罗文
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导的E2F-1沉默对人胃癌细胞MGC803中药人参黄芪复方药物敏感性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:利用重组慢病毒介导的E2F-1基因沉默载体感染人胃癌MGC-803细胞,观察其对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响.方法:将胃癌MGC-803细胞接种于培养板中分为4组:正常组(正常培养基)、空白对照组(中药培养基)、阴性对照LV-RNAi组(中药培养基+感染空载体慢病毒颗粒2.0×109TU/mL)、E2F-1-RNAi-LV组(中药培养基+感染E2F-1基因重组慢病毒颗粒2.0×109TU/mL),分别采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测E2F-1mRNA及蛋白表达;MTT方法检测细胞的增殖抑制率;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;流式细胞仪检测细胞的凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果:E2F-1基因沉默蛋白及mRNA表达水平均明显下降,差异有统计学意义(0.384±0.036vs0.883±0.051和0.923±0.049,0.220±0.056vs0.729±0.021和0.712±0.037,P<0.05).中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成及迁移;与空白对照组及阴性对照组相比较,E2F-1基因沉默组MGC-803细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著提高,其细胞克隆形成、细胞迁移面积显著降低,差异均有统计学意义(0.789±0.013vs0.484±0.060和0.454±0.006,0.383±0.027vs0.114±0.038和0.089±0.051,0.024±0.003vs0.036±0.004和0.052±0.002,0.553±0.038vs0.897±0.020和0.928±0.051,P<0.05).结论:重组慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默能有效增强中药人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞的药物敏感性.
- 罗文吴锟王晓通谢玉波肖强
- 关键词：E2F-1人胃癌MGC803细胞药物敏感性
- 转录因子CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探索CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法:采用携带CDX2基因的重组慢病毒颗粒(LV-CDX2-GFP)感染SGC-7901细胞,作为实验组(LV-CDX2-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染SGC-7901细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞周期的分布,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测细胞中CDX2、Bax、Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-CDX2-GFP组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导的CDX2过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与CDX2过表达使胃癌细胞Bcl-2、cyclin D1、survivin表达下调和Bax表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：SGC-7901细胞
- siRNA介导的E2F-1基因沉默对胃癌细胞MGC803中Rb蛋白表达水平的影响被引量：1
- 2012年
- 目的应用RNA干扰技术研究E2F-1基因沉默在人胃癌MGC803细胞中对Rb蛋白表达的影响。方法将重组质粒E2F-1-siRNA转染MGC803细胞,筛选稳定株,利用RT-PCR检测转染前后细胞E2F-1mRNA表达水平,并通过蛋白免疫印记法(Western blot)检测各组细胞E2F-1蛋白的表达水平来验证质粒转入胃癌细胞的情况。采用Western blot检测三组细胞中总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的表达情况,计算出非磷酸化Rb蛋白表达情况,统计各组间的差异。结果重组质粒E2F-1-siRNA成功转入胃癌细胞中;有效抑制了E2F-1 mRNA的表达,E2F-1蛋白水平显著下降,与阴性对照组及未转染组相比分别降低了83.2%和84.6%,去磷酸化Rb蛋白分别增加了61.22%(P<0.05)和66.60%(P<0.05),差异有统计学意义。结论沉默表达E2F-1基因后,可以有效降低Rb蛋白的水平,促进其活化形式去磷酸化Rb蛋白的产生。
- 孔凡彪王晓通韦尉元罗文肖强
- 关键词：E2F-1RB蛋白去磷酸化
- 慢病毒介导E2F-1基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的探索E2F-1基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制。方法用携带E2F-1基因的重组慢病毒颗粒(LV-E2F-1-GFP)感染人胃癌MGC-803细胞,作为实验组(LV-E2F-1-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LVGFP)感染人胃癌MGC-803细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。用RT-PCR和Western blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2和survivin基因的表达。结果与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-E2F-1-GFP组人胃癌MGC-803细胞Skp2、Bcl-2和survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05)。结论慢病毒介导E2F-1基因过表达可能通过降低Skp2、survivin、Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达来抑制人胃癌MGC-803细胞增殖。
- 曹稳珑韦尉元罗文张笑石严林海谢玉波肖强
- 关键词：胃癌MGC-803细胞E2F-1过表达
- 尾型同源盒基因2沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的逆转被引量：5
- 2014年
- 目的探讨尾型同源盒基因2（Cdx2）沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP接种于培养板中，分为3组：感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体（pLL—Cdx2-shRNA）作为实验组；感染慢病毒空载体作为阴性对照组；空白对照组不做任何处理。Westernblot及RT—PCR检测Cdx2及凋亡相关基因C—myc、cyclinD1、survivin等蛋白及mRNA表达水平；MTT法检测3组细胞对化疗药物阿霉素、5．氟尿嘧啶、顺铂的敏感性；流式细胞技术检测3组细胞阿霉素的泵出率、细胞周期分布及细胞凋亡情况。计量资料用面±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用SNK—q检验，计数资料采用，检验。结果实验组、阴性对照组、空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP中各蛋白相对表达量：Cdx2分别为0．187±0．060、0．535±0．033、0．567±0．014，C—myc分别为0．086±0．004、0．379±0．006、0．354±0．004，cyclin D1分别为0．016±±0．005、0．141±0．003、0．162±0．008，survivin分别为0．276±0．012、0．672±0．009、0．517±0．313，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述蛋白表达量明显下降，差异有统计学意义（F=247．385，3．353，597．882，98．628，P〈0．05）。实验组、阴性对照组、空白对照组mRNA相对表达量：cdx2分别为0．184±0．010、0．894±0．056、0．837±0．049，c—myc分别为0．212±0．022、0．538±0．021、0．545±0．032，cyclinD1分别为0．045±0．009、0．163±0．009、0．157±0．010，survivin分另4为0．401±0．027、0．824±0．016、0．782±0．056，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述基因mRNA表达量明显下降，差异有统计学意义（F=243．776，161．793，138．523，118．426，P〈0．05）。MTT法检测实验组、阴性对照组和空白对照组人胃癌
- 罗文杨杰廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：多药耐药性
- E2F-1过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其机制
- 2014年
- 目的探讨E2F-1过表达对胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法采用携带E2F-1基因的重组慢病毒颗粒(LV-E2F-1-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞(LV-E2F-1-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞作为阴性对照(LV-GFP组);空白对照组常规培养胃癌SGC-7901细胞,不作任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测各组细胞周期的分布,RT-PCR和Western blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因mRNA和蛋白的表达。结果与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-E2F-1-GFP组人胃癌SGC-7901细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Skp2、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒介导E2F-1基因过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与E2F-1基因过表达使胃癌细胞Skp2、Survivin、Bcl-2、CylinD1基因表达下调和Bax基因表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：胃癌SGC-7901细胞E2F-1过表达
- 慢病毒介导Cdx2基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨Cdx2基因过表达对胃癌细胞周期凋亡相关基因Skp2、Survivin、Bcl-2和Bax表达的影响,及其抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制。方法:利用携带Cdx2基因的重组慢病毒颗粒(LVCDX2-GFP)、空载体慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人胃癌MGC-803细胞,分别作为实验组(LV-CDX2-GFP)、阴性对照组(LV-GFP),未转染处理的人胃癌MGC-803细胞作为空白对照组,以上三组细胞按照常规培养,应用RT-PCR和Westren blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2以及Survivin基因的mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-Cdx2-GFP组人胃癌MGC-803细胞Skp2、Bcl-2和Survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导Cdx2基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,其分子机制可能通过Cdx2调控Skp2、Survivin、Bcl-2和Bax基因表达,进而启动下游相关信号通路有关。
- 张笑石韦尉元罗文曹稳珑严林海谢玉波肖强
- 关键词：MGC-803细胞CDX2过表达
- 慢病毒介导特异性核转录因子尾型同源基因2过表达对人胃癌裸鼠耐药模型耐药性的影响及其机制
- 2014年
- 肿瘤细胞多药耐药性与某些基因密切相关，Takakura等研究结果显示，特异性核转录因子尾型同源基因2（CDX2）与肿瘤多药耐药性密切相关，但作用机制尚不明确。本实验旨在观察CDX2基因过表达后对人胃癌耐顺铂细胞SGC-7901／DDP裸鼠皮下移植瘤耐药性产生的影响，并进一步检测经典多药耐药相关基因多药耐药基因1（MDR1）、
- 曹稳珑严林海韦尉元张笑石罗文谢玉波肖强
- 关键词：细胞多药耐药性核转录因子同源基因特异性慢病毒介导
