黄永成
- 作品数：18 被引量：21H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技攻关计划四川省重点科学建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- DPV弱毒皮下注射免疫对雏鸭消化道双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌数量的影响
- 采用已建立的双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌的定量PCR检测方法,对DPV弱毒皮下注射的免疫雏鸭的消化道双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌进行定量检测.双歧杆菌的数量变化为:直肠的含量变化与对照组相比呈一定的波动性,但无明显差异性,食...
- 黄永成陈孝跃程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰葛忠源郭宇飞张素辉胡骑
- 关键词：皮下注射双歧杆菌芽孢杆菌肠球菌
- 文献传递
- 双歧杆菌16SrDNA群特异性PCR方法的建立及对鸭肠道双歧杆菌的检测
- 根据GenBank双歧杆菌16S rDNA序列设计并合成双歧杆菌群特异性PCR引物,建立的PCR反应最佳Mg2+浓度为2.0mM,最佳退火温度为53℃,对两双歧杆菌DNA模板能够扩增出149bp的特异性片段,而对动物肠道...
- 黄永成陈孝跃程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰葛忠源郭宇飞张素辉胡骑
- 文献传递
- 鸭瘟病毒强毒株在感染鸭实质器官内的增殖与分布被引量：9
- 2008年
- 鸭瘟病毒(DPV)CHv强毒株经皮下注射、滴鼻和口服3种途径分别感染20日龄天府肉鸭,于攻毒后10、30、60、90min以及4、12、48、72h和9、15d每组分别剖杀2只鸭,采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺等实质器官,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR对DPV在这些器官的分布和增殖进行检测。结果表明,DPV分布到具体器官的速度与感染的途径、鸭的解剖结构密切相关,其中皮下注射是DPV分布到各实质器官速度最快的途径。30min于皮下感染鸭的肝、脾、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、肺、脑、肾,口服感染鸭的肺和法氏囊,滴鼻感染鸭的心脏和哈德氏腺均检测到DPV-DNA;90min所有受检样品中检测到DPV-DNA。鸭抗DPV感染的免疫器官的重要性依次是脾、胸腺、法氏囊和哈德氏腺,30min内DPV-DNA分布到脾、胸腺、法氏囊的速度和数量决定了DPV感染的潜伏期和疾病的严重程度。不同途经感染鸭的相同器官在同一时间内的DPV-DNA拷贝数大多以皮下感染鸭为最高。DPV致死鸭的法氏囊和肾是DPV-DNA含量最高的实质器官。
- 杨晓燕程安春汪铭书齐雪峰郭宇飞葛忠源黄永成张素辉胡骑于波周登春陈孝跃
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 大肠杆菌属16S rDNA实时荧光定量PCR方法的建立及应用被引量：7
- 2007年
- 根据GenBank大肠杆菌属16S rDNA基因序列设计并合成PCR引物及针对大肠杆菌属的特异Taqman探针,以大肠杆菌标准菌株的PCR扩增产物作为阳性模板制定标准曲线,建立大肠杆菌属实时荧光定量PCR检测方法。该法Mg2+最佳工作浓度5 mmol/L,探针最佳工作浓度0.12μmol/L,标准曲线相关系数为0.998,能够定量和特异性检测大肠杆菌而与肠道优势菌群的代表种葡萄球菌、双歧杆菌和芽孢杆菌呈阴性反应,检测大肠杆菌16S rDNA基因的灵敏度达40.8 copies/μL。应用建立的方法对20、26、324、1、47、56日龄樱桃谷鸭的气管、食道、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠进行检测结果表明(以每个细菌含1个16S rDNA基因拷贝数计),大肠杆菌属细菌总量,气管内为7.06×107～3.01×108个;食道内为1.73×108～3.23×108个;十二指肠内为2.29×108～2.39×109个;空肠内为1.28×108～1.69×109个;回肠内为1.86×108～1.90×1010个;盲肠内为6.01×108～1.38×109个;直肠内为1.07×108～4.67×1010个。樱桃谷鸭从食道到直肠的大肠杆菌属细菌的数量呈现上升趋势,盲肠和直肠分布量较多。
- 葛忠源程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰黄永成张素辉胡骑陈孝跃
- 关键词：实时荧光定量PCR消化道呼吸道
- FQ-PCR检测DPV强毒皮下注射对鸭呼吸道双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌数量的影响
- 根据本实验室建立的检测双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法, 对20日龄樱桃谷鸭经皮下注射途径感染鸭瘟病毒CH强毒株后的呼吸道内双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的数量变化规律进行了研究。结果表明,...
- 张素辉程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰黄永成葛忠源胡骑陈孝跃
- 关键词：FQ-PCR双歧杆菌芽孢杆菌DPV呼吸道
- 文献传递
- 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR对DPV强毒不同途径感染鸭实质器官增殖分布规律研究
- 鸭瘟病毒(DPV)CHv强毒株经皮下注射、滴鼻和口服三种途径分别感染20日龄天府肉鸭, 于10、30、60、90min以及4h、12h、48h、72h、9d、15d分别剖杀两只鸭,采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊...
- 杨晓燕程安春汪铭书齐雪峰郭宇飞葛忠源黄永成张素辉胡骑于波周登春陈孝跃
- 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光定量PCR
- 文献传递
- FQ-PCR检测DPV强毒皮下注射对鸭消化道双歧杆菌、芽孢杆菌和肠球菌数量的影响
- 根据本实验室建立的检测双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法, 对20日龄樱桃谷鸭经皮下注射途径感染鸭瘟病毒CH强毒株后的消化道内双歧杆菌、芽孢杆菌及肠球菌的数量变化规律进行了研究。结果表明,...
- 张素辉程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰黄永成葛忠源胡骑陈孝跃
- 关键词：FQ-PCR双歧杆菌芽孢杆菌DPV消化道
- 文献传递
- 感染微生态及鸭重要致病微生物感染和免疫微生态研究若干进展
- 本文介绍了感染微生态及其主要研究方法的研究进展以及四川农业大学动物微生态工程研究中心对鸭重要致病微生物感染和免疫微生态研究若干进展.
- 程安春曹省艳杨金龙潘康成倪学勤杨晓燕葛忠源黄永成张素辉尹念春
- 关键词：鸭病防治致病微生物细菌感染免疫病理
- 文献传递
- 双歧杆菌16SrDNA群特异性PCR方法的建立及对鸭肠道双歧杆菌的检测
- 根据GenBank双歧杆菌16S rDNA序列设计并合成双歧杆菌群特异性PCR引物,建立的PCR反应最佳Mg2+浓度为2．0mM,最佳退火温度为53℃,对两双歧杆菌DNA模板能够扩增出149bp的特异性片段,而对动物肠道...
- 黄永成程安春汪铭书杨晓燕齐雪峰葛忠源郭宇飞张素辉胡骑陈孝跃
- 关键词：双歧杆菌肠道
- 文献传递
- 16SrDNA实时荧光定量PCR检测DPV强毒感染鸭气管及消化道大肠杆菌动力学被引量：4
- 2006年
- 参照Genebank大肠埃希氏菌属(E.coli)16SrDNA保守基因序列设计并合成定量PCR引物及针对大肠杆菌属的Taqman探针,以E.coli标准菌株的PCR扩增产物作为阳性模板制作标准曲线,建立检测E.coli的定量PCR方法。该法Mg2+最佳工作浓度5 mmol/L,能够定量和特异检测E.coli而对肠道优势菌群的代表种葡萄球菌、双歧杆菌呈阴性。检测E.coli的灵敏度可达3个/mL。利用该法对DPV强毒感染鸭急性病例的气管和消化道E.coli检测,结果表明:气管E.coli数量普遍低于对照。食道波动巨大,普遍高于对照;十二指肠、空肠变化不明显;回肠波动巨大,总体高于对照;盲肠显著低于对照;直肠与对照差异不显著。DPV感染致死鸭的气管E.coli数量显著低于对照;食道和十二指肠极显著高于对照;空肠、回肠和盲肠均略高于对照;直肠略低于对照。
- 胡骑程安春汪铭书刘艳丽葛忠源黄永成张素辉杨晓燕齐雪峰陈孝跃
- 关键词：气管消化道大肠杆菌
