刘朝阳
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 诱导小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的方法
- 本发明涉及的是一种诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)向神经细胞分化的方法，该方法采用原代鼠胚成纤维细胞(PMEF)作为饲养层，取mESCs接种于饲养层上，接种于神经干细胞、mESCs培养液的混合液及神经干细胞培养液培养；逐...
- 庞希宁顾文佳李晓丰刘朝阳施萍
- 文献传递
- 序贯法诱导小鼠胚胎干细胞向神经元样细胞的分化被引量：2
- 2009年
- 背景:目前小鼠胚胎干细胞体外向神经方向诱导分化的研究报道诸多,但其分化的过程很难控制,很多实验的操作方法复杂,分化比率也很低。目的:建立一种稳定、高效、简便的实验方法,将小鼠胚胎干细胞诱导分化为神经细胞。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-08/2008-01在中国医科大学发育生物学教研室完成。材料:小鼠胚胎干细胞系AB2.1,由美国南加州大学医学院惠赠。方法:在饲养层细胞上培养小鼠胚胎干细胞,采用"序贯诱导法",优化实验条件,将小鼠胚胎干细胞向神经方向诱导,对诱导后细胞进行成熟神经细胞标志物鉴定,并用流式细胞仪测定诱导分化比率。主要观察指标:①倒置荧光显微镜下观察小鼠胚胎干细胞形态特征。②优化序贯诱导法的3个实验条件。③实验条件优化后诱导至第10天分化细胞的形态特征。④诱导后第10天细胞免疫荧光法和蛋白免疫印迹检测神经细胞特异性标志物的表达。⑤蛋白免疫印迹检测诱导分化第4天和第10天细胞的神经细胞β-微管蛋白J1的表达。⑥流式细胞仪检测神经元特异性核蛋白阳性细胞百分比。结果:①生长于饲养层上的未分化鼠胚胎干细胞聚集呈圆形或椭圆形集落样生长,细胞排列紧密,集落边界清楚。②优化后的"序贯诱导法"在诱导时首次接种所用培养液的血清浓度为12.5%,小鼠胚胎干细胞首次接种最佳密度为1.0×108L-1,完全更换为无血清培养液的时间为第5天。③诱导至第10天分化细胞出现的突起可达胞体长度的10倍以上。也有小部分分化细胞胞体呈多边形,有多个短突起,仅有一个细长突起,出现突触样结构和生长端样结构,类似神经元。④诱导后第10天细胞免疫荧光法检测神经元特异性标志物巢蛋白、神经细胞β-微管蛋白J1、神经元特异性核蛋白、神经细胞黏附分子1表达阳性,神经胶质细胞标志物胶质细�
- 李晓丰顾文佳刘朝阳张涛刘晓玉庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞神经元诱导分化
- 骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经细胞
- 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有多向分化潜能的成体干细胞,除了能向多种中胚层组织细胞分化,如骨软骨和脂肪细胞外,还可以诱导分化成非中胚层的细胞组织如:神经细胞,肺泡和小肠细...
- 刘朝阳
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化神经元
- 文献传递
