刘丽玲 作品数:74 被引量:288 H指数:10 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
一种检测禽流感病毒不同亚型cDNA的方法 本发明公开了一种新的检测禽流感病毒不同亚型cDNA的方法,步骤如下:分别制备覆盖禽流感病毒H5、H7、H9亚型及M基因的DNA片段,将所制备的DNA片段点到氨基包被的玻璃载体上制备成基因芯片备用;通过反转录将被检病毒样品... 王秀荣 于康震 陈华兰 邓国华 刘丽玲 孔宪刚 乔传玲 姜永萍文献传递 我国H5N1亚型高致病性禽流感病毒抗原变异株的鉴定及防控研究 陈化兰 李雁冰 田国彬 施建忠 曾显营 姜永萍 邓国华 王秀荣 刘丽玲 项目名称:中国H5N1亚型高致病性禽流感病毒抗原变异株的鉴定及防控研究。该项目属于兽医科学技术领域畜禽传染病防治,为病原学基础研究和疫苗应用研究。2006年2月,课题组从山西一养鸡场分离到一株H5N1亚型高致病性禽流感病...关键词:关键词:禽流感 灭活疫苗 畜禽传染病 快速发展我国的奶牛业 2000年 刘丽玲 李涛关键词:奶牛业 宏观调控 乳品加工 H5亚型禽流感病毒一步法复合RT-PCR检测方法的建立 由A型流感病毒引起的禽类的感染和/或疾病综合征,就是禽流行性感冒(简称禽流感,AVIAN INFLUENZA,AI).引起AI的A型禽流感病毒(AVIAN INFLUENZA VIRUS,AIV)为单股负链RNA,由8个... 包红梅 王秀荣 刘丽玲 王昱 陈化兰 李一经关键词:H5亚型 禽流感病毒 RT-PCR检测 文献传递 网络资源链接 SYBR Green I荧光RT-PCR方法检测禽流感病毒 被引量:14 2006年 为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测,试图建立快速检测AIV的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,并与普通RT-PCR方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明:此次建立的检测AIV的SYBRGreen I荧光RT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后72 h的AIV,对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的AIV检出率为5.33%(9/169),而普通RT-PCR方法检出率为6.51%(11/169),病毒滴定检出率为5.62(9/160)。对其他病毒(NDVI、BDVI、BV、VA)则未检测到,且整个检测过程只需4 h,表明该方法特异、准确、快速。 刘丽玲 姜永萍 王秀荣 陈化兰 魏萍关键词:禽流感病毒 SYBR H6N2亚型禽流感病毒全基因组的序列分析及其致病性研究 2013年 2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定出1株H6N2亚型禽流感病毒(AIV)。为了解该病毒DK/GD/S6/08(H6N2)的生物学特征,本研究对其全基因序列进行分析并对SPF鸡和SPF鸭进行致病性试验。结果表明DK/GD/S6/08(H6N2)的HA裂解位点附近的氨基酸序列为340QIETR↓GLF347,符合低致病力AIV的特征。其HA基因与A/duck/Shantou/8365/2005(H6N6)同源性最高;NA基因在颈部无缺失;除M基因外,其他5个内部基因均来源于H6亚型AIV。鸭致病性试验表明DK/GD/S6/08(H6N2)可以感染SPF鸭,并通过泄殖腔排毒,法氏囊等脏器中可以检测到病毒,肺脏、肾脏、法氏囊和脑组织中可见病理变化。鸡致病性试验显示鸡的脑、肺脏、脾脏、法氏囊、肾脏、十二指肠和胰腺均未检测到病毒,咽喉拭子和泄殖腔拭子中未检测到病毒,表明该病毒不能感染SPF鸡。 刘丽玲 胡守萍 段振华 李雁冰 施建忠 田国彬 曾显营 陈化兰关键词:禽流感病毒 一种检测禽流感病毒不同亚型cDNA的基因芯片及其制备方法 本发明公开了一种新的检测禽流感病毒不同亚型cDNA的方法,步骤如下:分别制备覆盖禽流感病毒H5、H7、H9亚型及M基因的DNA片段,将所制备的DNA片段点到氨基包被的玻璃载体上制备成基因芯片备用;通过反转录将被检病毒样品... 王秀荣 于康震 陈华兰 邓国华 刘丽玲 孔宪刚 乔传玲 姜永萍文献传递 大鼠实验性急性胰腺炎动物模型的建立 被引量:7 2003年 目的 利用手术方法建立大鼠实验性急性胰腺炎动物模型。方法 5 6只Wistar大鼠 ,随机分为 3组 ,实验组 :结扎胆总管末端 ;对照组 :按Nevalainen法 ,结扎胆总管开口远、近各 1cm的十二指肠 ;正常组 :正常Wist ar大鼠。实验组与对照组分别于术后第 10、2 4、4 8h采血测定血清淀粉酶、血清钙及血糖 ,观察胰腺大体病理变化并作组织学检查。结果 实验组及对照组大鼠的血清淀粉酶显著高于正常组 ,血清钙显著低于正常组 ,而血糖差异不显著。结论 经生化分析及组织学检查提示急性胰腺炎 (AP)动物模型建立。 李涛 王海燕 刘丽玲 张新臣 郭守利 王海霞 林彦关键词:急性胰腺炎 动物模型 手术 AP 病理学 一株禽流感病毒全基因的序列分析 被引量:3 2005年 通过反转录_聚合酶链式反应(RT_PCR)技术对禽流感病毒A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)的8个基因片段即PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA分别进行扩增,然后将其克隆到PMD18_T载体后进行序列测定和拼接;并将克隆到的8个基因片段与以下毒株各个基因的相应序列进行比较分析:Duck/HongKong/Y280/97(DHKY280/97)、Duck/HongKong/YT439/97(DHKY439/97)、Quail/HongKong/G1/97(QHKG1/97)、A/Chicken/Beijing/1/94(CBJ1/94)、Chicken/HongKong/G9/97(CHKG9/97)、A/Turkey/California/1/66(TC/1/66)。结果表明:我们克隆到的TW1/66株的8个基因片段均含有相应病毒基因的完整开放阅读框架:TW1/66的各基因与TC/1/66株相应各基因同源性最高(NS基因除外,同源性只有67.4%)。与其它各毒株各基因同源性均较低,但与DHKY439/97各基因同源性高于与DHKY280/97、QHKG1/97、CBJ1/94、CHKG9/97各基因同源性。 刘丽玲 王秀荣 陈化兰 邓国华 乔传玲 李呈军关键词:禽流感病毒 基因 克隆 A/African Startling/England-Q/983/79(H7N1)与我国H7N2亚型禽流感病毒分离株的比较 2006年 本研究通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别扩增了禽流感病毒A/AfricanStartling/Eng-land-Q/983/79(A.S/E.Q)(H7N1)的8个基因片段即PA、PB1、PB2、NS、NP、M、HA、NA基因,将其分别克隆到PMD18-T载体后进行序列测定;并将克隆到的8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较分析。结果表明所克窿到的8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架;HA、NA基因的序列分析表明A.S/E.Q符合低致病力禽流感病毒的特征;与我国H7N2亚型AIV分离株A/chicken/Hebei/1/02的序列比较发现,A/chicken/Hebei/1/02的HA、M、NP、PB1、PA基因与A.S/E.Q同源性最高,说明我国北部分离的AIV起源于A.S/E.Q。 刘丽玲 陈化兰 李雁冰 李呈军 魏萍 王秀荣关键词:H7N1 H7N2 分离株