李立人 作品数:26 被引量:410 H指数:10 供职机构: 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
Rubisco活化酶的研究进展 被引量:8 1998年 Rubisco活化酶是最近发现的一种核编码的叶绿体蛋白,它在叶绿体内具有激活光合碳同化限速酶Rubisco的功能。该酶能在生理水平RuBP、CO2浓度(10μmol/L)下使Rubisco达到最大的活化程度。Rubisco活化酶的研究揭示了长期以来未能解决的Rubisco在体内活化的机理。Rubisco活化酶能解除磷酸糖对Rubisco活性的抑制作用,它的活化活性需耍有ATP的存在。同时它有ATP酶的活性,能水解ATP,ATP/ADP的比率对该酶有重要的调节作用。此外;对该酶的分子生物学特性研究进展也作了简要的评述。 唐如航 李立人关键词:RUBISCO RUBISCO活化酶 ATP 蛋白质 相互作用 各种因子对固定化烟草核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶解离作用的影响 被引量:5 1991年 pH,温度、离子强度及效应剂等对固定化烟草RuBP羧化酶在2.5mol/L尿素处理下的解离作用有各种不同的影响。在pH6.0时,仅小亚基从大亚基核(L_8)解离,当pH为中性偏碱时,大亚基核也解离。低温和低离子强度均促进酶的解离,而温度和离子强度对大亚基之间的解离的影响显著大于对大、小亚基之间的影响。这表明酶的亚基之间存在着不同的极性和疏水作用,而大亚基之间的疏水作用比大、小亚基之间的强。6-PG对大、小亚基之间解离的抑制作用表明大亚基上的催化位置与小亚基之间有一定的密切关系。 李立人 李粹芳关键词:烟草 加氧酶 RUBP羧化酶 低温锻炼对水稻幼苗叶片中Rubisco的影响 被引量:32 1997年 低温锻炼能提高水稻幼苗的抗冷力,低温锻炼虽不能明显提高Rubisoc活性,却提高了冷胁条件下Rubisoc的稳定性和增强了胁迫后正常生长条件下其活性的恢复能力。分别用火箭免疫电泳分析Rubisoc蛋白和SDS-PAGE分析大、小亚基量表明:低温锻炼未提高Rubisoc蛋白的合成能力,但增加了大、小亚基的合成量。经锻炼、冷胁迫以及恢复后Lsu/Ssu比值的变化主要是由于小亚基对温度变化更敏感所致。Rubisco酶特性分析表明,低温锻炼有减少水稻幼苗Rubisoc表面的SH数,并提高Rubisco蛋白在高、低温下的稳定性。 赵军 王以柔 李美茹 刘鸿先 缪有刚 李立人关键词:低温锻炼 水稻 幼苗 光和糖对水稻Rubisco活化酶基因表达的影响 被引量:14 1997年 水稻黄化苗在光照2h内其Rubisco。活化酶的mRNA和蛋白量明显增加,然后维持在相对稳定的水平。光对水稻Rubisco活化酶的基因表达的诱导作用主要在转录水平上。Rubisco活化酶主要在绿叶中表达,这与Rubisco基因表达的器官特异性完全一致。用等渗葡萄糖喂养成熟的水稻叶片1h,促使水稻Rubisco大、小亚基和Rubisco活化酶可翻译mRNA含量下降。同样蔗糖对Rubisco小亚基和Rubisco活化酶的表达也有抑制,其作用弱于葡萄糖。 唐如航 贾军伟 李立人关键词:水稻 RUBISCO活化酶 基因表达 分光光度法与^(14)C标记法测定RuBP羧化酶的活性的比较 被引量:17 1989年 方法的原理分光光度酶偶联法是根据RuBP羧化酶催化RuBP产生的磷酸甘油酸与NADH的氧化作用相偶联的原理设计的。当加入ATP及NADH后,NADH在PGK和GAPDH的催化下氧化为NAD^+,每羧化1molRuBP有2molNADH被氧化,根据在波长340nm处光密度的变化。 李粹芳 李立人关键词:RUBP羧化酶 分光光度法 豌豆核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶亚基结合蛋白的纯化及特性 被引量:1 1991年 用^(35)S-Met在照光下与豌豆完整叶绿体保温,显示新合成的标记的RubisCO大亚基与结合蛋白形成一复合物,经ATP处理后解离为结合蛋白亚基,同时释放出的标记的RubisCO大亚基参与了RubisCO的装配。豌豆叶片提取液经热处理,硫酸铵分部,DEAE-Sepharose fast flow和Sephacryl S-300柱层析在ND-PAGE,SDS-PAGE上显示为一条带,估计纯度达90%以上,得率比以前报道的高12倍。纯化的结合蛋白表面巯基数经测定为12±1个,总巯基数为36±1个。远紫外CD光谱具有典型的α-螺旋结构的光谱特性,α-螺旋度为39%。此外,以纯化的豌豆结合蛋白制备了多克隆抗体。琼脂糖双扩散实验显示,结合蛋白的抗体与结合蛋白产生一条沉淀线,而与豌豆的RubisCO无沉淀反应,这表明所得到的抗体是高度专一的。 赵若虹 缪有刚 李立人关键词:豌豆 纯化 RUBISCO 核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶的结构,调节及遗传工程前景 被引量:2 1989年 核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶是光合作用固定二氧化碳的一个关键酶。如能应用遗传工程技术增加其催化效率,有可能导致净光合作用的增加,从而使作物增产。最近用高分辨力的X-射线对烟草酶的空间结构已进行了测定。原核生物酶的定位突变也已开始研究。虽然高等植物酶已可进行体外重组,但小亚基的功能仍不很清楚,大、小亚基基因尚不能在大肠杆菌中表达出有活性的酶。新的大亚基遗传讯息还不能有效地引入叶绿体基因组中。酶的结构与功能关系,催化及分子装配机理等基本问题还需要全面深入研究。 李立人关键词:加氧酶 羧化酶 原核生物 大亚基 体外重组 叶绿体基因组 烟草Rubisco活化酶的纯化及其特性 被引量:20 1997年 利用35%饱和硫酸铵分部、DEAE-Sephacel和FPIC-MonoQ柱层析等步骤从烟草叶片中纯化了Rubisco活化酶,并制备了其专一性抗体。此法不仅快速,而且比活力高。以往认为菠菜和拟南芥Rubisco活化酶由两种亚基组成。通过快速制备的粗提液分析.发现烟草Rubisco活化酶由一种42kD的亚基组成。即使在有多种蛋白酶抑制剂存在的情况下,此亚基仍很易降解为39kD的亚基。ATP不仅对酶的活性所必需,而且也有利于维持酶的稳定性。该酶的热稳定性远比Rubisco差。 唐如航 贾军伟 李立人关键词:RUBISCO活化酶 烟草 纯化 国际叶蛋白的研究及开发 被引量:9 1995年 李立人关键词:叶蛋白 浓缩物 蛋白饲料 大豆蛋白 蛋白质含量 可溶性蛋白 水分胁迫对冬小麦CO_2同化作用的影响 被引量:208 1992年 比较了两个小麦品种陕合6号和郑引1号经受不同程度的水分胁迫处理后,叶片多种光合参数:净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、细胞间隙CO_2浓度(G_i)、表观量子需要量和羧化效率以及Rubis CO蛋白量与活性等的变化。在轻度水分胁迫下,叶片光合速率降低的根本原因在于气孔导度的下降;而在严重胁迫下,非气孔因素起主要作用。 薛崧 汪沛洪 许大全 李立人关键词:水分胁迫 冬小麦