唐玉新
- 作品数：67 被引量：288H指数：10
- 供职机构：江西农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种抗猪流行性腹泻病毒nsp13蛋白的单克隆抗体及应用
- 本发明涉及生物工程技术领域，具体公开了一种抗猪流行性腹泻病毒nsp13蛋白的单克隆抗体及制备方法与应用。所述抗猪流行性腹泻病毒nsp13蛋白的单克隆抗体为杂交瘤细胞株5A9分泌的单克隆抗体；所述的杂交瘤细胞株5A9由猪流...
- 丁珍唐玉新陈君彭琪吴琼宋德平叶昱黄冬艳
- 文献传递
- 猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：1
- 2016年
- 为了解中国猪群中猪诺如病毒感染情况,本研究根据猪诺如病毒保守的RNA依赖性RNA多聚酶(RNA Dependent RNA Polymerase,RDRP)基因序列设计了一套巢式RT-PCR引物,用该引物从猪粪便样品中扩增出与预期目的产物大小一致的条带,经克隆、测序后获得的序列与GenB ank数据库序列比对,证明所扩增的序列属于猪诺如病毒,表明本研究成功建立了猪诺如病毒巢式RT-PCR检测方法。该检测方法具有高特异性和敏感性,应用该方法检测某猪场健康育肥猪粪便样品,阳性率为54.5%。通过RDRP基因进行核苷酸同源比对发现本文获得的猪诺如病毒Wuning 1株属于GII群诺如病毒,与美国猪诺如病毒毒株OH-QW101/03/US、中国猪诺如病毒毒株Norovirus pig/GII/Ch6/China/2009核苷酸序列同源性最近。值得注意的是猪诺如病毒Wuning1毒株与武汉人诺如病毒毒株E2120/CHN/2010核苷酸同源性高达77.1%,说明猪诺如病毒Wuning 1毒株与武汉人诺如病毒基因组上亲缘性较近。本研究成功建立了一种检测猪诺如病毒的巢式RT-PCR方法,并应用于临床猪粪便样品的检测,为猪诺如病毒的诊断与监测提供了可供借鉴的方法、为猪诺如病毒的进化、分子病毒学及与人诺如病毒关系的深入研究提供依据。
- 陈燕君唐玉新周信荣宋德平黄瑫彭棋李安琪张帆帆张田生叶昱吴琼
- 关键词：巢式RT-PCR同源性分析
- 一种新型酶联免疫吸附洗板器
- 本发明公开了酶联免疫吸附洗板技术领域的一种新型酶联免疫吸附洗板器，包括洗板箱，洗板箱底部固定连接有分水筒，分水筒底部设有出水塞，分水筒内部安装有定量塞，定量塞和出水塞之间设有滑筒，滑筒外滑动连接有底部塞和顶部塞，滑筒中部...
- 宋德平唐玉新叶昱黄冬艳
- 新现猪Delta冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：35
- 2016年
- 【目的】猪Delta冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是近年来新发现的可引起猪只,特别是新生仔猪腹泻的冠状病毒,其引发的腹泻具有较高的发病率和死亡率,是造成新生仔猪死亡的重要原因之一。试验拟建立新现PDCoV RT-PCR检测方法,并调查当前江西腹泻猪群中PDCoV的感染情况。【方法】通过对Gen Bank数据库中PDCoV全基因组序列的比对分析,找出保守序列,用Primer 3.0在线软件设计1对扩增PDCoV核衣壳(N)蛋白基因片段的特异性引物,基于该引物建立PDCoV RT-PCR检测方法;用建立的方法检测腹泻猪粪便及肠道样品,挑选阳性扩增产物进行克隆、测序;用本试验获得的PDCoV序列与其他国家或地区的PDCoV序列以及猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)共同构建进化树,分析PDCoV各毒株及其与PEDV和TGEV之间的进化关系;以PEDV、TGEV、猪库布病毒(PKoV)、猪星状病毒(PAstV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(CSFV)RNA为模板验证引物的特异性;构建PDCoV核衣壳蛋白基因片段重组质粒,并以系列稀释的重组质粒为模板确定所建立的PDCoV RT-PCR方法的敏感性;应用建立的RT-PCR方法调查249份2012—2015年江西省猪群腹泻样品中PDCoV的存在情况,随机抽取一定数量的RT-PCR阳性扩增产物进行克隆、测序进一步验证反应的特异性。【结果】1以腹泻猪粪便样品RNA为模板,应用所设计的特异性引物扩增出了329 bp的单一条带,与预期目的片段大小一致,扩增产物经克隆后测序,将获得的序列与NCBI Gen Bank数据库序列进行比对,比对结果表明试验所获得的序列与数据库中PDCoV序列的同源性高达99.1%,证明所扩增的序列属于PDCoV;2将8条本试验获得的PDCoV N基因片段序列与18株其他国家或地区的PDCoV毒株以及PEDV、TGEV的相应N基因片段序列构建进化树,结果表明26条PDCo V序列属于同一个分支,而PEDV和TGEV则分别属�
- 张帆帆宋德平周信荣黄冬艳李安琪彭棋陈燕君吴琼何后军唐玉新
- 关键词：RT-PCR腹泻进化树
- 利用CRISPR/Cas9系统快速构建携带EGFP的PRV-ΔTK重组变异株
- 2024年
- 伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)能够引起猪只出现以呼吸困难、繁殖障碍和神经系统疾病等为特征的伪狂犬病,在世界范围内传播广泛。2011年以来,新现的PRV变异株导致传统疫苗株的免疫保护效果不佳,且原有的疫苗株制备方法耗时耗力,因此现阶段急需开发一种高效疫苗株筛选的方法。采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,设计2条靶向PRV毒力基因TK的单链引导RNA(single guide RNA,sgRNA),敲除PRV变异株CH/JX/2016编码的TK基因,再利用同源修复质粒在TK基因座位置插入增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP),经多轮蚀斑纯化获得rPRV-ΔTK/EGFP毒株。结果表明本研究构建的sgRNA切割效率高,只经过3轮纯化就可完成rPRV-ΔTK/EGFP毒株的制备,且EGFP基因正常表达。CRISPR/Cas9系统能够简便快速高效地编辑PRV基因,在疫苗候选株创制中潜力巨大,而且拯救的rPRV-ΔTK/EGFP毒株不仅可以作为研究PRV变异株感染进程的示踪毒株,还能用于后续抗病毒药物的筛选。
- 叶再娇曾川顾俊王培霞沈金燕宋德平黄冬艳黄冬艳何后军邬向东叶昱
- 关键词：伪狂犬病病毒
- 产蛋鸡自然热应激的体温变化及对鸡身喷水缓解热应激的效果观察被引量：7
- 1995年
- 现场调查表明,通常开放式鸡舍的笼养产蛋鸡由自然热应激导致的死亡,绝大部分发生于晚间8～12时。为揭示其原因,有必要观察产蛋鸡在自然热应激状态下的体温变化规律。直接对鸡身喷水是缓解产蛋鸡夏季热应激的有效措施,其原理何在,以及长期喷水是否会对鸡产生不利影响,也要通过实验来证实。为此,进行了以下实验。 一、材料和方法 1.试验鸡:选用健康罗曼产蛋鸡48只,饲养于实验室立式铁丝鸡笼内,上、下两层各8个小笼(48×33×40厘米),每小笼养3只。 2.实验方法:观察产蛋鸡自然热应激的体温变化于1994年7月2日进行。根据南昌地区气象预报,该日气温为28～37℃。测定实验室内的环境温度和全部实验鸡的体温分别于6、9、12、15、18、21和24时各进行一次。
- 花象柏周吉薇唐玉新胡
- 关键词：鸡病卵用鸡体温
- 泰和鸡哈德氏腺研究被引量：1
- 1995年
- 应用光镜、透射电镜以及ANAE法和IGSS法对不同日龄的泰和鸡哈德氏腺进行显微、亚显微结构和组化、免疫组化研究结果表明：泰和鸡哈德氏腺既是一外分泌腺，又是一以B淋巴细胞为主的外周淋巴器官．T，B淋巴细胞数量随日龄增长有所增加，至7日龄显蓄增多，14～88日龄较7日龄有所增高，但不显著。
- 祁伟唐玉新花象柏
- 关键词：泰和鸡T淋巴细胞B淋巴细胞
- 新型冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：5
- 2021年
- 【目的】当前,新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)导致的疫情在全球大流行,严重危害人类的生命健康。研究拟制备并鉴定针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白(nucleocapsid,N)的单克隆抗体,为SARS-CoV-2新型快速检测方法的创制奠定基础。【方法】纯化原核表达的SARS-CoV-2 N重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,经过4次免疫后将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并通过western blot和间接免疫荧光试验鉴定抗体的反应性。【结果】经3次亚克隆,试验获得了2株能够稳定分泌抗原特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D11和8G6;并且制备的抗体与真核表达的SARS-CoV-2 N蛋白反应原性良好。【结论】研究制备的单克隆抗体能够用于SARS-CoV-2的检测。
- 肖琦何后军江宁曾川顾俊田梦婷王培霞于晓梦黄冬艳黄冬艳唐玉新甘平
- 关键词：新型冠状病毒单克隆抗体核衣壳蛋白
- 仔猪断奶后应激性疾病的调查被引量：18
- 1996年
- 仔猪断奶后应激性疾病(PWSD)在集约化猪场时有发生,经对南昌市4个猪场640窝共6394头28,35日龄断奶仔猪的调查,从断奶之日起至60日龄结束,PWSD发病率分别为79.50%,73.17%,76.60%和54.25%;死亡率分别为15.07%,13.32%,12.61%和10.60%。当地PWSD主要包括非传染性腹泻(NID)、断奶后腹泻综合征(WDS)、水肿病综合征(ODS)、断奶后僵猪综合征(WPS)、断奶后休克样综合征(WSS)和断奶后咬尾咬耳综合征(TB-ECS)等6种。同时对上述疾病的发病原因、发病时间及临床症状、剖检变化进行了观察和探讨。
- 全炳昭唐玉新章寿民胡国良黄仁友王小琴
- 关键词：仔猪应激性疾病猪病疫情调查
- 猪瘟病毒的免疫酶组织化学定位
- 1992年
- 本实验结果证实PAP法在检测、定位猪瘟病猪组织中的病毒抗原是一种特异性强、敏感性高的一种新技术。主要优点是:①背景浅,阳性显色好,色深清楚;②适于检测、定位微量抗原。为病理诊断和鉴别诊断提供了可靠的形态学和免疫学依据。
- 王亚鸣唐玉新王承浩
- 关键词：单克隆抗体免疫酶猪瘟病毒
