廉超
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰在胃癌多药耐药中的研究进展被引量：1
- 2013年
- 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,化疗是胃癌术后的主要治疗措施,而多药耐药性的产生常导致化疗失败,严重阻碍化疗进程,直接影响患者预后,因而促使人们对胃癌多药耐药问题进行深入研究.RNA干扰技术能特异、有效地阻断靶基因的表达,近年来已逐渐应用于胃癌多药耐药的基因治疗,并取得了较大进展.本文就目前RNA干扰在胃癌多药耐药研究中的相关进展作一综述.
- 廉超谢玉波肖强
- 关键词：RNA干扰胃癌多药耐药
- 应用酵母双杂交系统筛选E2F1相互作用蛋白
- 2012年
- 目的:应用酵母双杂交系统从人正常胃黏膜细胞的cDNA文库中筛选E2F1转录因子的相互作用蛋白。方法:以pGBKT7-E2F1为诱饵质粒筛选人正常胃黏膜细胞的cDNA文库,得到阳性克隆,反复验证,并对验证后的阳性克隆进行测序及同源性分析。结果:从人正常胃黏膜细胞的cDNA文库中筛选得到20个阳性克隆,经测序和同源性分析,筛除假阳性克隆,最终得到18个不同的候选基因序列。其中,17个为可知基因序列,它们分别是:组织蛋白酶B、SIVA1、干扰素调节因子7、鸟苷酸激酶1、ATP酶抑制因子1、核糖体蛋白SA、纤溶酶原激活物抑制剂1 mRNA结合蛋白、精氨琥珀酸合酶1、卵泡抑素类似物3、金属硫蛋白2A、内质网钙结合蛋白1、WNT1可诱导信号通路蛋白2、CDC42效应蛋白1、可溶性半乳糖凝集素结合蛋白1、中胚层发育候选2、外切酶体成分7和含EGF腓骨蛋白样胞外基质蛋白1,尚有一未知基因片段。结论:应用酵母双杂交系统成功筛选出18种E2F1相互作用蛋白,为进一步探讨E2F1影响胃癌细胞生物学行为的分子机制奠定了基础。
- 廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：酵母双杂交系统胃肿癌相互作用蛋白
- Cdx2过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察Cdx2基因过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响。方法利用脂质体将pCMV-Cdx2-HA质粒或pCMV-HA质粒分别转染人胃癌MGC-803细胞,命名为MGC-803/Cdx2细胞或MGC-803/EV细胞。将两种细胞分别注射入裸鼠近腋右背侧皮下,待皮下成瘤后将瘤组织接种于胃,建立裸鼠人胃癌移植瘤模型:接种MGC-803/Cdx2皮下瘤的裸鼠为实验组,接种MGC-803/EV皮下瘤的裸鼠为对照组;30 d后处死裸鼠,观察移植瘤生长、转移情况,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2 mRNA和蛋白的表达。结果实验组肿瘤体积为(13.42±2.34)mm3,明显低于对照组的肿瘤体积(17.59±2.80)mm3(P<0.05);实验组成瘤率(73.3%)低于对照组成瘤率(86.7%);两组肿瘤转移情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组肿瘤组织Cdx2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 Cdx2过表达抑制裸鼠人胃癌移植瘤的生长,但对肿瘤转移无明显影响。
- 廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌移植瘤
- 尾型同源盒基因2沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的逆转被引量：5
- 2014年
- 目的探讨尾型同源盒基因2（Cdx2）沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP接种于培养板中，分为3组：感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体（pLL—Cdx2-shRNA）作为实验组；感染慢病毒空载体作为阴性对照组；空白对照组不做任何处理。Westernblot及RT—PCR检测Cdx2及凋亡相关基因C—myc、cyclinD1、survivin等蛋白及mRNA表达水平；MTT法检测3组细胞对化疗药物阿霉素、5．氟尿嘧啶、顺铂的敏感性；流式细胞技术检测3组细胞阿霉素的泵出率、细胞周期分布及细胞凋亡情况。计量资料用面±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用SNK—q检验，计数资料采用，检验。结果实验组、阴性对照组、空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP中各蛋白相对表达量：Cdx2分别为0．187±0．060、0．535±0．033、0．567±0．014，C—myc分别为0．086±0．004、0．379±0．006、0．354±0．004，cyclin D1分别为0．016±±0．005、0．141±0．003、0．162±0．008，survivin分别为0．276±0．012、0．672±0．009、0．517±0．313，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述蛋白表达量明显下降，差异有统计学意义（F=247．385，3．353，597．882，98．628，P〈0．05）。实验组、阴性对照组、空白对照组mRNA相对表达量：cdx2分别为0．184±0．010、0．894±0．056、0．837±0．049，c—myc分别为0．212±0．022、0．538±0．021、0．545±0．032，cyclinD1分别为0．045±0．009、0．163±0．009、0．157±0．010，survivin分另4为0．401±0．027、0．824±0．016、0．782±0．056，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述基因mRNA表达量明显下降，差异有统计学意义（F=243．776，161．793，138．523，118．426，P〈0．05）。MTT法检测实验组、阴性对照组和空白对照组人胃癌
- 罗文杨杰廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：多药耐药性
- E2F-1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性被引量：4
- 2013年
- 目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-E2F-1组;以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNANC组;空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50),并以AxnnexinV-PE/7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Western blot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bcl-2的mRNA及蛋白水平进行检测。结果与Lv-shRNA-NC组和空白对照组相比,Lv-shRNA-E2F-1组细胞对顺铂的IC50显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞周期阻滞于G0/G1期,差别均有统计学意义(P<0.05);Lv-shRNA-E2F-1组E2F-1mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%,蛋白水平分别下降66.7%和70.5%(均P<0.01);LvshRNA-E2F-1组survivin mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降30.3%和28.7%,蛋白水平分别下降56.5%和53.6%(均P<0.01);Lv-shRNA-E2F-1组Bcl-2 mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降76.6%和76.8%,蛋白水平分别下降74.6%和79.9%(均P<0.01);Lv-shRNA-NC组与空白对照组比较,上述指标差别均无统计学意义(均P>0.05)。结论:沉默E2F-1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性,其机制可能与survivin及Bcl-2表达下调有关,提示E2F-1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。
- 廉超杨杰王晓通谢玉波肖强
- 关键词：E2F-1胃癌CISPLATIN
- E2F-1基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC7901／顺铂多药耐药性的逆转被引量：3
- 2014年
- 目的探讨E2F一1基因沉默后对人胃癌顺铂（DDP）耐药细胞株SGC7901／DDP多药耐药性的影响及可能的作用机制。方法将人胃癌耐药细胞株SGC7901／DDP接种于6孔板，并分为以E2F-1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA—E2F-1感染的SGC7901／DDP细胞（实验组）、以对照慢病毒颗粒Lv-shRNA，NC感染的SGC7901／DDP细胞（阴性对照组）以及常规培养的SGC7901／DDP细胞（空白对照组）。采用Westernblot技术检测各组细胞中E2F-1蛋白的表达，采用四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对各组细胞的半数抑制浓度（IC50），采用流式细胞术检测各组细胞中阿霉素的泵出率和细胞凋亡率，采用半定量RT—PCR和Westernblot技术检测各组细胞中多药耐药基因1（MDRl）、多药耐药相关蛋白（MRP）及凋亡相关基因cyclinD1、c-Myc、Skp2mRNA和蛋白的表达水平。结果实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量分别为0．794±0．033、1．487±0．082和1．5114-0．084，实验组SGC7901／DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量较阴性对照组和空白对照组分别下降46．6％和47．5％（P〈0．01）。阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对实验组SGC7901／DDP细胞的Ic50均较阴性对照组和空白对照组明显降低（均P〈0．01）。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率分别为（0．16±0．01）％、（0．37±0．01）％和（0．35±0．02）％，实验组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率明显低于阴性对照组和窄白对照组（P〈0．01）。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞的凋亡率分别为（33．82±1．26）％、（17．34±0．81）％和（13．164-1．06）％，实验组SGC7901／DDP细胞的凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组（P〈0．01）。与阴性对照组和空白对照组比较，实验组SGC7901／DDP细胞中MDRl、MRP、cycl
- 廉超杨杰王晓通谢玉波肖强
- 关键词：顺铂
