王苑芳
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响被引量：8
- 2014年
- 目的:研究游离脂肪酸(FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/LFFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2:1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白(ADRP)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/LFFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/LFFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/LFFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/LFFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论:FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2mmol/LFFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。
- 王辉陈骁项夏霖彭鑫王苑芳刘填桂黄树林邵红伟
- 关键词：非酒精性脂肪肝病游离脂肪酸脂毒性脂肪分化相关蛋白
- 冬凌草甲素抗胰腺癌作用的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨冬凌草甲素诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的作用及其机制。方法:MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态;PI染色后流式细胞术检测PANC-1细胞凋亡率;Western blotting检测JNK和p38 MAPK信号通路凋亡相关蛋白的表达。结果:冬凌草甲素作用PANC-1细胞24 h后,可浓度依赖性降低细胞存活率,IC50为49.80μmol/L。冬凌草甲素50、80μmol/L处理24 h后的PANC-1细胞可见典型的凋亡核改变,流式细胞仪分析细胞凋亡率明显增加。Western blotting结果证实80μmol/L冬凌草甲素可降低PANC-1细胞JNK、p38、Caspase-9、Caspase-3和PARP的蛋白表达,增加p-JNK、p-p38和活化的Caspase-9的蛋白表达。结论:冬凌草甲素可诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,其机制与JNK和p38 MAPK信号转导通路凋亡相关蛋白的活化有关。
- 王辉王苑芳刘填桂项夏霖黄树林
- 关键词：冬凌草甲素凋亡MAPK信号通路
- ERp57在非酒精性脂肪肝中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨蛋白二硫化物异构酶A3(ERp57)在非酒精性脂肪肝病中的作用。方法用1mmol/L脂肪酸混合物(油酸/软脂酸比例为2∶1)作用于人肝细胞L02构建脂肪肝细胞模型,采用RNA干扰技术在脂肪肝模型中抑制ERp57表达。流式细胞仪和荧光显微镜观察抑制ERp57表达后肝细胞脂质堆积情况,流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,Western blot技术检测脂代谢相关蛋白固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1)表达情况。结果 Western blot显示,ERp57 siRNA转染L02细胞有效抑制了ERp57表达,减少了L02细胞内脂质堆积,但对脂肪酸混合物诱导的肝细胞凋亡无明显影响。与对照siRNA转染组相比,ERp57 siRNA转染组肝细胞的SREBP-1蛋白表达下调。结论抑制ERp57表达通过调节脂代谢相关蛋白SREBP-1减少L02细胞内脂质堆积。
- 王辉项夏霖刘填桂王苑芳
- 关键词：非酒精性脂肪肝病脂肪堆积
- 冬凌草甲素抑制肝癌细胞HepG-2生长的实验研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨冬凌草甲素诱导肝癌细胞株HepG-2凋亡的作用及其机制。方法 MTT法检测细胞存活率;Annexin V和PI染色后流式细胞术检测HepG-2细胞凋亡率;Hoechst染色后荧光显微镜观察细胞形态;Western blotting检测MAPK信号通路凋亡相关蛋白的表达。结果冬凌草甲素作用HepG-2细胞24 h后,可剂量依赖性减少细胞存活率,半数抑制率IC50为38.41μmol/L。高、中、低浓度冬凌草甲素处理24 h后的流式结果显示,随浓度增加细胞凋亡率明显增加,HepG-2细胞可见典型的凋亡核改变。Western blotting结果证实冬凌草甲素可降低HepG-2细胞Bcl-2、caspase-9和caspase-3的蛋白表达,增加p-JNK、p-p38、p-p53和活化的caspase-9的蛋白表达。结论冬凌草甲素可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,MAPK信号转导通路凋亡相关蛋白的活化与冬凌草甲素诱导HepG-2细胞凋亡相关。
- 王辉刘填桂王苑芳项夏霖董艳敏
- 关键词：冬凌草甲素肝癌凋亡
