色阳性的神经元。辣根过氧化物酶神经逆行示踪显示:体内实验组脑组织可见到部分辣根过氧化物酶标记阳性神经元,而体内对照组未见辣根过氧化物酶阳性神经元。结论:脑源性神经营养因子促进神经干细胞体内外条件下; 黄保胜李立新谢青松田和平胡卫星傅震; 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子神经元定向分化

脑源性神经营养因子促进bHLH基因的表达和神经干细胞的定向分化被引量：12: 2006年; 目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)对bHLH基因表达和神经干细胞(NSCs)定向分化的影响,探索NSCs分化的机制。方法取孕14 d的胚胎大鼠脑组织,以无血清培养基培养获得NSCs,然后随机分为2组,实验组加入5％胎牛血清(FBS)和20 ng/mL BDNF诱导其定向分化,而对照组仅加5％FBS,用免疫荧光及流式细胞仪的方法来检测分化得到的神经元细胞及其比例,采用RT-PCR技术分析bHLH基因表达的动态变化。结果实验组MAP-2阳性神经元的比例在分化培养后第3 d达高峰,约为60％,而同期对照组仅为30％,差异有统计学意义(P<0．05)。分化后bHLH基因MASH-1、neumD和neurogenin2表达均高于分化前,相同时间段实验组bHLH基因的表达强于对照组(P<0．05)。结论BDNF促进了NSCs向神经元定向分化;bHLH基因参与了NSCs的定向分化过程,其高表达可能有利于NSCs向神经元方向分化。; 谢青松李立新陶轶胡卫星黄保胜; 关键词：神经干细胞神经元神经营养因子分化

新型超顺磁性氧化铁在雪旺细胞移植后活体示踪中的应用研究被引量：1: 2013年; 目的:研究一种新型超顺磁性氧化铁(Superparamagnetic iron oxide,SPIO)在雪旺细胞(SCs)标记及磁共振(MRI)活体示踪中的应用。方法:以二巯基丁二酸修饰三氧化二铁(Fe2O3)配制成一种新型SPIO,用于标记SCs。实验组用SPIO标记SCs,对照组不用SPIO标记,每组各10个样本。对标记后的SCs行普鲁士蓝染色鉴定、MTT测试细胞相对数量。最后将标记后的SCs移植入大鼠脑内,MRI扫描活体示踪。结果:普鲁士蓝染色发现该SPIO可高效率标记SCs,MTT测试表明实验组与对照组的雪旺细胞相对数量无统计学差异(P>0.05),MRI检查发现脑内移植的SPIO标记SCs在T2相上呈明显的低信号。结论:通过二巯基丁二酸修饰Fe2O3获得了新型SPIO,该新型SPIO对细胞增殖及活力无明显影响,不需要转染剂仍可高效率标记SCs,MRI活体显影示踪效果良好。; 周江文谢青松许信龙魏晓捷陈再丰李立新; 关键词：超顺磁性氧化铁雪旺细胞磁共振成像

鼠神经生长因子诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究被引量：4: 2012年; 目的:观察鼠神经生长因子(mNGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的影响。方法:4周龄健康SD大鼠60只,按随机数字表法分为治疗组(n=30)和正常对照组(n=30)。治疗组在常规培养的基础上加入浓度为0.1μg/mL mNGF作为诱导液。将培养的第3代BMSCs制成单细胞悬液,诱导后3d,观察细胞形态变化,行神经元特异性烯醇酶(NSE)免疫荧光检测,计算阳性率。结果:正常对照组细胞仅有少量NSE的表达,治疗组细胞表达NSE阳性率较对照组细胞显著增加(P<0.01)。结论:mNGF可诱导大鼠BMSCs向神经元样细胞分化。; 陈再丰许信龙魏晓捷傅小君潘红松谢青松; 关键词：鼠神经生长因子骨髓间充质干细胞细胞分化

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谢青松

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