李振荣
- 作品数:14 被引量:5H指数:2
- 供职机构:辽宁出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学理学轻工技术与工程更多>>
- 犬瘟热病毒核衣壳蛋白N基因的真核表达及鉴定被引量:2
- 2008年
- 根据GenBank发表的犬瘟热病毒N基因全序列,设计合成了1对特异扩增CDVN基因的引物。以山东泰安分离的CDV-FOX-TA株细胞毒中提取病毒RNA来制模板,利用RT-PCR扩增出了1.6kb的N基因,将其克隆到pIREShyg载体上,构建了pIRES-N真核表达载体。然后通过磷酸钙共沉淀法转染CHO-K1细胞,通过潮霉素筛选得到阳性克隆,间接免疫荧光实验(IFA)鉴定N基因在CHO细胞中的表达,并用RT-PCR方法从转录水平证实N基因在CHO-K1细胞中的表达,最终建立了CHO/CDV-N细胞株,为犬瘟热病毒的血清学检测和基因疫苗的研制奠定了基础。
- 简中友贾赟王全凯徐立秋吴斌肇慧君李振荣
- 关键词:犬瘟热病毒N基因潮霉素CHO-K1细胞
- 实时荧光定量法检测新城疫疫苗株和野毒株前处理方法比较
- 2009年
- 从缓冲液处理、倍比稀释、反复冻融等几个方面来对检验样品进行前处理,以期寻找更优的前处理方法,为进出口鸡肉产品中新城疫病毒的检测提供可靠参考。采用pH7.2的磷酸盐缓冲溶液(PBS),加入双抗的PBS、0.9%生理盐水、Hank's液等不同的缓冲液对样品进行前处理,结果表明,pH7.2的PBS效果最好;对鸡拭子进行倍比稀释,结果表明,当稀释度达到1:128时,检测结果为阴性;反复冻融对检测结果影响不大。
- 高玉峰刘杰李宪臻李振荣徐立秋
- 关键词:新城疫病毒前处理
- 进出境经济动物中多种重要疫病基因库的建立及复合PCR检测方法的研究
- 李叶杜雄伟吴斌李振荣耿庆华胡传伟贾赟肇惠君张桂红
- 1.建立经济动物疫病的种毒库,为该类疫病的研究奠定材料基础;2.建立多种经济动物疫病核酸序列数据库,为以后病毒株的遗传、衍化方向提供基础技术支持;3.调查我国多种经济动物疫病的流行特点,为疫病的诊断奠定基础;4.建立多种...
- 关键词:
- 关键词:经济动物基因库多重PCR
- 犬瘟热病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的研究及试剂盒的研制
- 贾赟苏永生富亮曹瑞兵肇慧君米风全李振荣
- 犬瘟热(Canine Distemper,CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus,CDV)感染引起犬或其它食肉动物的一种急性、高传染性、致死性的疾病,临床上以双相热、急性鼻卡他、结膜炎、严重的...
- 关键词:
- 关键词:犬瘟热病毒重组N蛋白间接ELISA
- 十种检疫性植原体病害快速检测技术研究
- 王有福姜丽曹冬梅李鑫刘伟李振荣胡强刘卉秋王晓明陈丽闫平平杨洋
- 随着人们生产和生活的需要,中国每年都要从国外引进大量的水果及其苗木,由于植原体病害能潜伏侵染,在进口检疫时极易蒙混过关,进境后一旦扩散,将严重威胁中国果树及林木产业。但针对检疫性植原体尚未建立快速、有效的检测手段,该项目...
- 关键词:
- 关键词:病害鉴定
- 检测犬瘟热病毒抗体的重组N蛋白-ELISA方法的建立及应用被引量:4
- 2008年
- 将已构建成功的重组质粒pET-N转化入Rosetta2(DE3)菌株中,在IPTG诱导下获得重组N蛋白。用镍离子亲和层析方法对表达产物进行纯化,对纯化效果及纯化产物的特异性进行SDS-PAGE电泳及Western blot检测。以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种反应条件进行了优化,建立了检测CDV抗体的间接ELISA方法。用此方法检测了270份血清样品,并与法国Synbiotics公司ELISA试剂盒检测结果相比较,符合率达92.4%。为应用血清学方法对犬科动物进行犬瘟热流行病学的调查奠定了基础。
- 简中友贾赟王全凯徐立秋胡传伟李叶李振荣
- 关键词:重组质粒重组N蛋白间接ELISA
- 禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测方法的建立
- 2011年
- 为给禽传染性支气管炎病毒(IBV)的诊断奠定基础,对特异、敏感、快速的荧光PCR检测方法的建立进行了试验研究。结果表明,该荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、所需时间短(从核酸提取至检测完成,仅需3h左右),且该方法实行完全闭管式操作,从根本上杜绝了常规PCR扩增产物污染和假阳性的问题,该方法适用于实验室快速检测。
- 李丹杜雄伟李叶李振荣
- 关键词:禽传染性支气管炎病毒荧光PCR
- 多种猪腹泻类病毒分子生物学快速检测方法的建立及诊断试剂盒的研制
- 苏永生贾赟姚龙泉曹瑞兵富亮李振荣李叶胡传伟
- 本研究分别选择这三种腹泻病毒的高度保守的基因区域为目的基因,设计引物、探针,用Taq man荧光定量RT-PCR方法对这三种病毒的细胞毒、各种组织病料、及粪便样品进行检测,同时与经典方法、普通RT-PCR、国外试剂盒等检...
- 关键词:
- 关键词:TAQMAN探针
- 食品微生物学参考标准物质(菌落总数、沙门氏菌、单增李斯特氏菌)的研制
- 卢行安于凤琴曹志军郑江刘冉李天顺麻丽丹王刚李振荣
- 本研究是国家质检总局科研课题项目,课题的编号为2005IK009。本研究只要是食品微生物学参考标准物质(菌落总数、沙门氏菌、单增李斯特氏菌)的研制,对食品微生物学参考标准物质的菌相组成、制备工艺进行了比较全面的研究,最终...
- 关键词:
- 关键词:食品微生物学
- 多种经济动物传染性疾病病原分子生物学快速检测方法的研究及其试剂盒的研制
- 胡传伟林颖苏永生李振荣王宝山李叶丁家波耿庆华
- 本课题建立了应用PCR技术、实时定量PCR技术检测水貂阿留申病毒、犬细小病毒、猫传染性鼻炎病毒的方法,主要原理和技术攻关的内容包括以下几个方面:1.根据病毒的分子生物学特点,设计特异的引物与探针序列,通过对反应条件的优化...
- 关键词:
- 关键词:经济动物传染性疾病试剂盒